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食品卫生微生物检验的质量控制 实验室质量控制规范-食品微生物检测BG/T27405-2008 实验室的质量控制包括的内容： --人、机、料、法、环。 人员 技术专业培训； 生物安全培训； 检验技能的客观评估(内部质量控制、能力验证或标准菌株测试、新方法使用前的操作技能评估)。 仪器设备 普通玻璃器皿的灭菌、消毒； 测量设备、定容器具的校准与维护； 特殊设备的验证与性能评估(标准菌株、实验室间的比对)。 试剂与材料 培养基的制备与性能测试； 标准试剂、标准培养物的保存(可追溯性、有效期限、老化、退化或变异、污染 )。 检验方法与质量控制规范 管理体系、质量体系的运行； 标准方法的有效性； 非标方法的确认与验证； 实验室内部质量控制与外部质量评估； 不确定度的测量。 实验室环境监测 总体布局(满足工作量、对样品无污染、对人员无伤害可能)； 不同的工作区域划分； 温度、湿度、照度、噪声、洁净度符合检验与生物安全要求； 食品卫生微生物学检验的培养基质量控制原则 培养基的起源与发展 微生物培养基(Culture Media)，是指由人工方法配制而成，用于微生物培养、分离、鉴别、保存、药敏试验等的混合营养物制品。 十九世纪未，德国著名细菌学家科赫(Rober Kock，1843~1910)成功地制备固体培养基，并发明了玻璃培养皿，极大地推动了细菌的分离、培养和鉴别。 美国Difco公司至今已有100多年历史，早在1895年就开始生产胃酶、胰酶制品，1917年生产脱水培养基。 英国Oxid 公司1950年开始商品化生产干燥培养基。 Difco和Oxid的产品被全球微生物实验室广泛接受，产品达400多种。 我国1958年开始研制干燥培养基，目前已有50多个生产厂家，商品干粉培养基达200多种。 培养基质量控制的意义 培养基的质量直接关系到样品的检验结果。 微生物的检验与研究是否成功，在很大程度上取决于培养基的质量。 培养基质量是保证实验结果的准确性、科学性、公正性的根本。 高质量的培养基可提高工作效率、降低使用成本。 国际通用的培养基质控标准 目前国际上通用的培养基质控标准：ISO/TS 1113-1：2000；ISO/TS 1113-2：2003。 食品和动物饲料-培养基制备指南-实验室培养基制备质量保证通则。 食品和动物饲料-培养基制备指南-培养基性能测试实用指南。 国内现行的培养基质控标准 SN/T 1538.1-2005；SN/T 1538.2-2007。 培养基制备指南 第1部分：实验室培养基制备质量保证通则 培养基制备指南 第2部分：培养基性能测试实用指南 WS/T 232-2002 商业性微生物培养基质量检验规程。 卫生部1993年颁布的“食品卫生微生物检验用干燥培养基生产质控和质量标准”。 培养基实验室配制的基本程序 培养基制备前的准备 实验室收到培养基后，建立实验室检查记录单： --培养基的名称和批号； --接收日期及有效期； -- 包装及其完整性。 贮存时，建立实验室保存有效培养基的目录清单： --贮存条件(温度、时间)； --容器密闭性复查； --首次开封日期； --内容物的感观检查(粉未的流动性、均匀性、色泽、结块)。 培养基实验室制备通则 水 --配制培养基应使用蒸馏水或相同质量的水，以排除测试条件下抑制或影响微生物生长的物质。 --如果蒸馏水是用氯消毒的水制备的，在蒸馏前应先对氯进行中和。 --为保证蒸馏水的质量，蒸馏水的电阻率最少应达到3000000Ωcm。 --采用离子交换器（去离子）生产的去离子水，微生物含量较高，这种水在过滤灭菌后仍可能带有细菌生长的抑制因子。所以配置培养基时最好不要使用这种方法生产的去离子水，而应使用蒸馏水。 --盛放蒸馏水的容器最好是由中性材料制成的（如中性玻璃，聚乙烯等），在初次使用前要确认容器中不含有任何抑制因子。 称重和复水 --操作人员的自我防护：注意缓慢操作，必要时佩戴口罩或在通风柜中操作，以防吸入含有有毒物质的培养基粉末。 --严格按产品说明书准确称量。 --称量所需量的脱水培养基，先加入适量的水，充分混合（注意避免培养基结块），然后加水至所需的量。 --尽量在湿度较低的房间中称量，以避免培养基受潮。 溶解和分装 --脱水培养基加水后适当加热，并不停搅拌使其快速溶解，必要时重新溶解。 --含琼脂的培养基在加热前应浸泡几分钟。 --用各种成分制备的培养基应将不同成分分别加入适量的水中，并充分溶解，然后再加水至所需的量。 pH值的测定和调整 --培养基灭菌冷却到25 ℃时，pH的变化不应超过0.2个单位。 --用稀酸或稀碱（1mol的NaOH或Hcl）将其pH调至要所需要求。 --不可反复调pH，否则会影响培养基的