酶2（临床3班）PPT课件.pptVIP

1 第三节 酶促反应动力学 Kinetics of Enzyme-Catalyzed Reaction 生物化学与分子生物学教研室 江 渝 Tel:752942(O); E-mail: yujiang0207@163.com 2014-09-23 第三章 酶 2 细胞内的酶有多种存在形式: 单体酶 寡聚酶 多酶体系 多功能酶 酶的分子组成: Review 酶的概念 3 活性中心酶分子上与底物结合并起催化作用的部位。 酶的必需基团是与其功能活性密切相关的氨基酸残基侧链 酶的分子结构: Review 同 工 酶(isoenzyme) 4 （一）高效性 酶促反应的特点 （二）高度的特异性 （三）可调节性 酶通过促进底物形成过渡态而提高反应速率 Review 有效地降低反应活化能 诱导契合作用。 5 一、底物浓度对反应速度影响的作图呈矩形双曲线 Km值为酶促反应速度达到最大反应速度(Vm)一半时的底物浓度，单位为mol/L。 Km是酶的特征性常数，Km可近似表示酶对底物的亲和力（ Km 与亲和力呈反比）； 同一酶对于不同底物有不同的Km值。 Km值的意义 酶促反应动力学 6 二、酶浓度对反应速度的影响呈直线关系（底物足够） [S][E]时，反应速度与酶的浓度呈正比关系。 关系式为：V = K3 [E] [S][E] [E] V 0 9 五、抑制剂可降低酶促反应速度 抑制剂 ( inhibitor, I )： 能使酶的催化活性下降而酶蛋白不变性的物质。 抑制原理：与酶活性中心内、外的必需基团结合，抑制酶的催化活性。 移去抑制剂后酶的活性可恢复。 区别于酶的变性 抑制剂对酶有一定选择性 引起变性的因素对酶没有选择性 10 抑制作用 不可逆抑制 可逆性抑制 1. 竞争性抑制作用 (competitive inhibition) 2. 非竞争性抑制作用 (non-competitive inhibition) 3. 反竞争性抑制 (uncompetitive inhibition) 酶抑制作用的类型 (irreversible inhibition) (reversible inhibition) 五、抑制剂可降低酶促反应速度 11 五、抑制剂可降低酶促反应速度 （一）不可逆性抑制作用 特点： 1. 以共价键与酶活性中心上的必需基团相结合 2. 不能用透析、超滤等方法予以除掉。只能通过化学的方法将被结合的基团置换出来。 有机磷化合物  羟基酶 解毒 -- -- -- 解磷定(PAM) 重金属离子及砷化合物  巯基酶 解毒 -- -- -- 二巯基丙醇(BAL) 举例 12 五、抑制剂可降低酶促反应速度 （二）可逆性抑制作用 特点： 这类抑制剂与酶以非共价键疏松地结合而引起酶活性的降低或丧失。 结合是可逆的，能迅速达到平衡。可用透析、超滤等方法除去抑制剂，恢复酶活性。 类型 13 抑制剂与底物的结构相似，能与底物竞争酶的活性中心，从而阻碍底物与酶形成中间产物(中间复合物)。这种抑制作用称为竞争性抑制作用。 五、抑制剂可降低酶促反应速度 1、竞争性抑制作用 14 反应模式 五、抑制剂可降低酶促反应速度 15 特点 抑制程度取决于抑制剂与酶的相对亲和力及相对底物浓度； I与S结构类似，竞争酶的活性中心； 动力学特点：Vmax不变，表观Km增大。 五、抑制剂可降低酶促反应速度 16 磺胺类药物的抑菌机制 与对氨基苯甲酸竞争二氢叶酸合成酶 五、抑制剂可降低酶促反应速度 细菌繁殖 17 2、非竞争性抑制 概念： 与酶活性中心以外的部位可逆地结合 不影响酶与底物的结合 而酶与底物的结合，也不影响酶与抑制剂的结合 底物与抑制剂之间无竞争关系 但是，酶-底物-抑制剂复合物(ESI)不能进一步变成产物 这种抑制作用称做非竞争性抑制作用。 五、抑制剂可降低酶促反应速度 18 反应模式 五、抑制剂可降低酶促反应速度 2、非竞争性抑制 19 20 * 特点 抑制剂与酶活性中心外的必需基团结合，底物与抑制剂之间无竞争关系； 抑制程度取决于抑制剂的浓度； 动力学特点：Vmax降低，表观Km不变。 五、抑制剂可降低酶促反应速度 21 概念： 抑制剂仅与酶-底物复合物（ES）结合，使ES的量下降，既减少从中间产物转化为产物的量，也同时减少解离出酶和底物的量。这种抑制作用称为反竞争性抑制作用。 3、反竞争性抑制 五、抑制剂可降低酶促反应速度 22 反应模式 五、抑制