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肝炎病毒检测课件
概 述 病毒性肝炎主要有7型:甲、乙、丙、丁、 戊、庚型、输血传播病毒肝炎,分别由HAV、 HBV、HCV、HDV、HEV、HGV、TTV所引 起。肝炎病毒标志物主要包括各型肝炎病毒相 关抗原、抗体及核酸。目前常用的检测方法有: 酶联免疫法(EIA、ELISA)、放射免疫法 (RIA)、血细胞凝集法(PHA)、聚合酶链 反应法(PCR)等。 各种病原体发现的时间 HAV 1973年从大便中分离 HBV 1970年由丹娜发现 ,故又称为丹娜 颗粒(Dane) HCV 1989年经分子克隆技术发现(美国) HDV 1977年在HBsAg阳性血中发现(意) HEV 1990年用免疫电镜在病人大便发现 HGV 1993年 TTV (transfusion transmitted virus)1997年 一、甲型肝炎病毒标志物检测 HAV属RNA病毒,直径27~32nm,内 含单股RNA基因组。 (一)甲肝病毒抗原测定:参考值阴性 临床意义:HAVAg阳性见于70.6~87.5%的 甲肝患者, HAVAg于发病前2周可从粪便中 排出,2周后消失。 (二)甲肝病毒抗体测定: 机体感染HAV后,可产生IgM、 IgA、 IgG三 种抗体。 参考值:抗HAV- IgM和抗HAV- IgA均为阴性, 抗HAV- IgG阳性可见于甲肝感染后的人群。 临床意义: 1、抗HAV- IgM阳性,在发病后2周为100%,以后逐 渐减少,12个月可为阴性,是早期诊断甲肝的特异性 指标; 2、抗HAV- IgA阳性也是早期诊断甲肝的指标之一; 3、抗HAV- IgG阳性出现于恢复期且持久存在,是获 得免疫力的标志,提示既往感染。 (三)HAV-RNA测定:参考值阴性 临床意义: HAV-RNA阳性对诊断,特别对 早期诊断具有特异性。 二、乙型肝炎病毒标志物检测 乙型肝炎病毒(HBV)是一种嗜肝脱氧 核糖核酸病毒(DNA),属于包膜病毒。病毒标 志物有:HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗- HBe、HBcAg、抗-HBc、Pre-S2、 抗-Pre- S2、乙型肝炎病毒DNA。 病原学 HBV对外界抵抗力较强,对低温、干燥及紫外线均耐受,但煮沸10分钟,高压蒸汽消毒或65℃10h可以灭活。戊二醛(0.5%),过氧乙酸7分钟,碘伏,CB消毒剂(复方氯溴复合消毒剂),均可灭活。 (一)乙肝六项测定:正常为阴性 临床意义 1、 HBsAg阳性:见于急性乙肝潜伏期,发 病时达高峰,发病后3个月不转阴,则易发展 成慢性乙肝或肝硬化。 HBsAg是HBV的外 壳,不含DNA,故HBsAg本身不具传染性, 但其常与HBV同时存在,故常作为传染性标 志之一。 2、抗-HBs阳性:是唯一的保护性抗体,可 阻止HBV穿过细胞膜进入新的肝细胞。一般 在发病后3~6个月才出现,可持续多年。 3、 HBeAg阳性:表明乙肝处于活动期,并 有较强的传染性,孕妇阳性可引起垂直传播, 致90%以上的新生儿呈HBeAg阳性。 HBeAg 持续阳性,表明肝细胞损害较重,且可转为慢 性乙肝或肝硬化。 4、抗-HBe阳性:表示大部分乙肝病毒被清 除,复制减少,传染性减低,但并非无传染性。 5、 HBcAg阳性:存在于Dane颗粒的核心部 位,是一种核心蛋白,其外面被HBsAg所包 裹,一般情况下血清中不易检测到游离的 HBcAg。 HBcAg阳性提示病人血清中有感染 性的HBV存在,其含量较多,表示复制活跃, 传染性强,预后较差。 6、抗-HBc阳性:可分为IgM、 IgG、 IgA三 型。一般是检测抗-HBc总抗体。抗-HBc检出 率比HBsAg更敏感,可作为HBsAg阴性的 HBV感染的敏感指标。在HBsAg阴性者中仍 有6%的阳性率。其阳性可持续数年甚至终身。 大三阳: HBsAg(+)、 HBeAg (+)、 抗-HBc (+); 小三阳:HBsAg(+)、抗-HBe (+)、 抗-HBc (+)。 (二)乙肝病毒表面抗原蛋白前S1(Pre-S1) 和前S1抗体(抗Pre-S1 )测定: Pre-S1抗原位于病毒颗粒表面,是HBV 识别肝细胞表面特异性受体的主要成分,是 HBV复制和活动的标志物。作为病毒复制指 标较HBeAg敏感,可反映HBeAg阴性乙肝患 者体内的病毒活动状况,避免由于HBeAg阴 性造成的误诊和漏检。 (三)乙肝病毒表面抗原蛋白前S2(Pre-S2) 和前S2抗体(抗Pre-S2)测定: Pre-S2是HBV表面蛋白成
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