弹性纤维weigerts.docVIP

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弹性纤维- WEIGERT’S 间苯二酚-品红 目的:是鉴别弹性纤维的一种改良染色技术。 原理:由碱性品红、铁、间苯二酚结合到弹性纤维上形成蓝黑色的复合物。核主要是被铁苏木精染色,不会在弹性纤维酸性染液中被过度分化。 对照:动脉或皮肤 固定:10% 甲醛或任何固定良好的组织 技术:石蜡切片4μm。 设备:蒸馏水清洗玻璃器皿,染色缸,微波炉。 试剂: 间苯二酚-品红染料: 碱性品红 2.0 gm 间苯二酚 4.0 gm 蒸馏水 200.0 ml 用500 ml 烧杯,将溶液煮至强烈沸腾,加入: 29% 三氯化铁 25.0 ml 保持沸腾2-5 min。冷却和过滤,丢弃过滤液。烤干沉淀物和滤纸。放回烧杯,加入: 95% 酒精 200.0 ml 小心加热。搅拌,溶解沉淀,弃去滤纸。 冷却,过滤,补充95%酒精至200 ml。加入: 盐酸 4.0 ml 标签,签名和日期。保存期1年。 Weigert’s 苏木精: 详见微波三色。 Van Gieson’s 溶液: 详见EVG 安全:戴手套,护眼镜和白大衣,在通风场所或通风橱中使用。避免接触和吸入。 盐酸:对皮肤、眼睛和呼吸道有剧烈的刺激性,影响靶器官为皮肤、眼睛、呼吸系统、生殖系统及胎儿系统。腐蚀性。 碱性品红(副品红)是一种已知的致癌物质。配制溶液时戴手套,护眼镜,微过滤口罩和白大衣。保持所有打开盖的热溶液于通风橱中。 苦味酸:毒性,干燥时可能产生爆炸。 碘:皮肤致敏,皮肤、眼睛和呼吸系统刺激物,腐蚀性。 程序: 1. 常规脱蜡至蒸馏水。 2. Weigert’s 苏木精工作液(新鲜),10 minutes。 3. 自来水冲洗。 4. Scott’s 蓝色漂白剂 30 seconds. 5. 自来水冲洗, 5 minutes, 蒸馏水稍洗。 6. 间苯二酚品红溶液: a. 微波, 30 seconds b. 室温放置1.5 hours. c. 重复一次,总计染色时间为 3 hours。保留溶液。 7. 95%酒精稍洗去过多的染料。 8. 自来水冲洗,蒸馏水稍洗。 9. Van Gieson 溶液, 1 minute。 10. 快速酒精脱水和二甲苯透明,封固。 结果: 弹性纤维:蓝黑色;胶原纤维:粉红色;核:蓝黑色;其他组织黄色 注意: 1. 当微波处理间苯二酚品红溶液时,将染色缸置于含有200 ml 蒸馏水的500 ml烧杯中。可助于预防高浓度酒精沸腾溢出。 2. 染色后将间苯二酚品红溶液倒回溶液瓶。 参考文献: Sheehan D, Hrapchak B, Theory and practice of Histotechnology, 2nd Ed, 1980, pp 194-195, Battelle Press, Ohio Crookham, J, Dapson, R, Hazardous Chemicals in the Histopathology Laboratory, 2nd ED,1991, Anatech Safety and Compliance In the Histology Laboratory: Biohazards to Toxic Chemicals, Fredenburgh J, Grizzle W., NSH Symposium, Oct. 1993, Philadelphia PROCEDURE CARD 弹性纤维- WEIGERT’S 间苯二酚-品红 程序: 1. 常规脱蜡至蒸馏水。 2. Weigert’s 苏木精工作液(新鲜),10 minutes。 3. 自来水冲洗。 4. Scott’s 蓝色漂白剂 30 seconds. 5. 自来水冲洗, 5 minutes, 蒸馏水稍洗。 6. 间苯二酚品红溶液: a. 微波, 30 seconds b. 室温放置,1.5 hours. c. 重复一次,总计染色时间为 3 hours。保留溶液。 7. 95%酒精稍洗去过多的染料。 8. 自来水冲洗,蒸馏水稍洗。 9. Van Gieson 溶液, 1 minute. 10. 快速酒精脱水和二甲苯透明,封固。 结果: 弹性纤维:蓝黑色 胶原纤维:粉红色 核:蓝黑色 其他组织黄色 注意: 1. 当微波处理间苯二酚品红溶液时,将染色缸置于含有200 ml 蒸馏水的500 ml烧杯中。可助于预防高浓度酒精沸腾溢出。 2. 染色后将间苯二酚品红溶液倒回溶液瓶。 间苯二酚-品红染料: 碱性品红 2.0 gm 间苯二酚 4.0 gm 蒸馏水 200.0 ml 用500 ml 烧杯,将溶液煮至强烈沸腾,加入: 29% 三氯化铁 25.0 ml

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