分析化学 教案11分光度法.docVIP

吸光光度法 基于物质对光的选择性吸收而建立的分析方法——吸光光度法 第一节　吸光光度法的基本原理 一，光的吸收本质： 分子、原子、离子具有不连续的量子化能级，仅能吸收当照射光子的能量hv与被照射粒子的 E激 － E基 ＝（hv）n因为不同物质微粒的结构不同，共有不同的量子化能级，其能量差也不相同,因此对光的吸收具有选择性。若固定某一溶液的浓度 C 和液层厚度 b ，测量不同 下的 A ，以吸光度 A 对吸收波长作图，就得到－吸收曲线，即吸收光谱。 初步定性分析：不同物质吸收曲线的形状与最大吸收波长 不同。 定量分析：不同 C 的同一物质在吸收峰附近的 A 随 C ↑而增大， 吸收曲线是吸光光度法中选择测定波长的主要依据。 二、朗白－比耳定律： 物理含义：当一束平行单色光，通过单一均匀、非散射的吸光物质溶液时，溶液的 A 与溶液的浓度 C ，液层厚度 b 的积成正比。 定量分析的依据。 对于多组分体系，若吸光物质间无相互作用，则： A总 ＝ A1 +A2 + … An 即吸光度具有加和性。 三、偏离朗白－比耳定律的原因： 工作曲线：配制一系列标准溶液，测其 A 。 同样方法配制试液，同样条件测 Ax 求出 Cx 。 1 ．非单色元：目前仪器提供的入射光是较窄的光带——复合光 2 ．化学因素引起的偏离 　　　　　　　　　　　　　　A=Kbc 　　　　　　　　　　　要求 λ 为单色光 同时假设粒子是独立的，彼此无作用，即稀溶液。所以，高浓度时 (C0.01mol/L) ，由于粒子间相互影响，使其吸光能力发生改变，因此，该定律只适用于稀溶液。（ 1 ）平衡效应：有些有色物质在溶液中发生缔合、离解，同溶剂反应，产生互变异构体，光化分解等平衡效应改变了吸收曲线的形状 λmax ，吸收强度等发生了变化，从而导致偏离。 当用水稀释时平衡向右移动，就会使工作曲线弯曲。 （ 2 ）酸效应：溶剂效应，也会使工作曲线弯曲。 例：碘在 CCL4 呈紫色 在乙醇中呈棕色。3 ．另外：介质的不均匀性引起的偏离： 如：胶体乳（悬）浊液等，光通过体系时，一部分光因散射而损失，使透光率减小，吸光度增大，导致弯曲。 ? 第二节　目视比色法和光度计的基本部件 一、目视比色法： 用眼睛比较溶液颜色的深浅以测定物质含量的方法，称为目视比色法。常用的目视比色法是标准系列法。这种方法就是使用一套由同种材料制成的，大小形状相同的平底玻璃管 ( 称为比色管 ) ，于管中分别加入一系列不同量的标准溶液和待测液，在实验条件相同的情况下，再加入等量的显色剂和其他试剂，稀释至一定刻度 ( 比色管容量有 10 ， 25 ， 50 ， 100 等几种 ) ，然后从管口垂直向下观察，比较待测液与标准溶液颜色的深浅。若待测液与某一标准溶液颜色深度一致，则说明两者浓度相等，若待测液颜色介于两标准溶液之间，则取其算术平均值作为待测液浓度。 目视比色法的主要缺点是准确度不高，如果待测液中存在第二种有色物质，甚至会无法进行测定。另外，由于许多有色溶液颜色不稳定，标准系列不能久存，经常需在测定时配制，比较麻烦。虽然可采用其某些稳定的有色物质 ( 如重铬酸钾、硫酸铜和硫酸钴等 ) 配制永久性标准系列，或利用有色塑料、有色玻璃制成永久色阶，但由于它们的颜色与试液的颜色往往有差异，也需要进行校正。尽管目视比色法存在上述缺点，但因其设备简单，操作简便，比色管内液层厚使观察颜色的灵敏度较高，且不要求有色溶液严格服从比耳定律，因而它广泛应用于准确度要求不高的常规分析中。 主要缺点：准确度低 多组分无法测定 优点：设备简单，操作方便。 二、光度法与目视法比较其优点： 1 ．准确度高 2 ．选择性好 3 ．速度快，能用于多组分析。 三、光度计部件： 1 ．光源：产生复合光，常用 6 ～ 12V 的钨丝灯。 600 ～ 1000nm 钨丝灯发出的复合光波长覆盖整个可见光区。 可见光 400 ～ 750nm ，为了防止电源电压微小变化引起的灯光强度变化，因此，必须有 稳压装置 。3 ．吸收池：－比色皿，盛放待测溶液，有： 光学玻璃　石英玻璃 0.5 、 1 、 2 、 3cm 可见区　 用于紫外区 4 ．检测系统： ① 光电转换装置，把光信号转化为电信号。 A ：硒光电池 P309 　使用时注意“疲劳”。 B ：光电管或光电倍增管 P310 。 ② 检流计：测量光电流，并将其转化为 A 、 第三节?? 显色反应及显色条件的选择 将待测组分变成有色络合物的反应－显色反应。 与待测组分形成有色络合物的试剂－显色剂一、显色反应的选择： （ 1 ）灵敏度高： ε 大是显色反应灵敏度的重要标志。  图6-5 吸光度