几种典型生物与化学杀菌剂对西瓜枯萎病菌抑菌作用.docVIP

几种典型生物与化学杀菌剂对西瓜枯萎病菌抑菌作用 　　摘要：采用管碟法测定８种典型生物与化学农药制剂对西瓜枯萎病菌（尖孢镰刀菌西瓜专化型，Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ　ｆ．　ｓｐ．　ｎｉｖｅｕｍ）的抑菌活性。结果表明，代森锰锌、盐酸吗啉胍、中生菌素、春雷霉素对西瓜枯萎病菌无抑菌活性，多菌灵、枯草芽孢杆菌、甲基托布津、乙蒜素对西瓜枯萎病菌具有较强抑菌活性，抑菌圈半径依次为９．６、７．５、４．８、３．５　ｍｍ。采用生长速率法测定药剂对西瓜枯萎病菌的相对抑菌率及ＥＣ５０，结果表明，多菌灵的抑菌活性最强，持效期大于１４　ｄ，　１６　ｍｇ／Ｌ处理药后１４　ｄ相对抑菌率仍为１００％；其次为生物农药活菌制剂枯草芽孢杆菌，其ＥＣ５０为１．４３７　２　ｍｇ／Ｌ，是用于防治西瓜枯萎病的较理想药剂。 　　关键词：西瓜枯萎病菌；杀菌剂；枯草芽孢杆菌；室内毒力测定 　　中图分类号：Ｓ４３６．５ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）24－5646-04 　　西瓜枯萎病是西瓜主要病害之一，病原为西瓜枯萎病菌［尖孢镰刀菌西瓜专化型，（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ　ｆ．　ｓｐ．　nｉｖｅｕｍ　（Ｅ．　Ｆ．　Ｓｍｉｔｈ）　Ｓｎｙｄｅｒ　＆　Ｈａｎｓｅｎ］，在土中可存活８～１０年时间，是典型的土传病害，也属种传病害，西瓜种子的种壳、子叶和胚轴等各部位均可携带西瓜枯萎病病原［１－５］。病菌从西瓜根系侵入，引起维管束褐变腐烂，导致瓜秧枯死，严重影响西瓜产量，素有“西瓜癌症”　之称［６，７］。由于不合理轮作，连作障碍加重，由于化学药剂大量使用，西瓜枯萎病菌抗药性不断增强，田间西瓜枯萎病的危害逐年增重，已成为制约西瓜产业健康发展的主要因素之一。中国瓜农主要采用化学农药防治西瓜枯萎病。据报道，７０％甲基托布津ＷＰ、５０％多菌灵ＷＰ、７５％百菌清ＷＰ、５０％代森锰锌ＷＰ、４０％美邦治萎（福美双·甲硫）ＷＰ，以及黄蒿、中生菌素、农抗１２０等药剂对西瓜枯萎病有一定的防治效果［6-10］，但尚未彻底解决西瓜枯萎病难题。试验通过比较几种典型生物与化学杀菌剂对西瓜枯萎病菌的室内毒力，以期为后续深入开展枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ）防治西瓜枯萎病打基础，为采用生物农药防治西瓜枯萎病、综合治理西瓜枯萎病提供理论指导。 　　１ 材料与方法 　　１．１ 供试病菌 　　西瓜枯萎病菌分离自２０１１年湖北省武汉市江夏区瓜农提供的病株，经室内纯化、形态学显微观察鉴定、柯赫氏法则回接试验证明。菌种保藏于湖北省生物农药工程研究中心。菌种于ＰＤＡ　培养基上培养４　ｄ　后供试验用。同时采用ＰＤＢ液体培养基２８　℃、１５０　ｒ／ｍｉｎ摇瓶培养４　ｄ，２５０　ｍＬ三角瓶每瓶装量１００　ｍＬ　。ＰＤＡ培养基、ＰＤＢ培养基制作参照文献［１１］。 　　１．２ 供试杀菌剂 　　２０％盐酸吗啉胍可湿性粉剂（东莞市瑞德丰生物科技有限公司，以下简称盐酸吗啉胍）；７０％甲基托布津可湿性粉剂（陕西美邦农药有限责任公司，以下简称甲基托布津）；８０％代森锰锌可湿性粉剂（美国仙农有限公司，以下简称代森锰锌）；８０％多菌灵可湿性粉剂（陕西美邦农药有限责任公司，以下简称多菌灵）；８０％乙蒜素乳油（天津汉邦植物保护剂有限责任公司，以下简称乙蒜素）；３％中生菌素可湿性粉剂（福州凯立生物制品有限公司，以下简称中生菌素）；６％春雷霉素可湿性粉剂（陕西韦尔奇作物保护有限公司，以下简称春雷霉素）；　１　０００亿活芽孢／g枯草芽孢杆菌原药（湖北康欣农用药业有限公司，以下简称枯草芽孢杆菌）。 　　１．３ 方法 　　１．３．１ 不同药剂对西瓜枯萎病菌的抑菌圈测定 采用管碟法［１２］测定几种生物与化学杀菌剂对西瓜枯萎病菌的抑菌活性。取６　ｍＬ摇瓶发酵培养４　ｄ的西瓜枯萎病菌菌液，加入至94　ｍＬ　５０　℃的ＰＤＡ培养基中，摇匀后倒平板，制成含病菌ＰＤＡ平板。用无菌水将供试８种农药制剂均配置成１００　ｍｇ／Ｌ溶液。每平板中各放置３个已灭菌牛津杯，取供试药剂２００　μＬ置入其中２个牛津杯中，另１个牛津杯为无菌水对照，每处理重复４次。２８　℃培养室中黑暗培养３　ｄ，采用游标卡尺测量抑菌圈半径［１３，１４］。 　　２ 结果与分析 　　２．１ 杀菌剂对西瓜枯萎病菌抑菌圈的作用 　　２．２ 杀菌剂对西瓜枯萎病菌的相对抑菌率 　　１）甲基托布津对西瓜枯萎病菌的相对抑菌率随着药剂浓度的升高而增大，菌落直径则随着药剂浓度升高而减小，甲基托布津１、２、４、８、１６　ｍｇ／Ｌ不同浓度处理６　ｄ，菌落直径分别为（７．４５±０．１３）、（７．３８±０．２９）、（７．０５±０．１３）、（５．３８±０．２６）、（２．８５±０．１３）ｃｍ，相对抑菌率分别为４．４９％±１．６６％、５．４５％±３．８３％、９．