第十章 紫外可见分光.ppt

第十章 紫外-可见分光光度法ultraviolet and visible spectrophotometry 第十章 紫外-可见分光光度法 第一节 基本原理和概念 第二节 紫外-可见分光光度计 第三节 紫外-可见分光光度分析方法 第一节基本原理和概念一、电子跃迁类型 第一节基本原理和概念二、紫外-可见吸收光谱的常用概念 三、吸收带与分子结构的关系 四、影响吸收带的因素 第一节、基本原理和概念五、朗伯-比尔定律 六、偏离比尔定律的原因 第二节 紫外-可见分光光度计 一、基本组成 2.单色器 二、分光光度计的类型 第三节 紫外-可见分光光度分析方法一、定性分析 第三节 紫外-可见分光光度分析方法二、定性分析 第三节 紫外-可见分光光度分析方法三、单组分的定量分析 第三节 紫外-可见分光光度分析方法四、多组分的定量分析 第三节 紫外-可见分光光度分析方法五、紫外吸收光谱法用于有机化合物分子结构研究 第三节 紫外-可见分光光度分析方法六、光电比色法 ⒈单光束： 简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度 或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求 光源和检测器具有很高的稳定性。 二、分光光度计的类型 2. 双光束： 自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不 稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别 适合于结构分析。仪器复杂，价格较高。 二、分光光度计的类型 3.双波长： 将不同波长的两束单色光(λ1、λ2) 快束交 替通过同一吸收池而后到达检测器。产生交流 信号。无需参比池。△?=1～2nm。两波长同时 扫描即可获得导数光谱。 ⒈对比吸收光谱特征数据 通过对未知纯试样的紫外吸收光谱图与标准纯试样的 紫外吸收光谱图，或与标准紫外吸收光谱图比较进行定 性。 ①当溶剂和试样浓度相同时，若两紫外吸收光谱图λmax 和εmax相同，表明它们是同一化合物。 ②具有不同或相同吸收基团的不同化合物，可能有相同 的λmax 值，此时，还应该比较其εmax。 例：见教科书199页 ⒉对比吸光度（或吸光吸数）的比值 不只一个吸收峰的化合物可用不同吸收峰处 (或谷)测得吸光度的比值作为鉴别的依据。 例:维生素B12的鉴别。中国药典规定在361nm 与278nm处吸光度的比值应为1.70～1.88； 361nm与550nm吸光度的比值为3.15 ～3.45。 ⒊对比吸收光谱的一致性 醋酸泼尼松 醋酸氢化可的松 醋酸可的松 λmax240nm,εmax1.57×104 杂质检查: ⒈如果化合物在紫外-可见区没有明显吸收，而所含杂质有 较强的吸收，则少量杂质就可用光谱检查出来。 ⒉若化合物有较强的吸收峰，而所含杂质在此波长处无吸 收或吸收很弱，杂质的存在将使化合物的吸收系数降低 ⒊若杂质在此吸收峰处有比化合物更强的吸收，则将使吸 光吸数增大，有吸收的杂质也将使化合物的吸收光谱变 形。 杂质的限量检测:见P200 ㈠吸光系数法 根据朗伯—比耳定律: A = ? l C 若?已知，则可根据测得的A求出被测物的浓度。 ㈡标准曲线法 AX CX C A 0 · · · · · A = ? l C ㈢对照法 同种物质、同台仪器及同一波长测定： 则： 例：见202页 截止波长：紫外吸收光谱溶剂允许使用的最短波长。 当紫外光波长大于截止波长时，该溶剂无吸收，不引起 干扰；反之会产生干扰。 在测定时应尽可能采用非极性溶剂； 在可见光测量范围内，可使用无色溶剂； 在300～400nm的紫外光区测量，溶剂要小于250nm； 在小于300nm测量时，可选用己烷、环己烷或庚烷等饱和 烃。 在测定紫外-可见光吸收光谱时,应标明使用的溶剂。 ⒈普通分光光度法 ⑴若各组分的吸收曲线互不重叠，则可在各自最大吸收波 长处分别进行测定。这本质上与单组分测定没有区别。 ⑵若各组分的吸收曲线互有重叠，则可根据吸光度的加合性求解联立方程组得出各组分的含量。 Aλ1= εaλ1l ca ＋ εbλ1l cb Aλ2= εaλ2l ca ＋ εbλ2l cb ⒉双波长分光光度法 不需空白溶液作参比；但需要两个单色器获得两束单色光(λ1和λ2)；以参比波长λ1处的吸