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谈对《叶绿素提取与分离》实验改进 　　摘要：从教材原实验及不足，到其他生物教师对实验的创新改进以及对实验改进的体会，总结出实验并没有一个固定的模式。为了达到实验目的，教师也要善于学习，勇于探索，敢于创新。这样才会影响到学生，使学生不拘泥干课本，养成质疑、求实、创新、勇于实践的科学精神和科学态度。 　　关键词：叶绿素的提取与分离实验；色素提取液；层析液；实验改进 　　光合作用是高中生物学的重点和难点内容之一，叶绿体是进行光合作用的场所。“叶绿素的提取与分离”是必修～《分子与细胞》中一个非常重要的实验。通过实验有助于学生掌握叶绿体中色素的种类和含量，进而加深对光合作用相关内容的理解。教材对该实验设计了一个比较详细的实验方案，但学生按照教材的要求操作，实验成功率并不高。如何提高实验成功率，许多生物教师在不断探寻。于是，在对教材原实验过程分析的基础上，将实验进行了一些创新改进。取得了较好的实验效果。笔者通过学习和实践，也受益匪浅，对实验教学有了更深的体会。 　　一、教材原实验及不足 　　1.提取绿叶中色素 　　(1)教材介绍：称取5g绿色的叶片(如菠菜叶片)，剪碎，放入研钵中。向研钵中放入少许二氧化硅和碳酸钙，再加入10mL无水乙醇，进行迅速、充分的研磨。将研磨液迅速倒入玻璃漏斗(漏斗基部放一块单层尼龙布)进行过滤，将滤液收集到试管中，及时用棉塞将试管口塞严。 　　(2)不足之处：①材料的选择受限，只能选择容易研磨的叶片，革质叶等不能用。②材料用量多、所用药品多、所用仪器多、操作步骤多，所需时间长。③实验中对二氧化硅和碳酸钙的用量不好把握，多了，难以过滤，而且会残留在滤液中，导致滤液杂质多，颜色浅；少了，研磨不充分，色素含量少，实验效果差。④迅速、充分研磨的程度难把握。 　　2.滤纸条的制备与画滤液细线 　　(1)教材介绍：将干燥的定性滤纸剪成长和宽略小于试管长和宽的滤纸条，将滤纸条的一端剪去两角，并在距这一端1cm处用铅笔画一条细的横线。用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀画出一条细线。待滤液干后，再画一两次。 　　(2)不足??处：色素带分离效果的好坏与滤液细线划得是否细、直、齐直接相关。学生在实际操作时，往往难做到，结果色素带弯弯曲曲，或者滤液细线中色素过少，色素带颜色很淡不易区分。 　　3.分离绿叶中的色素 　　(1)教材介绍：将3mL的层析液倒入试管中，将滤纸条(有绿滤液细线的一端朝下)轻轻插入层析液中，然后用棉塞塞紧试管口。(也可用小烧杯代替试管，用培养皿盖住小烧杯) 　　(2)不足之处：因为试管空间小，操作难度大，容易使滤纸条接触管壁从而影响实验效果。用小烧杯尽管空间大，但滤纸条窄，易变软下塌，使滤液细线没入层析液中。 　　二、对实验的创新改进 　　针对教材原实验的不足，许多教师尝试对实验进行了改进。取得了较好的实验效果。 　　1.对提取绿叶中色素的改进 　　由于叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中，很多教师的改进是将绿色叶片放入无水乙醇中并水浴加热。具体操作是：称取1g绿色叶片，剪碎放入试管，加入2mL的无水乙醇，把试管置于沸水中水浴加热2-3分钟，当试管中的液体呈深绿色时，取出试管，冷却待用。这样处理弥补了原实验的不足：①取材广泛。只要是深绿色的叶片，效果都好。②节约材料和药品。原来要5g叶片，改进后??要1g；原来要10mL的无水乙醇，改进后只要2mL；改进后不需要二氧化硅和碳酸钙。③节约时间。④色素提取液深绿透明，色素含量高，效果明显。 　　2.对滤纸条的制备与画滤液细线的改进 　　由于对滤液细线的要求高，一些教师的改进是用吸水钢笔代替毛细吸管，用钢笔画线容易掌控；或用盖玻片的一侧作为“印章”，蘸取滤液对齐滤纸条上的铅笔细线垂直按下，待滤液干后，重复两次，此方法省时省力，而且滤液细线易细、直、齐。 　　另一种改进是改“画线”为“点样”。将一干燥的圆形定性滤纸(直径大于培养皿底)盖在培养皿上，用毛细吸管吸取色素提取液在中央点上2-3次，形成圆形色素斑。取一枚缝衣针，穿一根细棉线，在棉线末端打个结，将针从滤纸的正面穿过色素斑中心。或在圆形定性滤纸中央用铅笔尖在其中央戳破成一个小孔，用双手把小块滤纸条搓成一个纸捻，把纸捻的一端插入圆形滤纸的中央小孔，纸捻的一端与圆形滤纸平齐，另一端的长度与培养皿底的高度相当，用滴管吸取色素提取液滴在与滤纸平齐的纸捻上，待稍干燥后重复滴2-3次。此方法，可以避免滤纸条在伸入试管时被试管壁上残留的层析液影响。 　　3.对分离绿叶中的色素的改进 　　由于层析液易挥发，有毒，有些老师建议改层析液为无水乙醇；也有些老师自己设计层析盒，由于密闭效果好，能有效防止层析液挥发，造成空气污染，影响师生身体健康。 　　很多教师建议用圆形定性滤纸做色素分离实验。如上述“点样”后，向培养皿底加入适量