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男性不育的实验室诊断及评估南京医科大学课件
男性不育的实验室诊断及评估 南京医科大学生殖医学重点实验室 周作民 4.宫颈粘液穿透试验: 1)?? 体内试验:性交后试验(PCT) 注意事项:①排卵期进行 ②禁欲至少2天 ③最好在性交后9~24小时进行观察。 诊断标准:正常为宫颈粘液中的活动精子数50个/HP或 A级精子20个/HP Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 影响因素:①女方的内分泌状况。 ②宫颈粘液中的白细胞。 ③阴道pH,7或8.5可导致PCT异常。 ④宫颈结构异常。 ⑤抗精子抗体影响。 ⑥性功能异常,如阴道痉挛。 ⑦精子质量差。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 2)?? 体外试验: ①??? 玻片试验 ②??? 精子-宫颈粘液接触试验 ③??? 毛细管试验: 穿透介质: 人宫颈粘液; 宫颈粘液代用品: 牛宫颈粘液; 含人血清精子营养液; 含牛血清白蛋白精子营养液; 鲜鸡蛋清; Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 5.精子顶体酶测定(明胶膜法): 1)?制备5%明胶溶液,吸取100ul均匀涂于载玻片上,自然干燥,4℃湿盒备用,使用前用甲醛-酒精固定液固定60分钟。 2)?精子处理:取液化精液,用PBS稀释至2~4×106个/ml。 3)??涂片:取1滴精液涂于明胶膜上,37℃湿盒2小时。 4)?观察:于相差显微镜下计数有反应精子的百分率及精子的平均反应直径。 5)?正常值:平均反应率≥65%,平均反应直径≥25μm。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 6.去透明带仓鼠卵穿透试验 1)?精子准备: ①?精液充分液化 ②?调整精子浓度至10×106个/ml ③?精子获能:取精液0.5ml,5%CO2,95%空气中, 37℃孵育18~24小时,调整精子浓度至4×106/ml。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 2)?卵细胞准备: ①?取动情第一天仓鼠,腹腔内注射PMSG 30~40U,48~72 小时后再次注射HCG 30~40U,18小时后输卵管内取卵。 ②?1%透明质酸去除卵丘细胞,0.1%胰蛋白酶去除透明带。 3)?体外受精: 将0.1ml精液加至液体石蜡
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