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肝素、双香豆素、枸橼酸钠的抗凝血作用P68 目的 : 观察抗凝血药的体外抗凝血作用。 方法步骤: (1)试管标记并加药 取清洁干燥试管4只,标记,分别加入生理盐水(1号)、l0U/ml肝素溶液(2号)、0.5%双香豆素混悬液(3号)、3.8%枸橼酸钠溶液(4号)各0.25m1。 (2)取血 家兔颈总动脉插管取血4m1。(每管一毫升) a 剪刀剪兔毛后在颈部剪个圆形的口子,钝性分离 b 先找到气管,颈总动脉在气管两侧,与迷走神经同在一个鞘内,注意鉴别和分离 c 图示,将经总动脉分离出大约3cm,远心端结扎,中间预放两条棉线,近心端用动 脉夹夹毕 d 远心端剪一个小口子,插入动脉插管(尖端在下),用棉线固定好,松开动脉夹,开始取血 注意事项 1、取血时动作要快,以防凝血。 2、由动物取血至试管放入恒温水浴的时间不得超过3min。 3、各种药物取量要准确,并控制好水浴温度。 4、凝血时间:指以试管轻轻倒转血液不往下流为标准。 结果 肝素 肝素主要灭活多种凝血因子,故在体外同样可以抗凝。其与抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)结合 ,其复合物抑制凝血系统中除Ⅶ因子外的所有丝氨酸蛋白酶,加速凝血酶的失活,从而增强了抗凝血酶Ⅲ活性,体内外迅速抗凝。 双香豆素 双香豆素是一种体内抗凝剂,通过口服参与体内代谢才发挥抗凝作用。 香豆素类是维生素K拮抗剂,阻止维生素K的反复利用,影响含有谷氨酸残基的凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ的羧化作用,使这些因子停留于无凝血活性的前体阶段,从而影响凝血过程。对已形成的上述因子无抑制作用,因此抗凝作用慢而持久。 枸橼酸钠 枸橼酸钠是一种体外抗凝剂,多用于血库。 枸椽酸根离子与血中钙离子生成难解离的可溶性络合物枸椽酸钙,此络合物易溶于水但不易解离,使血中钙离子减少,凝血过程受到抑制,从而阻止血液凝固。钙为凝血过程中必需物质,可促进凝血因子Ⅲ,凝血酶和纤维蛋白的形成,以及激活血小板的释放反应等。 中毒: 解救后: 腺体 甲组:阿托品 平滑肌 乙组:解磷定 瞳孔 呼吸 大小便 中枢 * * 家兔称重麻醉—腹腔注射20%乌拉坦5ml/kg (上课前完成) 抗 凝 动脉夹 (3)加血样并观察 迅速将血样分别加入上述试管各lml,充分混匀后放入(37±0.5℃)恒温水浴中,记录时间。然后,每隔30s将试管轻轻倾斜90o观察一次,至液面不再流动——凝血。记录凝血时间及各试管出现的现象。 (4)在未凝血试管中加入3%氯化钙溶液0.25 ml,充分摇匀,无需水浴,10-15min后再次观察是否出现凝血。 生理盐水 肝素 双香豆素 枸橼酸钠 1号 2号 3号 4号 加钙后 恒温水浴 凝血时间(min) 观察凝血现象 药物 试管 肝素+(AT-Ⅲ) 肝素AT-Ⅲ复合物 灭活凝血因子 抗凝 枸椽酸根离子 枸椽酸钙(难解离) 血中钙离子 抗凝 氯化钙 激活凝血因子Ⅲ 凝血 为什么不用于体内抗凝呢? 有机磷中毒及解救(P 41) 1.家兔称重, 2.耳缘静脉注射5%的敌百虫(3.2ml/kg),观察症状。 3.症状明先后: 甲组 0.1%阿托品 ( 1ml/kg ) 乙组 2.5%解磷定 ( 1ml/kg ) 观察症状变化 *
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