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丁醇发酵 文倩 丁醇发酵的内容 代谢机理 发酵工艺 发酵丁醇的新发现 发酵丁醇的意义 丁醇发酵 代谢机理 菌种：丙酮丁醇梭菌 条件：厌氧条件 原料：淀粉或糖 产物：正丁醇 产酸期与产溶剂期 产酸期 发酵起始阶段，PH6.0~7.0，合成代谢分解代谢的进行产生大量丁酸和乙酸，伴随PH降低到5.0产生气体二氧化碳，氢气。发酵液酸度急剧上升。 产酸期与产溶剂期 产溶剂期 丙酮丁醇梭菌生长处于稳定期，发酵液的还原倾向增强，乙酸、丁酸等被还原成丙酮、丁醇等新的产物，PH上升，进入产溶剂期 产酸期代谢 乙酰-CoA在硫激酶，3-羟基丁酰-CoA脱氢酶、巴豆酶和丁酰-CoA脱氢酶4种酶的催化下生成丁酰-CoA，然后经磷酸丁酰转移酶(PTB)催化丁酰-CoA生成丁酰磷酸盐，最后丁酰磷酸盐经丁酸激酶去磷酸化，生成丁酸。五碳糖也可以被丙酮丁醇梭菌利用，通过磷酸戊糖途径(HMP)，转化为6-磷酸果糖和3-磷酸甘油醛，进入EMP途径。 产溶剂期代谢 在乙酸的转化过程中，乙酸首先转变为乙酰-CoA，接着2分子的乙酰-CoA在乙酰乙酰-CoA的催化下，合成乙酰乙酰-CoA，最后乙酰乙酰-CoA在乙酰乙酰脱羧酶的作用下水解为乙酰乙酸。丁醇的合成则是丁酸在乙酰乙酰-CoA转化成丁酰-CoA，接着在丁酰-CoA作用下转化成丁醛，最后在丁醇脱氢酶的催化下生成丁醇。 丁醇发酵经历二个阶段：产酸和产醇阶段。在产酸阶段，细胞处于指数生长期，产生大量的乙酸和丁酸，导致pH下降。当pH5，丁酸浓度大于2g/l,，激发梭菌从产酸过程转入产醇过程。此时，细胞处于稳定期，将乙酸和丁酸转化为丁醇和乙醇。发酵时采用两段法发酵工艺通过投加丁酸和葡萄糖为碳源，在适当的条件下，可发酵丁酸产生丁醇。这样不仅减少了其它副产物的产生如乙醇、丙酮等，又提高了底物的利用率，也为丁醇回收的后续处理提供方便。 发酵液中产物的分离提取方法 沉淀法：有机溶剂沉淀法、等电点沉淀法、盐析法、聚电解质沉淀法、非离子型聚合物沉淀法等。 吸附法：物理吸附，化学吸附。 膜分离法：膜分离技术主要可以分为反渗透法（RO）、超滤法（UF）、微滤法（MF）、渗透汽化法（PV）、纳米滤法（NF）、渗析（DL）和电渗析法（ED）等。 萃取法：溶剂萃取，双水相萃取 发酵丁醇的分离 利用棕榈油甲酯作为原位萃取剂能提高丁醇的生产强度。利用生物柴油的多样性使得开展以各种不同的生物柴油为萃取剂的丙酮丁醇发酵成为可能，此法也可提高丁醇的发酵强度。是目前较为常用的效率较高毒副作用较小的方法。 发酵丁醇的分离 发酵萃取技术 日本学者田谷正仁提出了发酵萃取技术，这是一个将发酵与分离相结合的新工艺，其优势是解除了丁醇对微生物的毒性，及时将产出的微生物从发酵液中分离出去，同时使发酵过程由间歇操作改为连续操作，提高产率。同时萃取想可经过精馏或反萃取使溶剂再生而循环使用，降低了工业化的成本。 发酵丁醇的分离 发酵丁醇的分离 由上面实验得出结论 在丁醇发酵萃取工艺中可选择油醇和C-20萜烯醇，其综合性能最强。 且重复性能高，发酵产量较传统工艺高出两倍 发酵丁醇的分离 丙酮-丁醇发酵耦合技术的比较 吸附法成本较高、操作复杂、选择性差且易受发酵液污染，能耗较高,选择性较差。而渗透汽化选择性能好、易操作、能耗低，但其可选择的膜种类较少，通量低，相比于气提和液液萃取易受发酵液颗粒的污染和堵塞。 发酵丁醇的分离 为了解决以上所涉及的问题，现代工艺提出渗透汽化-发酵耦合工艺的研究。所用到的构造分离一发酵耦合生物反应器的膜有： HTPB-PU：疏水性端羟基聚丁二聚氨酯 PDMS／PVDF复合膜：中空纤维复合膜 发酵丁醇的分离 将PDMS(tetraethyl orthosilicate)／PVDF膜组件分别与丙酮．丁醇间歇发酵和流加发酵耦合，通过考察膜分离消除丙酮．丁醇发酵产物抑制作用、膜分离对于丙酮丁醇发酵的糖利用率、溶剂产率和溶剂产量等方面的影响。最终得到以下结论：建立了渗透汽化．间歇发酵分离耦合反应体系，以PDMS(tetraethylorthosilicate)／PVDF为基质的膜组件与丁醇间歇发酵耦合，与间歇发酵相比，耦合分离反应体系的总溶剂产率从O．199 r1 h．1提高到0．44 g lJ h．1，在分离发酵耦合期间(53—65 h)，葡萄糖的利用率由0．49 g l。1 h．1提高到0．75 g 14 h-1，葡萄糖消耗速率提高了45．9％。 发酵丁醇的分离 此方法目前仍然停留在实验室阶段