转录和基因表达调控.pptVIP

1. 5-端加帽 二、真核生物mRNA的加工 O N N N N NH 2 O O CH 3 O H H H CH 2 H O P O - O O H N N N O H 2 N N O OH H H H C H 2 H OH O P O O - CH 3 P O - O 5 2 3 5 + 5? pppGp… 5? GpppGp… pppG ppi 鸟苷酸转移酶 5? m7GpppGp… 甲基转移酶 SAM 帽子结构的生成过程： 5? ppGp… 磷酸酶 Pi 加帽 2. 3‘-端加尾（多聚腺苷酸化） mRNA 尾部修饰是和转录终止同时进行的过程。在大多数真核mRNA3末端添加多聚腺苷酸尾巴（poly A），长度大约在250个左右。 尾巴结构的功能不详，一般认为尾巴结构提高的mRNA在细胞质中的稳定性即半衰期。 5?------AAUAAA- 5? ------AAUAAA-- 核酸酶 -GUGUGUG RNA-pol AATAAA GTGTGTG 转录终止的修饰点 5? 5? 3? 3? 3?加尾 AAAAAAA······ 3? mRNA 转录终止和转录后加工密切相关 DNA读码框架下游的一组AATAAA和GT共同序列, 参与转录终止过程。 3. 剪接作用 刚生成的hnRNA没有活性，除了需要添加帽子和尾巴结构外，还需要经过剪接作用切除内含子，连接外显子，才能转化为有转录活性的mRNA。 hnRNA mRNA 内含子 外显子 真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。 断裂基因(splite gene) C A B D 编码区 A、B、C、D 非编码区 内含子和外显子 外显子：在断裂基因及其初级转录产物上出现，并表达为成熟RNA的核酸序列。 内含子：隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列。 内含子的“功能”及其在生物进化中的地位是一个引人注目的问题。 鸡卵清蛋白基因 hnRNA 首、尾修饰 hnRNA剪接 成熟的mRNA 鸡卵清蛋白基因及其转录、转录后修饰 生物体内的各种内含子 细胞内定位 内含子类型 I类内含子（自我剪接） 细胞器RNA，少数细菌RNA II类内含子（自我剪接） 细胞器RNA，部分细菌RNA III类内含子 细胞核，前体mRNA （真核） IV类内含子 细胞核，tRNA前体 （真核） 剪接过程： 剪接体识别结合hnRNA的内含子5′及3′区域 形成套索RNA (lariat RNA)，外显子靠近 两步转酯反应，切去内含子，连接外显子 III类内含子剪接 -----mRNA的剪接 —— 除去hnRNA中的内含子，将外显子连接。 snRNP与hnRNA结合成为剪接体 ① 5’剪接点:↓GU-- 3’剪接点: --AG↓ 核内的蛋白质 小分子核糖核酸蛋白体 （剪接体, splicesome） snRNA pG-OH (ppG-OH, pppG-OH) U-OH GpU pGpA 第一次转酯反应 第二次转酯反应 UpA GpU 外显子1 内含子 外显子2 G-OH UpU pGpA 剪接过程的二次转酯反应 (twice transesterification) 可变剪接 转录与复制的异同 均以DNA为模板 原料为三磷酸核苷酸 碱基遵循碱基配对原则 聚合反应生成：3,5-磷酸二酯键 核酸链合成方向：5?3 合成产物：单链核酸链 相同点 转录与复制的不同点（总结） 不同点 转录 复制 (1) 原料 NTP dNTP (2) 聚合酶 RNA聚合酶 不需要引物激活 DNA聚合酶 需要引物激活 (3) 模板 DNA双链中的一条单链 DNA双链 (4) 忠实度 低 高 (5) 进行性 转录过程中途停止将导致“流产转录” 复制过程中途停止后可重新恢复复制 (6) 调控区位置 在转录起始点上游 （原核生物） 在复制产物序列中 * * 核心酶在σ因子的参与下与模板的DNA接触，生成非专一的，不稳定的复合物在模板上移动； 2. 起始识别：全酶与模板的启动子结合，产生封闭的“酶-启动子二元复合物”（closed binary complex） 3.???? 全酶紧密地结合在启动子的-10序列处，模板DNA局部变性，形成“开放的启动子二元复合体”（open binary complex）； 4. 酶移动到转录起始点挂上，第一个rNTP转录开始，σ因子释放，形成酶-启动子-rNTP三元复合体。 * 大肠