微波辅助法提取蘑菇果实体多糖的最优化.docVIP

微波辅助法提取蘑菇果实体多糖的最优化 Yuuichi Ookushi, Masahiro Sakamoto and Jun ichi Azuma 京都大学农业研究生院环境科学与技术系 摘要：在水溶液中利用微波辐射提取Hericium erinaceum果实体的多糖。Hericium erinaceum是一种名叫Yamabushitake的蘑菇。在本实验中，研究微波辐射的温度和时间对Hericium erinaceum多聚糖溶解性的影响。结果表明，虽然多聚糖的溶解性会随加热温度的升高而降聚，但是多聚糖的溶解持续到温度升高至200 ℃。这个结果也表明，加长辐射的时间和升高温度对多聚糖的影响一样。比较结果得出，传统的外界加热与微波协助提取相比，后者用140 ℃，提取5 min与用100 ℃，提取6 h的结果相同。这个结论说明微波辅助在蘑菇果实提取多糖的提物时间方面有优势。 关键字：微波辐射 多糖 蘑菇 在古代，蘑菇有多种药理学作用，且有益于我们的健康。自从被发现有抗癌的功效之后，蘑菇就作为长生不老药而被人们所关注。在蘑菇中有一种活性成分被定义为β—葡聚糖的一种，并且很多研究人员也谈论了β-葡聚糖的结构与其生物活动之间的关系。最近，也有一篇评论报道了β-葡聚糖感觉器官在免疫方面的作用。 一般从蘑菇的果实体中提取多糖是在热水中（约100 ℃）,搅拌果实体粉末几个小时，这个过程很费时。因此，我们研究应用微波辐射加热代替传统的水浴加热较迅速的实现提取过程。 微波直接内部加热对分子的偶极旋转产生作用。因此，利用微波法我们可以更快，更均衡的加热材料。并且也实现了更高的产量和更干净的反应物。此外，这种无热量效果（也称做特殊的微波效果）也被讨论过。基于以上方法的优点，微波辐射法在各领域作为“绿色技术”倍受关注。例如:分析环境化学，有机综合，生物应用的进展和无机化学。尤其在有机综合领域，微波辐射方法由于其高效率，高产量和高选择性，使有机综合领域取得了显著的进步；在无机化学方面，只有通过微波辐射才能获得较小的综合纤金属粒子。在这种前提下，近年来应用微波辐射加热提取各种物质。例如：从鹰嘴豆中提取皂苷,从Rubiaceae植物中提取茜草色素和红紫素，这些所有的提取物都要比用常规外部加热而得到的提取物更加高效。但是用微波辐射法从各种真菌类的细胞壁中提取多糖的技术还没有出现。 众所周知，在亚洲国家Hericium erinaceum的果实体是可食用的，药用的蘑菇。这种蘑菇在日本叫做Yamabushitake，和其他担子菌类的细胞一样，由β-葡聚糖和其他多糖组成的细胞壁。最近，Yamabushitake在长野县已经被商业运作。但是这种蘑菇的化学性能还没有被完全开发。 本实验研究微波辐射在蘑菇果实体中提取多糖的应用性，研究微波辐射的温度和时间的影响及包括β-葡聚糖在内的多聚糖溶解性。 材料和方法 材料：柱型YMC—Pack Diol-120(80×500 mm)用做分子量的测定，角质素粉（蟹壳），其他所有试剂都是分析纯。 粉状Hericium erinaceum果实体日本Saishin,Co.,Ltd.在使用前，在40 ℃下用烤炉干燥原料至少48 h。 微波辅助萃取 主要研究在微波辐射法过程中，Hericium erinaceum聚合体的活动，由油脂和小分子物质组成的的杂质在生成物中去除。首先，在生成物中的油脂彻底的被两种形式的氯仿甲醇（2：1，1：1）去除。然后，残渣用70%乙醇处理除去如低聚糖和缩氨酸的小分子物质。最终物质叫做经处理后的原料，用做微波协助提取的样本。 微波协助提取选用微波炉，此微波炉是由Milestone 公司（Shelton,CT,USA）使用HPR-1000/6M技术研制而成的。Monobloc 是一种很强的转子体，可以安全的维持压力到100 bar，或者温度达到300 ℃。2 g经过处理的原材料浸渍在300 ml蒸馏水中，并放在一个密封高压的50 ml容器中。使容器中装有样品并且把搅拌磁棒放在微波炉中，然后在搅拌的情况下对样品进行微波辐射。反映容器中的温度被一个光纤温度探测针监控。用由在WINDOWN的EASY-WAVE软件控制微波辐射。在辐射后，在打开容器前用冰浴冷却到室温。样品通过Toyo No.3滤纸过滤可溶性和不可溶性物质，然后自然蒸干可溶性物质。 微波辅助萃取条件 在所有微波辐射实验前预热2 min，以达到目标温度。1）用微波协助萃取方法在60 ℃，80 ℃，100 ℃，120 ℃，140 ℃，160 ℃，180 ℃，200 ℃，210 ℃，220 ℃和230 ℃下提取5 min。研究加热温度对可溶性多聚糖的影响。 2）微波辅助提取分别在140℃下提取5，10，20，40，60和120 min。来