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双水相萃取技术在蛋白质与酶中的应用研究进展 摘要：双水相萃取技术作为一种新型的分离技术日益受到人们的重视，与其他的萃取技术和分离技术相比较，双水相萃取技术操作条件温和，易于连续操作，处理量大等优点。本文综述了双水相萃取技术在蛋白质与酶当中最近几年的应用进展，分析了双水相萃取技术分离蛋白质和酶的优缺点，并对该技术在蛋白质和酶中的应用前景进行了展望。 关键词：双水相萃取 蛋白质 酶 应用 研究进展 Application and Progress of Aqueous Two-Phase Extraction Technology in Protein and enzyme Abstract:As a new separation technology,aqueous two-phase extraction technology has received more and more importance;In contrast to other extraction technology and separation technology,it have many advantages,for example,mild operation condition,continuous operation easily,large treatment capacity and so on.This paper introduces the application and progress of aqueous two-phase extraction technology in protein and enzyme in latest years ；analysis the advantage or disadvantage of the separation technology in protein and enzyme.The review also discusses the prospect of aqueous two-phase extraction technology in protein and enzyme. Keywords:Aqueous Two-Phase Extraction protein enzyme application progress 引言 液-液萃取技术是化学工业中普遍采用的分离技术之一，在生物化工、基因工程中也有广泛的应用。然而，大部分生物制品的原液是有生物活性的溶液，需要在低温或室温下进行富集、分离，因此常规的萃取技术对于该领域应用受到限制。双水相萃取分离技术是基于液-液理论同时考虑到保持样品生物活性的一种新型萃取分离技术，最早是由荷兰科学家Beijerinck观察到的。1896年，Beijerinck发现，当明胶与琼脂或明胶与可溶性淀粉溶液相混合时，得到一个浑浊不透明的溶液，随之分为两相，上相含有大部分的水，下相含有大部分琼脂（或淀粉），两相的主要成分是水，由此产生了双水相。20世纪80年代，人们发现了一些特殊的双水相系统，其中最典型的是聚氧乙烯基表面活性剂与水构成的双水相系统，当温度超过浊点温度时，具有聚氧乙烯基团的非离子型表面活性剂的水溶液可形成两个互不相溶的水相：上相富含聚合物，下相则几乎全是水，这种双水相系统只使用了一种成相组分，如果浊度较低，在生物分离中使用时特别有利于高聚物的回收。20世纪90年代，人们又发现了阴阳离子两种表面活性剂在水溶液中可形成双水相，从而使双水相的内容不断丰富，应用也越来越广泛。双水相应用的主要问题是体相回收，这方面的研究正在进行，并取得了一定的进展。对于蛋白质生物大分子物质，有相当大的表面积，在双水相中易于单侧分配，用双水相萃取技术处理可以取得较理想的效果。双水相萃取是通过溶质在两水相之间分配系数的差异而进行萃取的技术，其应用于蛋白质和酶的分离纯化具有以下优势： 体系含水量高，可达80% 以上，萃取环境和操作条件温和，蛋白质和酶在其中不易失活；界面张力远远低于水-有机溶剂两相体系的界面张力，有助于强化相际间的质量传递；易于按比例放大和进行连续性操作等。正是由于双水相萃取技术的诸多优势，现已被广泛用于蛋白质的分离纯化，取得了很好的成效。近年来，双水相萃取技术的分离对象进一步扩大，已包括了多肽、氨基酸、植物有效成分、重金属离子和抗生素等。 一，双水相萃取技术在蛋白质中的应用进展 许多研究人员用双水相系统来对蛋白质进行纯化、分离、分析等。本文罗列了以下双水相系统在蛋白质中应用的实例。 萃取血清白蛋白和血红蛋白 朱陈银等[1]研究表明在离子液体四氟硼酸-1-丁基-3-甲基咪唑（[ Bmim ] BF4）和NaH