国家药品标准主要检测方法应用指导原则课件.ppt

薄层色谱例子 其他氨基酸 取本品0.10g,置10ml量瓶中，加浓氨溶液2ml使溶解，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密量取lml，置200ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；另取门冬氨酸对照品10mg与谷氨酸对照品10mg，置同一25ml量瓶中，加氨试液2ml使溶解，用水稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性试验溶液。照薄层色谱法（附录V B )试验,吸取上述三种溶液各5μ1 ，分别点于同一硅胶G薄层板上，以冰醋酸-水-正丁醇（1:1:3)为展开剂，展开至少15cm，晾干，喷以0.2%茚三酮的正丁醇- 2mol/L醋酸溶液（95:5 )混合溶液，在105℃加热约15 分钟至斑点出现，立即检视。对照溶液应显一个清晰的斑点，系统适用性试验溶液应显两个清晰分离的斑点。供试品溶液如显杂质斑点，其颜色与对照溶液的主斑点比较，不得更深（0.5%)。 有关物质HPLC检查法 有关物质 取本品，精密称定，用溶剂〔甲醇- 0.544 % 磷酸二氢钾溶液（1 :1 ) 混合液〕溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液作为供试品溶液；另取可可碱对照品、茶碱对照品、咖啡因对照品与己酮可可碱对照品，精密称定，用上述溶剂溶解并定量稀释制成每1 ml中各约含1μg 的混合溶液，作为对照品溶液。照高效液相色谱法（附录V D )试验。用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为甲醇- 0.544%磷酸二氢钾溶液(3: 7)，流动相B为甲醇- 0.544%磷酸二氢钾溶液(7 : 3 )；检测波长为272nm，按下表进行梯度洗脱。取对照品溶液20μ1 ，注人液相色谱仪，调节检测灵敏度，使己酮可可碱色谱峰的峰高约为满量程的10%; 各组分出峰顺序依次为可可碱、茶碱、咖啡因与己酮可可碱。 己酮可可碱的保留时间约为12分钟，茶碱峰与咖啡因峰的分离度应大于4 ,咖啡因峰与己酮可可碱峰的分离度应大于1 0 ;理论板数按己酮可可碱峰计算不低于5000。再精密量取供试品溶液与对照品溶液各20ml ,注人液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液的色谱图中如有与可可碱、茶碱或咖啡因保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，均不得过0.1 % ;其他单个杂质峰面积不得大于对照品溶液中己酮可可碱的峰面积(0.1%) ;杂质总量不得过0.5% 。 时间（分钟） 流动相A(0/0) 流动相B ( % ) 0 86 14 6 86 14 13 10 90 30 10 90 38 86 14 43 86 14 残留溶剂 甲醇、丙酮与乙酸乙酯 取本品约0.1g，精密称定，置顶空瓶中，精密加入二甲基甲酰胺5ml使溶解，密封，作为供试品溶液；另分别取甲醇、丙酮与乙酸乙酯适量，精密称定， 用二甲基甲酰胺定量稀释制成每1m l 中各约含5 0 μg的溶液，精密量取5ml,置顶空瓶中，密封，作为对照品溶液。照残留溶剂测定法（附录W P第二法）试验。以6 %氰丙基苯基-94% 二甲基聚硅氧烷（或极性相近）为固定液；起始温度为50℃，维持3分钟，以每分钟40℃的速率升温至160℃,维持3分钟；进样口温度为200℃ ;检测器温度为250℃ ;顶空瓶平衡温度为80℃ ，平衡时间为30分钟。取对照品溶液顶空进样，各成分峰之间的分离度均应符合要求。再取供试品溶液与对照品溶液分别顶空进样，记录色谱图。按外标法以峰面积计算，均应符合规定。 用于药物晶型控制研究的分析方法 X-射线衍射法可用于区别晶态和非晶态、鉴别晶体的种类、测定药物晶型结构以及测定晶胞参数(如原子间的距离、环平面的距离、双面夹角等)。 X-射线衍射法又分为X-射线单晶衍射法和X-射线粉末衍射法两种，前者主要用于分子构型和晶体结构的测定，可获得对单晶晶体的各晶胞参数，并确定结晶构型和分子排列；后者主要用于结晶物质的鉴别及纯度检查，是研究药物晶型的最常用方法。 * * X-射线粉末衍射法 X-射线粉末衍射法研究的对象不是单晶体，而是众多取向随机的小晶体的总和。 每一种晶体的衍射线强度和分布都有着特殊的规律，其测得的图谱可获得晶型变化、结晶度、晶构状态、混晶等信息，常常作为晶型测定的仲裁方法