生化工程第二篇.pptVIP

第二章 培养基灭菌Medium Sterilization 生化工程学的起点 1.抗杂菌污染的纯种培养技术(pure culture)：无菌空气、培养基灭菌(sterilization)、无污染接种、大型发酵罐的密封与抗污染设计制造。 2.通气搅拌解决了液体深层培养时的供氧问题。 生物反应过程示意图 目的：发酵过程要求纯培养 灭菌(sterilization): 培养基(medium) 空气 发酵罐及管道 消毒(disinfection) 生产环境 灭菌与消毒的区别？ 二 培养基及设备的灭菌 （进罐后或进罐前灭菌） 1.分批灭菌 (batch sterilization) 实罐灭菌(实 消)： 利用热空气或高压蒸汽 对培养基与发酵罐同时 灭菌。 2．连续灭菌(continuous sterilization)(连消)： 培养基通过连续灭菌装置，快速连续加热 灭菌，后进入灭菌的空罐。培养基时间与温度的变化关系 连续灭菌装置： 1).连消塔保温罐连续灭菌 2).板式热交换器连续灭菌 3).蒸汽喷射连续灭菌 分批灭菌与连续灭菌的特点 3.空罐灭菌：空罐体灭菌 罐压：1.5～2.0×105Pa；罐温：125～130℃， 时间：30～45min 4.发酵附属设备及管道灭菌： 管道：罐压3.5×105Pa；时间：1～1.5h 补料罐：糖水罐罐压1.5×105Pa；时间：30min 消泡剂罐罐压：1.5～1.8×105Pa； 时间：60min 空气过滤器：罐压3.5×105Pa； 蒸汽从上至下通入 第二节??? 加热灭菌的原理 培养基灭菌要求： 达到需要的无菌程度； 有效成分受热破坏程度尽可能低。 灭菌工作关键： 控制加热温度（T）和受热时间(t) 一、加热灭菌原理 1、微生物的热阻：微生物对热的抵抗力称为热阻。 （1）微生物对热的抵抗能力 营养细胞：在60℃加热10 min 全部死亡； 细菌芽孢：能耐较高的温度，在100℃需几分钟 或几小时。 嗜热菌的芽孢：120℃，39 min 或更长时间. （2）致死温度：杀死微生物的极限温度。 （3）致死时间：在致死温度下， 杀死全部微生物所需 要的时间。 2、微生物的热死规律----对数残留定律 热死亡动力学(一级反应动力学)规律： 菌的死亡速率－dN/dt与任何瞬间残留的活菌数N成正比。 即：－dN/dt ＝KN (1) dN/dt：死亡速率，菌体瞬时变化率。 N：残存活菌数， t：灭菌时间（min，s）， K：比死亡速率常数或反应速率常数min－1 ，s－1 将(1)式移项积分：ln(Ns/N0)=－Kt (2) 可变形为：lnNs =－Kt +lnN0 或 Ns=N0e－Kt 或 t=1/K *ln(N0/Ns) N0：原有活菌数（t=0,污染度） Ns：经t时间后残存活菌数（灭菌度，Ns＝10－3） 二 K－比死亡速率常数（反应速率常数） 1．K大小反映微生物受热死亡的难易程度。与微生物的种类及加热温度有关； 相同温度下，k值愈小，加热时间长，则此微生物愈耐热。 即：t=1/K *ln(N0/Ns) 2．温度T对K的影响 T与K的关系，可用Arrhenius方程表示： K=Ae－ΔE/RT K：比死亡速率常数，也称反应速率常数（min－1或s－1 ） A：阿氏常数(s－1 ） E：活化能（J/mol）化学反应中，反应物分子到达活化分子 所需的最小能量。活化能的大小与反应速率相关，活化 能越低，反应速率越快，因此降低活化能会有效地促进 反应的进行。 T：绝对温度（K），T（K）＝t(℃)+273 R：气体常数 (8.31 J/ mol· K ) e: 2.718 因：t=1/K *ln(N0/Ns) 故：t= eΔE/RT *1/A *ln(N0/Ns) 3．与K有关的表示方法：