第二章： 核酸化学.pptVIP

4.DNA的高级结构 负超螺旋 右旋 正超螺旋 左旋 DNA双螺旋为右旋螺旋。细胞中的环状DNA一般呈负超螺旋，即右旋螺旋不足导致部分碱基不形成配对，分子通过整体拓扑学上的右旋来补足右旋螺旋的不足，在数学上呈1：1，即分子整体右旋一圈来补双螺旋上的一圈不足。 正超螺旋为双螺旋旋转过度，通过分子整体的左旋来解去过度的螺旋。 5.RNA的结构和功能 核酸的一级结构： 碱基的排列顺序 DNA 5- ATGCATGC……3 3- TACGTACG……5 RNA 5- AUGCAUGC……3 核酸的二级结构： 形成双螺旋的部分 核酸的三级结构： 空间构象 RNA分子的特点： 1. RNA分子在糖基上比DNA分子多一个OH基，位于2’位。A260nm/A280nm= 2.0, 而DNA为1.8。RNA分子遇碱极易降解，而DNA则不。 2. RNA分子一般为单链分子，因此容易形成自由能为最小的独特的二级结构, 其双链部分符合Watson-Click双螺旋模型。 3. 正因为独特的二级结构和多余的2’羟基的存在， 一些 RNA分子具有自我切断、自我连接，或切断其他核酸分子、连接其他核酸分子的活性，第一个可以自我复制的分子被认为是RNA分子。 4.RNA分子在细胞中同时扮演着信息的媒介作用和执行者的作用，mRNA为前者，rRNA、tRNA和snRNA为后者。因此很自然的认为生命的早期可以称为RNA world。 细胞中的RNA RNA的功能 ①?转移RNA (tRNA) ②核糖体RNA (rRNA) ③信使RNA (mRNA)和核内不均一RNA (hnRNA ) 核糖体上蛋白质合成过程中mRNA、tRNA 的作 用，及肽链的延伸示意图。 核糖体 mRNA tRNA 真核基因mRNA的形成 真核生物mRNA的5’端和3’端 第四节．核酸的性质 一.一般理化性质 ? RNA DNA 性状 白色粉末 白色纤维状固体 溶解度 都微溶于水，不溶于有机溶剂 溶于0.14M NaCl 溶于1M NaCl 粘度 比DNA小 很大 水解条件 对酸不稳定 对碱不稳定，生成2，3-核苷酸 稳定，不水解 各种工具酶 二.核酸的紫外吸收性质及应用 应用： 1.纯度鉴定 2.定量：比吸收系数法 三.核酸结构的稳定性 1. 碱基对间的氢键 2. 碱基堆积力 3. 环境中的正离子 四.核酸的变性 1.变性（denaturation）：指核酸双螺旋区的氢键断裂，变成单链，并不涉及共价键的断裂，螺旋结构变成无定形的伸展或卷曲状态。 DNA分子的变性 DNA的变性在紫外吸收上的变化 热变性和Tm(熔解温度) DNA分子的Tm与GC含量有关 盐浓度对DNA变性的影响 影响Tm大小的因素 1.和DNA的碱基组成(G-C对含量)有关 2.介质中的离子含量 3.溶液的pH 4.变性剂 五.核酸的复性 1.复性的概念 2.影响复性速度的因素 3.分子杂交 第二章： 核酸（nucleic acid） 第一节：核酸的概念和重要性 一.核酸的发现与重要性 1869年 Miescher, 博士论文工作中测定淋巴细胞蛋白质组成时, 发现了不溶于稀酸和盐溶液的沉淀物, 并在所有细胞的核里都找到了此物质, 故命名核质(Nuclein)“ 1889年 Altman建议将“ 核质”改名为“ 核酸”, 因为已经认识到“ 核质” 乃“ 核酸” 与蛋白质的复合体。 1909年 Levene 发现酵母的核酸含有核糖 1953年 Watson, Crick根据DNA的X射线图谱的研究结果, 提出了DNA的双螺旋模型(Double helix)。几星期后提出了半保留式复制模型。 1957年 Meselsnhe Stahl用密度梯度超离心法, 证实半保留复制假说。 1958年 Kornberg得到高纯度的 DNA polymerase, 这种酶需要一个模板DNA。 1960年 Cairns索性将复制中的细菌DNA的电镜照片拍了下来。 1970年 发现第一个DNA限制性内切酶。 1972年 DNA重组技术的建立。 1978年 双脱氧DNA测序法的建立。 1990年 人类基因组计划实施。 2009年诺贝尔化学奖 二．核酸的种类和分布 有两类 DNA：脱氧核糖核酸（deoxynucleic acid）主要存在于细胞核中 RNA：核糖核酸(ribonucleic acid) 主要存在于细胞质中 第二节：核酸的组成成分 一.??? 核酸的元素组成 C, H, O, N,