白血病免疫分型课件_2.pptVIP

白血病免疫分型 Contents B lymphoid maturation T lymphoid maturation Neurotrophil maturation Monocytoid maturation 白血病的形态学 白血病免疫分型的特点 白血病免疫分型诊断与形态学比较更客观、更精确(淋系、 M0、M6 、M7及MAL) 属于同一种FAB型的病例，可能具有不同的免疫表型 覆盖率高于基因及染色体，尤其对淋巴系统 慢性淋巴细胞白血病/淋巴瘤 敏感性高于形态及染色体，可达103-104 ----微小残留白血病 比染色体及基因分析快捷，但特异性比之差 目前，免疫分型对粒-单核细胞和单核细胞白血病的鉴别尚有 一定困难.亦受主观因素的影响 白血病免疫分型---CD45-SSC设门 CD45是白细胞的共同抗原成分,所有人类白细胞均表达CD45，包括 淋巴细胞、单核细胞、多形核细胞、嗜酸、嗜碱性细胞、胸腺细胞、脾细胞、扁桃腺细胞以及骨髓前体细胞。 造血系统细胞CD45表达量与细胞分化程度的高低紧密相关，即分化 程度高的细胞CD45表达量高，分化程度低的细胞CD45表达量低（淋 巴细胞单核细胞成熟粒细胞原幼细胞，在红细胞中不表达。 SSC是侧向角参数，反应细胞的颗粒度（成熟粒细胞单核细胞原 幼细胞淋巴细胞）。目前，国际上采用CD45—SSC设门（Gating），可将白血病细胞与正常细胞分开，增加白血病免疫分 型的准确性。 正常人骨髓有核细胞CD45-SSC设门散点图 免疫分型诊断时的四个步骤 根据白血病细胞表达的系列相关抗原，确定其系列来源。如：淋系T/B、粒单系、红系、巨核系等 根据白血病细胞表达的系列分化其相关抗原进一步分型。如：早前B，前B，普通B… 伴系表达抗体（对检测MRD有意义） 靶向抗体指导治疗（CD52，CD33，CD20） 注意抗体组合的问题：PE，APC，PerCP，FITC 弱抗原结合强荧光素 弱荧光素结合强抗原 欧洲组白血病免疫分类的标志积分系统（EGIL） 2008年WHO细胞系别确定标准 髓系：MPO（流式细胞术、免疫组化或者细胞化学） 或单核系分化（非特异性酯酶弥漫性阳性，或者CD11c、CD14、CD36、CD64、溶酶体，两个及以上阳性） T系：胞浆CD3（流式使用抗CD3ε链的抗体；免疫组化使用的多克隆抗体会检测到非T细胞特异性的CD3ζ链） 或胞膜CD3（MPAL中比较罕见） B系：CD19强表达加下述标志中至少一个强表达：CD79a、胞浆CD22、CD10 或CD19弱表达加下述标志中至少两个强表达：CD79a、胞浆CD22、CD10 应用积分方案把急性白血病分为四大类型 单表型急性白血病：某一系列积分大于2分，其他系列为0分。 表达某一系列抗原为主的白血病（伴髓系分化抗原表达的ALL和伴淋系分化抗原表达的AML）：某一系列积分大于2分，伴有另一系列抗原的表达，但积分小于2分或等于2分。 双表型急性白血病：至少两个系列同时大于2分。 未分化型急性白血病：所有系列积分均小于或等于2分。 亚型 典型的免疫标记 M0 CD34,CD33,CD13 M1 MPO,CD34,CD33,CD13 M2 MPO,CD34,CD15,CD13 M3 MPO, CD33,CD13(HLA-DR阴性) M4 MPO,CD33,CD15,CD14,CD13 M5 MPO,CD33,CD14,CD13 M6 CD33,GlyA M7 CD33,CD41,CD42b,CD61 AML免疫分型总结 192例AML病例中免疫分型结果示髓系抗原CD13、CD33、MPO最常见，其次CD117也是髓系比较敏感的指标，在原始细胞百分比高的AML亚型中有较高的阳性率。 有文献报道M3缺乏CD117的表达，而本组资料中有84.6%的M3病例表达CD117,与Paitta和zheng jine报道的结果一致。这一差异可能与各研究的病例数较少或所使用的单克隆抗体来源不同有关。 39例病例中有34例CD34与DR均为双阴性，因此强自发荧光、CD34与DR双阴性并且表达相关髓系抗原对于M3与其他亚型AML的鉴别诊断具有一定参考价值。