病毒感染的诊断与防治ppt 第26章立克次氏体和衣原体课件_2.ppt

沙眼 眼---眼，眼---手---眼: 沙眼亚种A、B、Ba和C血清型引起沙眼; 感染眼结膜上皮细胞→增殖，包涵体→局部炎症→早期流泪、有粘液脓性分泌物、结膜充血及滤泡增生→后期结膜瘢痕、眼睑内翻、倒睫以及角膜血管翳引起的角膜损害→影响视力或致盲 沙眼 包涵体结膜炎( 成人、婴儿） 由沙眼亚种B、Ba、D、Da、E、F、G、H 、I、Ia、J、及K血清型引起 泌尿生殖道感染 性接触 血清型与包涵体结膜炎相同 免疫性 抗体持续时间短 免疫力不强，易再受感染 微生物学检查法 直接涂片镜检 采用Giemsa、碘液或荧光抗体染色镜检，检查上皮细胞内有无包涵体。 分离培养 采用感染组织的刮取物或分泌物，接种鸡胚卵黄囊或传代细胞（常用的是经放线菌酮处理的单层McCoy细胞，或HeLa-229细胞及BHK21细胞），用直接免疫荧光法或酶联免疫法检测。 核酸检测 包涵体含糖原，被碘液染为棕褐色 EB 防治原则 注意个人卫生，不用公共毛巾、脸盆等。 无特异预防方法 性病淋巴肉芽肿亚种 血清型（L1、L2、L2a及L3） 致病性 传染源：人 传播途径：性接触 侵犯淋巴组织 男性→腹股沟淋巴结→化脓性淋巴结炎和慢性淋巴肉芽肿→瘘管。 女性→会阴、肛门和直肠→肠皮肤瘘管，会阴-肛门-直肠狭窄和梗阻 肺炎衣原体Chlamydia pneumoniae 只有一个血清型：TWAR株 传染源：人 传播途径：呼吸道 所致疾病：呼吸道感染，肺炎为主. 可能与冠心病和心肌梗塞有关 培养特性 沙眼衣原体专性活细胞内寄生，用6—8d龄鸡胚卵黄囊及各种传代细肋培养。一般培养48—72h后可在细胞内查到包涵体及原体和始体颗粒。 近年多采用细胞培养衣原体，常用的细胞株为Hela-299和McCoy。 抵抗力 沙眼衣原体感染材料在37℃条件下，经48h左右即失去活力，56℃6 min灭活。-70℃可保存数年，冷冻干燥可保存30年以上仍有活性。O.1％甲醛或O.5％石炭酸溶液24h杀死沙眼衣原体，2％来苏仅需5min。 红霉素、四环素、强力霉素或青霉素对衣原体有抑制作用。 沙眼和包涵体结膜炎病人，用拭子在结膜上穹窿涂擦或取结膜刮片。性病淋巴肉芽肿：采淋巴结脓汁，也可取直肠拭子或活检材料送检。 用光学显微镜观察包涵体有诊断意义，特别在眼结膜、尿道及子宫颈上皮细胞内发现典型包涵体更有沙眼衣原体感染的参考。 免疫学方法 1)免疫荧光检查：用荧光抗体检测上皮细胞内衣原体抗原。标记抗衣原体LPS抗体，可与所有衣原体反应；而抗MOMP抗体有种、型特异性。可在1h内即作出诊断并可分型。 2)酶免疫检测：能在数小时内检测出衣原体可溶性抗原，并适用于同时检测大量标本。 核酸检测 1)核酸杂交：用125I标记的衣原体rDNA探针检测宫颈标本的敏感性和特异性，与培养相比分别为82.8％和99.4％。 2)PCR：具有高度敏感性和特异性。一般按沙眼衣原体7．5kb质粒、MOMP序列及16SrRNA基因序列设计引物。 分离培养 将标本拭子，用含抗生素的稀释液制成10％-20％悬液。分离的细胞有McCoy、HeLa-229细胞等。置5％CO2下培养。 初代分离培养72-96h后传代或盲传。有症状病人90％标本第1代即可见包涵体，而无症状病人需传代后才得到阳性。 敏感性为80％-90％，特异性100％，是目前确诊最可靠的方法，而且是评价实验室诊断法的标准。 鸡胚培养 有细菌污染的临床标本加适当的抗生素(如链霉素、庆大霉素和制霉菌素等)肉汤，在室温中作用lh后，接种3-4只孵育7天的鸡胚卵黄囊，35℃孵育，观察至13天，收获卵黄囊涂片，作Gimenez染色，镜检原体。 鉴定 1.将细胞培养盖片用Giemsa或碘染色镜检胞质内包涵体。Giemsa染色比碘染色敏感，可作为鉴别沙眼衣原体的参考。 2.可用型特异性荧光血清鉴定其型别。对于卵黄囊和小鼠分离的材料可用免疫荧光法鉴定原体或补体结合抗原 。 抗体检测 目前检测抗体的血清学方法在常规临床诊断中价值很小。 原因是不易获得双份血清，而且性传播疾病的高危人群多有慢性重复感染，原有的抗体水平较高，因而限制了血清学方法的诊断价值。 方法有补体结合试验(CF)、微量免疫荧光试验(MIF)、酶免疫法等。其中CF敏感性和特异性较差，而MIF敏感性和特异性较高。 三、鹦鹉热衣原体 鹦鹉热衣原体是鹦鹉热的病原体，主要引起禽畜感染，也可由动物传染到人，引起肺炎和毒血症，亦有引起心内膜炎的报道。 也有衣原体独特的生活周期，包涵体较致密，形态不一，碘染色阴性，是与沙眼衣原体鉴别要点 (沙眼衣原体含糖原，碘染色阳性)。 抗原检测 1)免疫荧光