淋病实验室诊断和治疗的研究课件.ppt

淋病实验室诊断和治疗的研究Study of labratory diagnosis and treatment of gonorrhoea 田洪青 李中伟 史本青 杜东红 张福仁 于美玲 赵天恩 前言 §由于我国性病的发病数逐年上升、诊断技术的缺陷以及严重的并发症等原因，性病已严重影响人们的健康。 §淋病一直是最常见的性病之一 §淋病对其他性病尤其是艾滋病病毒感染具有促进作用。 因此，控制淋病对于具有重要意义。我们自1995年开始，对淋病诊断、淋球菌耐药性及治疗进行了一些研究。 确诊淋病必须依靠实验室检测。传统方法上均以男性尿道、女性宫颈拭子为标本，由于取材有创伤性，给患者造成很大痛苦，且女性取材需行妇科检查，应用受到限制。 本课题探讨了男性与女性首次排空尿、阴道拭子（阴道上端拭子、阴道下端拭子）为标本行PCR检测诊断淋病的效果。 淋病患者中有一大批无症状感染者即亚临床感染，可能与L型淋球菌感染有关。因此，L型淋球菌感染日益受到人们的重视。 由于L型淋球菌菌壁的缺失，难以在普通淋球菌培养基上生长，需要在专门的L型淋球菌培养基上才能生长。 我们应用临床标本进行了L型淋球菌培养，对L型淋球菌感染状况进行了调查。 探讨淋病的治疗，减少传染源，有利于淋病的控制。我 们于1995年~1996年对淋球菌的抗生素敏感性进行了检测。 在不同的时间段，我们分别对左旋氧氟沙星与氧氟沙星、阿奇霉素与美满霉素、头孢曲松与壮观霉素治疗淋病的效果进行了观察。 第一部分：淋病实验室诊断的研究 一 L型淋球菌培养诊断淋病的研究Dianosis of gonorrhoea by culture of L-form gonococcus 背 景 淋病患者中有无症状感染者即亚临床感染，男性约占5％～20％，女性约占40％～60％ 由于L型淋球菌菌壁的缺失，难以在普通淋球菌培养基上生长，需要在专门的L型淋球菌培养基上才能生长，生长条件和生长规律也与普通淋球菌不同，很少由实验室开展L型淋球菌培养。 为了解L型淋球菌感染的状况，我们于1996年6月~1997年6月对326例性病门诊可疑淋病就诊者进行了淋球菌及L型淋球菌检测 方 法 ◆每个病人取三个拭子标本，一个接种于普通淋球菌T-M培养基，一个接种于L型淋球菌，一个行PCR检测 ◆L型淋球菌培养基成分如下：牛肉浸液800ml、蛋白胨10g、胰蛋白胨10g、酵母粉4g、半胱氨酸0.012g、葡萄糖5g、琼脂10g、NaCl1.25g、KCl 0.09g、MgSO4.7H2O 0.1g、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）70g（先以适量乙醇溶解） ◆L型淋球菌菌落形态为“油煎蛋”状、颗粒状、丝状，向下生长，涂片镜检城多形性，如球状、丝状、膨大的杆状体，大小不一 结 果 共326例可疑者入选。检测出165例淋球菌感染者。普通淋球菌培养143例阳性，L型淋球菌培养14例阳性，其中只有4例合并普通淋球菌培养阳性。 L型淋球菌培养检测出8.5%的感染者，单纯L型感染占6.1%。 结 论 L型淋球菌培养可作为淋球菌培养诊断淋病的有益补充。 二 PCR检测首次排空尿诊断男性淋病的研究 背景：确诊淋病要依靠实验室检查，宫颈拭子培养是实验室诊断女性淋病的传统方法，由于需要做妇科检查才能取到宫颈拭子标本，给病人带来不适，因此病人的依从性差，尤其对于青少年女性和无症状者，影响淋病的筛查。由于核酸扩增反应的敏感性极高，不需要活的病原体，使取材简单的非创伤性标本得以应用。 目的：对聚合酶链反应（PCR）检测首次排空尿（FVU）诊断男性淋病的检测效果作出评估。 方法：应用PCR对200例男性的FVU进行检测，同时取尿道拭子标本行PCR及培养，以培养阳性及FVU与拭子PCR均阳性作为阳性判断标准，判断各种方法的检测效果。 结果：64例培养阳性，12例培养阴性而FVU与拭子PCR均阳性。根据判断标准，共有76例阳性。拭子PCR74例真阳性，PCR/FVU73例真阳性。PCR／FVU的敏感性、特异性分别是96％（73／76）和98.4％（122／124），拭子PCR分别是94.7%（74／76）和99.2％（123／124），拭子培养的敏感性是84.2％（64／76）。PCR/FVU的敏感性显著高于拭子培养(χ2=4.27，P＜0.05)。 结论：PCR／FVU是具有高度敏感性和特异性的非创伤性男性淋病实验室诊断方法，FVU可代替拭子标本行PCR诊断男性淋病。 三 PCR检测首次排空尿诊断女性尿道淋病的研究 目的 探讨PCR检测女性首次排空尿(FVU)诊断女性尿道淋球菌感染的价值 方法 取504例性病门诊女性就诊者的尿道拭子、宫颈拭子及FVU，行PCR检测。根据尿道拭子P