基因突变与先天性左室流出道梗阻相关课件.pptVIP

* 以往研究表明VEGF信号系统在胚胎心内膜垫形成中发挥至关重要的作用。在这一过程中，VEGF的表达必须严格控制在一个适宜的“生理窗”，VEGF高表达或低表达都不利于心内膜垫的形成。另外，VEGF在人类早期胚胎微血管发生和血管发生中也发挥重要作用，在这一过程中，VEGF的表达也可能要控制在一个适宜的“生理窗”。这一假设为小鼠VEGF164亚型缺乏可导致主动脉弓畸形的实验室证据所支持（小鼠VEGF164亚型缺乏相当于VEGF表达显著下调）。 * 人VEGF mRNA经典的起始密码子AUG1039之前含有一段1038核苷酸长的5’端非翻译区（5’-UTR），该5’-UTR在哺乳动物中高度保守，实际上包含一个大的开放阅读框。CUG499作为起始密码子（位于5’-UTR）翻译产生大VEGF （L-VEGF），随后被切割成含206个氨基酸的N端片段（N-VEGF）和206个氨基酸的C端片段（与经典的AUG1039翻译起始的VEGF蛋白质完全相同）。 * 在我们发现的突变中，c.454CT和c.19_22dupGACA突变通过各自提前产生的终止密码子预示了L-VEGF蛋白质截短。这两个突变改变了5’-UTR的总体结构，可能影响AUG1039的翻译起始，因为VEGF基因5’-UTR的总体结构对于AUG1039起始密码子的正确翻译是必须的。 * 研究表明，开放阅读框截断的mRNA将通过无义介导的mRNA衰变（NMD）机制被迅速降解。这一机制将有效阻止L-VEGF蛋白质的翻译，导致病人L-VEGF缺乏。 L-VEGF是具有生物学活性的VEGF的前体产物，50%具有生物学活性的VEGF来自L-VEGF。据此我们推断c.454CT无义突变和c.19_22dupGACA基因内部串联重复突变至少使VEGFA蛋白质合成减少50%以上。因此我们的研究提示VEGFA基因剂量不足可能是先天性LVOTO的发生机制之一。 * 总之，我们第一次报道VEGFA突变可能与先天性LVOTO发生有关，但是突变频率和外显率低。尽管目前已经明确NOTCH1基因突变参与AVS、BAV、CoA的发生，我们认为这些LVOTO病变也与VEGFA突变有关。鉴于此，我们为LVOTO可能是寡基因遗传提供了证据。这些突变的功能学研究尚需进一步研究。 * 致谢 感谢上海儿童医学中心心内科、心外科、手术室、PICU各位老师在LVOTO病例血样收集上提供的帮助。 * Company Logo LOGO * VEGFA基因突变与先天性左室流出道梗阻相关 LF 上海交通大学医学院附属 上海儿童医学中心心内科 * * 引言 左室流出道梗阻（ LVOTO ）占先心病发病总数的~14%，包括从解剖左室流出道一直延伸到降主动脉弓的一组狭窄性病变。LVOTO病变可孤立发生，也可合并发生，如二叶式主动脉瓣（BAV）常常合并主动脉缩窄（CoA）和主动脉弓中断（IAA）。Wessels等研究表明所有的LVOTO病变在发育上是相关的，可能由单基因缺陷所致。McBride等基于家系分离和多元相对危险度分析，则认为LVOTO很可能遵循寡基因遗传模式。 * 引言 二叶式主动脉瓣（BAV）是LVOTO中的一种常见病变，通常孤立发生，也可呈家族聚集性发病。迄今已明确NOTCH1（基因座9q34.3）基因突变与家族性和散发性BAV的发生有关，KCNJ2（基因座17q23）基因突变与Andersen综合征的心血管表型BAV和CoA有关。尽管最近研究已明确BAV是遗传异质性疾病，但是5%的BAV由特定的基因变化所致。 * 引言 以往研究表明，VEGF信号系统在胚胎心内膜垫形成中发挥至关重要的作用。Yang等证实VEGFA和Notch1在调节生后心脏瓣膜内皮细胞向间质细胞转化过程中发挥相反作用。Vannay等研究提示VEGF基因单核苷酸多态性与先天性瓣膜间隔缺损发生危险增加有关。最近荷兰一项病例对照研究表明VEGF基因启动子区-2578C和-1154G是心内膜垫缺损发生的易感等位基因，提示VEGF基因单核苷酸多态性与心内膜垫缺损发生有关。 基于以上，我们推测VEGFA（基因座6p12）可能是BAV潜在的候选基因。 * 引言 另一方面，VEGF在胚胎微血管发生和血管发生中也发挥重要作用。有研究显示VEGF164亚型敲出或表达降低的小鼠和斑马鱼其主动脉弓缺损的发生危险增加，提示VEGFA基因可能与人类先天性主动脉弓病变发生有关。 再者，有报道NOTCH1基因突变与LVOTO疾病谱有关，证实了主动脉瓣狭窄（AVS）、BAV、CoA和左心发育不良综合征在分子水平上具有共同的发生机制。 * 引言 基于以上BAV和其他LVOTO病变在临床和遗传学上的紧密重叠性，我们进一步推测VEGFA可能是先天性LVOTO疾病谱潜在的候选基因。然而迄今为止有关