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人类疾病的动模型制备概述
经验分享 Let’s enjoy the experiment 1.课题的确立 1)明确实验涉及的学科 e.g.基础医学?病理学?药理学…… 2保证实验有意义 e.g.可乐杀精(预答辩) 3)学科结合组员的兴趣 ★可操作性★科学思维★结合所学知识 (生姜治脱发) 4)优先考虑有趣的动物模型 e.g.舒必利对小鼠自然奖赏效应的影响 (小鼠走迷宫) 沙参麦冬汤对应激性溃疡的预防 (大鼠力竭性游泳) 5)文献+个人倾向 中大图书馆学术电子期刊 98,99,01,03探索性实验论文集 百度,Google…… 2.组员的分工 实验小分队(各司其职,相互辅助) 秘书长: 查阅文献+设计课题+后期制作 药剂师: 药品的来源,价格,用法 侦查员: 观察动物的正常生活和实验状态 器械师: 每次实验前的仪器准备 高级技工: 实验操作 3.实验经费 1)动物的数量 大鼠 《 30只 小鼠 《 100只 豚鼠 《 30只 家兔 《 15只 结合统计学,确立N值,考虑课题与所提供动物的吻合程度 2)实验仪器: 实验室提供?试剂盒? 3)实验药品 药品的价格 e.g. LPS(脂多糖) 药品的来源 购买的可行性 4.时间 查文献+确立实验+实验标书+预实验+修改实验方案+正式实验+后期数据整理+答辩 =一个月 建议: 设计短期实验,急性实验,慢性稳定性实验…… 设计课题时完善细节 5.注重预实验 1)模型是否建立成功(脓毒性休克) 2)动物对实验设计的耐受性(力竭性游泳) 3)考虑药效学+药动学 药品注射的剂量、时间、部位、速度,给 药间隔(山莨菪碱) 4)可操作性的评估 ※根据预实验的结果尽早,及时地修改实 验方案,甚至修改课题 6.正式试验的细节 A 动物的管理: 每次领取动物的前一天向老师申请 合理的喂养(禁食) 动物的冷暖 动物的居住环境(清洁、拥挤程度…… 侦查员密切留意及时清理为实验献身的英雄 B.充分认识动物的特性: 大鼠嗜血,术后预防感染,抓那注重技巧 实验前抚慰家兔的情绪 灌胃要迎合小鼠的吞咽需要…… C.注意检查实验仪器 注射器的类型,针头大小,能否混用? 三通管是否通畅?有否缺损? D.维持剩余药品的药效 冷藏?室温?污染?标签? E.实验记录 数据和图像的保存 记录的时间、地点,室温,周围环境 严谨的表格,专人负责 认真对待每一个实验数据,不得私自修改 F.实验结束后 动物的处理,向动物管理中心老师登记 清理实验台 重视思维 贵在探索 严谨认真 坚持不懈 THANK YOU 传染性疾病动物模型 病毒性肝炎动物模型(甲、乙、丙型) 动物:狨猴、黑猩猩等 致病途径:口服、静脉注射目的型病毒培养液 时间:三~五即可(取决于病毒毒力,暨动物的体质等) 寄生虫病动物模型疟原虫动物模型(人疟动物模型) 动物:夜猴、松鼠猴、狨等。 致模方法:将一定量红内期原虫经静脉注入 时间:一周以上。 普通外科手术动物模型 犬短肠综合症模型 动物:犬 手术:可根据造模目的不同,选择切除和保留的肠段及其长度。 一般小肠长度应少于100cm 创伤动物模型 包括有以下几种 1.? 烧伤动物模型 体表性损伤 吸入性损伤 2.? 复合伤动物模型 放射性损伤 光辐射致伤 复合伤(放烧、烧冲) 冲击伤动物模型 闭口致伤开放致伤局部冲击致伤单纯液压或负压伤等多种 中医症候群动物模型 血瘀动物模型 动物:兔 药品:10%高分子右旋糖酐 方法:10%高分子右旋糖酐、5ml/kg体重,每日两次,连续2天? 免疫缺陷动物模型及其应用 1.T淋巴细胞缺陷动物模型 2.B淋巴细胞缺陷动物模型 3.严重联合免疫缺陷小鼠(SCID小鼠) T淋巴细胞缺陷动物模型 胸腺缺陷,免疫功能丧失 表现为体表无毛(习惯上叫“裸鼠”) 1966年在苏格兰被发现(系自发突变) 发育迟缓,抵抗力差 应在SPF环境下饲养 B淋巴细胞
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