广地龙中琥珀酸的毛细管电泳电导法测定.docVIP

广地龙中琥珀酸的毛细管电泳电导法测定 密量取上述各浓度溶液2mL,各加入苯酚试液1.0mL,摇匀, 迅速加入浓硫酸5.0mL,迅速摇匀,放置5min置沸水浴加热 15min,取出,冷水迅速冷却至室温;精密量取蒸馏水1.0mL, 同样操作,作为空白对照,按分光光度法在490nm波长处测 定吸光度. 2.5样品的测定 精密称取百蕊草多糖100mg,加水溶解置于50mL量瓶 中,加水定容,摇匀.精密量取1mL,置50mL量瓶中,加水至 刻度,定容摇匀.精密量取上述溶液4.0mL,加入苯酚试液 1.0mL,摇匀,迅速加入浓硫酸5mL,迅速摇匀,放置5min,置 沸水浴加热15min,取出,冷水迅速冷却至室温;精密量取蒸 馏水4.0mL作为空白对照,按分光光度法在490nm波长处 测定吸光度值. 2.6精密度试验 取同一样品,精密称定,重复测定吸光度5次. 2.7稳定性试验 取同一样品,按样品测定方法操作,每隔0.5h测定1 次吸光度. 2.8重复性试验 对同一批样品重复取样5次,按样品测定方法操作. 2.9回收率试验 精密称定同一份样品9份,分别精密加入高,中,低三种 浓度不同的葡萄糖对照品溶液,按样品测定方法测定吸光 度值. 3结果与讨论 3.1标准曲线按照线性关系考察方法操作一次,以吸收 度(A)对浓度(c)作回归计算,回归方程为A=15.644C一 0.0053,r=0.9995,线性范围:0.01～0.07mg/mL. 3.2精密度试验测定 RSD为1.21%,结果表明该方法精密度良好. 3.3稳定性试验 测定结果表明3h之内测定值不变. 3.4重复性试验结果 RSD为1.89%. 3.5回收率测定结果 回收率平均值为99.6%,RSD为1.92%(n=9). 3.6样品测定结果 连续测定5批百蕊草多糖样品,平均含量为15.9%, RSD为1.56%. 3.7讨论 在我们对百蕊草化学成分研究当中发现该植物除了含 有黄酮苷和苷元外还有水溶性多糖的存在.我们根据文献 报道比较了经典的苯酚.硫酸法和蒽酮.硫酸法测定百蕊草多 糖含量,其中苯酚-硫酸测定样品平均含量为15.9%,方法简 便,结果准确,为百蕊草多糖研究奠定良好的基础.而葸酮- 硫酸法测定百蕊草多糖含量偏低,本实验未加报道.不同的 测定方法测得的多糖含量有很大的差别,主要原因为不同类 型的多糖,尤其是杂多糖J.因此有待于进一步对百蕊草多 糖进行分析研究. 参考文献 [1]ChineseHerbcommitteeofStateAdministrationofTraditional ChineseMedicineChineseHerb(中华本草)[M].Shanghai, ScienceandTechniquePublishingCompanyofShanghai,1999 (2):595-597. [2]WUZF,LIANGGM,LIUSJ.ThestudyofThesiumchinense Turczonphytochemistryandhost[J].ChineseTraditionaland HerbalDrugs(中草药),1993,24(8):429430. [3]JiangsuNewMedicMCollege.BigThesaurusofTraditionalChi? ne8eMedicine(中药大辞典)[M].Shanghai,Scienceand TechniquePublishingCompanyofShg}.ai,1981:866. [4]TheResearchGroupofThe~umchlncn~TurezofAnhuiInstitute ofMedicine.ThechemicalstudyinThesiumchinenseTurcz. 【J].LeRerofChheseTraditionalandHerbalDn(中草药通 讯),1976,(8):342-348. [5]CHENHY,ZHUYz,WUNJeta1.Determinationofthepoly? saccharideinEpimediumkoreanumNakai[J].ChineseTmdi— tionalandHerbalDrugs(中草药),2003,34(9):810-811. 收稿13期:2005-06-21 广地龙中琥珀酸的毛细管电泳电导法测定 黄庆华,龙晓英,毋福海,谢国祥,何林(广东药学院,广州510006) 摘要:目的建立毛细管电泳电导法测定广地龙中琥珀酸含量的方法.方法以1.0mmoL/LTfis-10mmoL/LH3BO3-0.5%四 乙烯五胺.025mmol/L十六烷基三甲基溴化铵为分离介质,使用未涂层融硅毛细管a~(50cm×751~m),分离电压-10k