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氮素对平菇菌丝生长影响 　　【摘要】本论文研究是以PDA培养基为研究对象，采用固体培养基培养食用真菌平菇一级菌种。本论文初探了几种不同氮素如：柠檬酸铁铵和草酸铵在不同的浓度条件下，对平菇一级菌种生长状况的不同影响。在温度28℃、湿度60%的条件下培养，实验结果显示：平菇最适宜氮素为0.4%的条件下生长最好。 　　【关键词】平菇；施氮素；微生物发酵；影响 　　氮素是一切植物必需的大量营养元素之一，它是生物生长的重要物质基础，对植株的器官建造、物质代谢、生化过程、果实产量及品质的形成等都有不可替代的作用。而且，氮是构成细胞原生质、核酸、磷脂、激素、维生素、生物碱及酶等的重要组分，因此充足的氮是细胞分裂的必要条件。 　　1.实验内容 　　1.1供试材料 　　1.1.1供试菌株 　　试验选用的品种—平菇-89为白城师范学院生物系微生物学实验室保藏菌种。 　　1.1.2培养基 　　斜面培养基、马铃薯综合培养基、液体菌种培养基、改良马铃薯综合培养基。自然PH 值。分装于：70个试管，每个试管加入2/5的培养基为最佳。 　　1.2试验仪器与药品 　　高压蒸汽灭菌锅，烘箱，镊子，刀片，电热套，电子称，小烧杯，玻璃棒，量筒，超净工作台，酒精灯，精密试纸，牛皮纸，标签笔，1N NaOH，1N HCl，蔗糖，琼脂，纱布，95%医用酒精，蒸馏水等。 　　1.3主要仪器的使用方法 　　1.3.1高压灭菌锅的使用方法 　　关闭放气阀，通电后，待压力表上升到0.05MPa时，打开放气阀，放出空气，待压力表指针归零后，再关闭放气阀。对于培养基待压力表上升达到0.105MPa（1210C）时开始计时15-30min；对高压灭菌后不变质的物品，待压力表上升到0.14MPa（1260C）时开始计时30min；对于一些布制品，也可高压灭菌。 　　1.3.2恒温箱的使用方法 　　接通电源，按说明书设置所需温度，将温度计放置烘箱内中心位置，测定实际温度与所设温度是否有偏差，如有按说明书进行校正或自行校正。 　　1.3.3超净工作台的使用方法 　　在接种的前20min，打开超净工作台的风机以及台上的紫外灯；接种前10min时，关闭紫外灯；接种时打开照明灯；接种完毕后，要清理超净工作台，用紫外灯灭菌30min。 ???　1.4试验方法 　　1.4.1一级种培养基的制备及灭菌 　　（1）一级种培养基的制备： 　　用清水将马铃薯的表面洗净，去皮后用电子称称取200g马铃薯，将其切成细条。事先用电热套对装有水的烧杯加热，一段时间后，把马铃薯条放入已经沸腾的烧杯中，加热30分钟，同时要用玻璃棒不停地搅拌。再用滤布将其过滤，把滤液装入量筒中并定容到1000ml。把液体倒入烧杯中加热，将事先用电子称称好的20g蔗糖和20g琼脂加入烧杯中并不停地搅拌以避免糊底。待琼脂完全融化变得澄清时分装于试管中：每个试管加入2/5的培养基，再将棉塞塞入试管封闭。塞入的棉塞占总棉塞的2/3。 　　（2）一级种培养基的灭菌： 　　将培养基放入高压灭菌锅内，关闭放气阀，通电后，待压力表上升到0.05MPa时，打开放气阀，放出空气，待压力表指针归零后，再关闭放气阀。待压力表上升达到0.105MPa（1210C）时开始计时30min。待灭菌结束将培养基取出，斜面处理：使培养基斜面占试管的3/4。 　　1.4.2接种 　　在接种的前20min，打开超净工作台的风机以及台上的紫外灯；接种前10min时，关闭紫外灯；接种时打开照明灯。用酒精棉球擦手，将接种环在酒精灯上灼烧，取一级菌种放入斜面培养基中，再用棉塞封闭试管，以下雷同。接种完毕后，要清理超净工作台，用紫外灯灭菌30min。接种后的试管放入培养箱中，将温度调到280C进行培养。每天观察一次，挑选出污染试管，无污染的试管待下步试验使用。 　　1.4.3不同浓度无机盐的制备及灭菌 　　用精密天平分别称取柠檬酸铁铵0.025g、0.05g、0.2g、0.4g、0.5g；草酸铵0.025g、0.05g、0.2g、0.4g、0.5g，配制成50 ml的溶液，装入十个三角瓶中进行灭菌。 　　1.4.4无菌室接种 　　将已经灭菌的培养基和无菌无机盐分装入30个培养皿中，具体是先把培养基倒入培养皿中，再将不同梯度的无机盐倒入培养皿中，每一梯度有三个重复样品，并标记。待冷却后进行接种。注意同一梯度的培养皿所接菌种的量要相同。接种后放入280C的培养箱中进行观察。 　　1.5培养与观察 　　放入培养箱后，每天观察一次，在第二天待菌种复活有长势后用记号笔标记下生长起点，一周后，再次标记生长终点，并测量间距。 　　2.结果与分析 　　实验结果： 　　表1 不同梯度氮素对菌丝生长的影响 　　通过对菌种长势的观察及表1的数据显示： 　　（1）不同梯度柠檬酸铁铵对平菇一级种菌丝生长的影