基于UHPLCMS的冠心病心绞痛血瘀证患者血清代谢组学研究.PDFVIP

临床研究 基于UHPLC/MS的冠心病心绞痛血瘀证患者 血清代谢组学研究 1 2 1 1 1 1 周耀中 杨 涛 季雪峰 蔡文娟 邵 燕 沈秋生 （1.南京中医药大学附属常熟市中医院，江苏常熟215500 ； 2.上海中医药大学附属曙光医院，上海200120） 摘 要 目的：寻找冠心病心绞痛血瘀证内源性代谢标志物，探讨冠心病心绞痛血瘀证形成的生物学基础。方法： 收集冠心病心绞痛患者及健康人的血液样品，通过超高效液相色谱/质谱（UHPLC/MS）联用及模式识别的代谢组学方 法进行比较分析。结果：冠心病心绞痛血瘀证组、冠心病心绞痛非血瘀证组、健康组能够在正交偏最小二乘法判别分析 （OPLS-DA）模式识别图上被明显区分，且模型可靠性高。冠心病心绞痛血瘀证患者的柠檬酸含量减少，肉毒碱、组氨酸、 P 黄嘌呤含量增多（VIP1且 0.01）。结论：找到4种冠心病心绞痛血瘀证内源性代谢标志物，依次为柠檬酸、肉毒碱、组氨 酸、黄嘌呤。能量代谢、脂代谢、氨基酸代谢、嘌呤分解代谢的改变构成了其代谢特征，为冠心病心绞痛血瘀证的诊断和治 疗提供了新的思路与方法。 关键词  冠心病  心绞痛  血瘀  UHPLC/MS  代谢组学  代谢标志物 中图分类号 R541.404 文献标志码 A 文章编号 1672-397X（2018）06-0025-04 基金项目　常熟市科技发展计划（CSWS201615） 代谢组学是继基因组学、转录组学和蛋白质组 体的角度对冠心病心绞痛血瘀证机制进行阐释。本 学之后发展起来的一门新兴学科，主要通过核磁共 研究采用最新的超高效液相色谱-质谱（HPLC/MS） 振氢谱、气相色谱质谱联用、液相色谱质谱联用等 技术，以其强大的定性、定量分析能力对冠心病心绞 技术手段获取代谢物的原始数据，以模式识别计算 痛血瘀证患者行非靶向血清代谢组学检测，寻找其 分析系统研究小分子物质，帮助我们从海量的代谢 潜在的内源性代谢标志物，为冠心病心绞痛血瘀证 产物数据中“跳”出来，一目了然地发现差异性代谢 客观化研究提供新的思路和方法。 物，然后通过已知的代谢通路逆推出调节酶，最终完 1 临床资料 成疾病发病机制、药物治疗机制等研究，目前已应 1.1  一般资料  选取2015年5月至2016年5月上 用于肿瘤、肝病、心血管等疾病的诊断和疗效评价。 海曙光医院确诊为冠心病心绞痛的患者76例（已 近年来，代谢组学在中医药领域的研究也越来越广 通过上海曙光医院伦理委员会伦理审批，伦理审查 [1] 泛 。 批件号：2015-396-24-02）。其中冠心病心绞痛 研究发现“血瘀”常贯穿冠心病（CHD）心绞痛 血瘀证组（以下简称CHD血瘀证组）38例：男26 发病始终，“血瘀证”是冠心病心绞痛最主要的证 例，女12例；平均年龄（65.89±1.79）岁；平均病程 [2] 型 。辨证论治是中医理论体系的核心，中医“证” （8.26±0.78）年。冠心病心绞痛非血瘀证组（以下简 的精准判识是提高中医药临床疗效的核心环节，而传 称CHD非血瘀证组）38例：男21例，女17例；平均年 统的四诊辨证受患者和临床医生主观因素影响较大， 龄（64.74±1.52）岁；平均病程（6.39±0.64）年。另收 缺乏客观标准。因此，利用代谢组学技术开展冠心病 集健康人38例作为健康对照组：男19例，女19例；平 心绞痛血瘀证的客观化研究有积极的临床意义。 均年龄（62.13±1.52）岁。3组性别、年龄等一般资料 目前有学者开展了有关冠心病血瘀证代谢组学 P 比较差异无统计学意义（ 0.05），具有可比性。 的研究，但鉴于各个研究采用的技术方法、研究对 1.2  诊断标准  参照《慢性稳定性心绞痛诊断与