酚黄肽半衰期及分布容积的测定.pptVIP

剪毛时不可用组织剪或眼科剪，不可提拉皮肤，可将皮肤绷平，平贴于皮肤逆着毛的朝向剪毛。剪下的毛应放入盛水的杯中浸湿，以免四处飞扬。 酚磺肽（PSP）半衰期及分布容积的测定 药学系 药理学教研室 邓雅婷 Drug Action ADME Pharmacodynamics, PD Pharmacokinetics, PK Drug-body interaction 肝脏代谢 肾脏排泄 药物分布 体内过程 药物代谢动力学参数 吸 收 分 布 消 除 快慢：Tmax 程度：AUC 分布容积：Vd 半衰期：t1/2 如何获得药物代谢动力学参数？ 0 20 40 60 80 100 120 0 2 4 6 8 10 Time (min) Plasma aspirin concentration (mg/L) Cmax Tmax iv orally Area under curve (AUC) ng?h/mL 绘制血药浓度-时间曲线 实验目的 ●测定家兔静脉注射酚磺酞（ PSP ）后的血药浓度； ●计算PSP血浆半衰期及分布容积； ●掌握药代动力学研究的方法。 实验动物：家兔 实验器材： 752型分光光度计、台式离心机、天平、离心管、手术器械、兔板、兔绳、纱布、注射器、试管、微量吸液管、动脉夹、塑料管、丝线等。 实验药品：20%乌拉坦、0.6％ PSP（酚黄肽）溶液 、 0.5％肝素溶液、稀释液（0.9％NaCl l29ml＋lmol/L NaOH 1ml) 动物与材料 实验流程 家兔的麻醉与给药 血浆样品的采集 血药浓度的测定 数据处理 实验方法 １、家兔称重后麻醉： 实验方法 给药途径： １、家兔称重后麻醉： 给药剂量： 耳缘静脉注射 注意事项： 20%乌拉坦溶液(5-7ml/kg) 1）注射时，注意不能有大量气泡注入； 2）留置事先用肝素化的头皮针（后面用于给药） 实验方法 2、分离颈动脉进行插管 颌内动脉 颌外动脉 颈内静脉 颈内动脉 颞浅动脉 面后动脉 耳廓后静脉 耳廓后动脉 近心端 远心端 动脉夹 近心端用动脉夹夹住，远心端结扎，并在动脉下面 预先穿一丝线备用。在靠近远心端结扎处剪一“Ｖ”字 形切口，插管、打结固定。 取血时，不要将动脉夹抽离动脉 实验方法 3、给药 给药前： 全身抗凝——从耳缘静脉注入5 mg/kg（lml/kg）肝素 样品管的标记与肝素化——用0.1%肝素润洗，甩净肝素 取空白——从颈动脉取正常血液1ml 给药：耳缘静脉注射 0.6%PSP溶液 剂量为6mg／kg （1ml/kg） 实验方法 4、血浆样品的采集 采血时间： 给药后1 min、2.5 min、5.0 min、7.5 min、10 min、20 min、30 min分别从颈动脉取血1ml。 离心： 1500转/分离心10 min，取上清液 实验方法 5、血药浓度的测定（UV） 测定原理： 酚红在碱性条件下显红色；吸光度-浓度符合L-B定律 测定方法： 血浆0.2 ml + 稀释液3.0 ml→混匀→560nm处比色→记录吸光度值→ 代入标准曲线方程，求得血药浓度 实验方法 6、数据处理 药物静脉注射后，按一级动力学的规律消除； 直线方程为： 用Excel作图，横坐标为时间，纵坐标为血药浓度的对数值； 实验方法 6、数据处理 计算PSP血浆半衰期，其公式为： T1/2 =0.693/ Ke 计算PSP表观分布容积，其公式为： Vd为PSP用药剂为量； C0为0min时的药物浓度，即：纵坐标截距 常用药代动力学软件 1. DAS软件（药物与统计） 2. WinNonlin（美国Pharsight公司） 思考题 1.什么是消除半衰期，有何实际意义？ 2.什么是分布容积？ 3.药物代谢动力学研究常用哪些动物？常用采血方式有哪些？ 注意事项 实验结束后 耳缘静脉注射空气处死兔子 各小组-清洗和清点器械（离心管16个、插管、动脉夹一个、三通2个、手术器械等），擦试验台 清洗规则：无血渍、无兔毛、无垃圾 留一小组打扫大实验室 凳子摆放、扫地、拖地 实验报告 每小组写一份实验报告（讨论、思考题部分，每个人分别总结，个人得分的依据） 实验报告内容: 实验题目、实验目的、实验药品和器材、实验过程、实验结果与讨论、思考题 注意事项 药理学研究的内容 * * 药物的体内过程 提问 * * 1．穿刺耳缘静脉先从中远端刺入，以防穿刺失败后再穿刺困难。 2．