色谱质谱联机技术在药物分析方面的应用课件.ppt

LC/MS/MS技术在药物研究中的应用 阿地福韦结构改造与体内代谢 鉴定人体内普罗帕酮代谢产物 普罗帕酮结构 分离鉴定普罗帕酮的 I 相代谢产物 LC/MSn分离鉴定尿中普罗帕酮的I相代谢产物 选择性检测尿中普罗帕酮 I 相代谢产物 单羟基代谢产物的结构 普罗帕酮氧化代谢产物质谱断裂特点 分离鉴定尿中普罗帕酮的结合型代谢产物 分离鉴定羟基-甲氧基代谢物的葡萄糖苷酸型结合物 分离鉴定普罗帕酮硫酸型结合物 讨论 — 普罗帕酮结合型代谢物的色谱和质谱特点 多级质谱 在药物动力学研究中的应用 福辛普利临床药动学研究 血浆中福辛普利拉的LC/MSn测定方法 色谱条件 色谱柱: Zorbax C8不锈钢柱（150?4.6 mm ID，5?m，Hewlett Packard） 流动相: 甲醇?乙腈?0.015M氨水（30: 30: 40，v/v） 流速：0.2 mL?min-1 福辛普利拉及内标物二级全扫描质谱图 方法专属性 在生物样品高通量分析中的应用 班布特罗临床药动学研究 班布特罗及内标物的二级全扫描质谱图 特布他林及内标物的二级全扫描质谱图 SRM Chromatograms of bambuterol in plasma SRM Chromatograms of Terbutaline in Plasma 最低检测量 18名受试者单剂量口服10 mg盐酸班布特罗平均药时曲线 二氢麦角胺临床药动学研究 多样本同时定量分析 SRM Chromatograms of trimebutine and cisapride in plasma LC/MS/MS Method Development MS optimization Ionization mode Full scan, MS/MS, SRM Establish limit of detection HPLC optimization Selection of column, mobile phase Short tR while maintaining sensitivity Sample preparation Protein precipitation, L/L, SPE Establish lower limit of quantitation (LLQ) To Increase Sensitivity RT:: 0.00 - 3.82 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 Time (min) 0 20 40 60 80 100 0 20 40 60 80 100 3.23 3.55 3.15 NL: 6.09E3 NL: 2.36E4 NL: 5.00E3 NL: 1.00E4 SRM m/z 226 ? 151.3 SRM m/z 240 ? 147.7 Blank plasma Plasma sample 1 h after administration RT: 0.00 - 3.82 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 Time (min) 0 20 40 60 80 100 0 20 40 60 80 100 Relative Abundance (特布他林) (内标) 班布特罗 0.05 ng/ml 内标 RT: 0.00 - 4.01 0 1 2 3 4 Time (min) 0 50 100 0 50 100 Relative Abundance RT: 3.29 SN: 86 RT: 3.20 SN: 3331 NL: 8.10E2 TIC F: + c ESI SRM ms2 226.00@28.00 [ 150.80-151.80] MS sd1 NL: 2.99E4 TIC F: + c ESI SRM ms2 240.00@28.00 [ 147.20-148.20] MS sd1 特布他林 0.05 ng/ml 沙丁胺醇 2 ng/ml Validation criterion terbutaline Absolute recovery (mean ? SD, n=6) 93 ? 4% Linearity (n=6, w=1/C2) 0.05 ? 8.0 ng/ml Y=0.0108?0.238X, r2 = 0.996