消化系统疾病动物模型2016ppt课件.ppt

胃和十二指肠溃疡是人类的常见病。任何原因引起致溃疡因素加强和（或）防御因素减弱时，均可导致溃疡发生。 四氯化碳（CCl4）是无色透明液体，不溶于水。CCl4的毒性主要与其活性代谢产物有关。在肝内CCl4经NADPH和肝微粒体细胞色素P450混合功能氧化酶的作用，生成活泼的三氯甲基自由基（CCl3·）和氯自由基。这些自由基能与细胞内和细胞膜上大分子发生共价结合，引起富含不饱和脂肪酸的生物膜发生脂质过氧化，导致膜结构和功能完整性的破坏，肝细胞损伤坏死。三氯甲基自由基还能抑制细胞膜和微粒体膜上钙泵的活性，使Ca2+内流增加，从而引起细胞中毒死亡；三氯甲基自由基能与蛋白质形成共价键，损害线粒体使还原型辅酶Ⅰ（NADH）及ATP在肝内生成减少，脂肪酸氧化受抑制，影响肝脏能量生成障碍，并使三酰甘油和脂肪酸在肝细胞内蓄积。 * * 王慷慨 * 肝纤维化与肝硬化的区别？ * 王慷慨 * 肝纤维化与肝硬化的区别？ 肝细胞弥漫性 变性、坏死 肝内纤维组织增生 肝细胞结节状再生 这三种 病变反 复交错 进行 肝内 血循环改建 假小叶 形成 肝 硬 化 * 王慷慨 * 四氯化碳肝纤维化肝硬化模型 如果长期反复多次给予CCl4 ，可导致肝内纤维增生，逐渐形成肝硬化。 造模机制 * 王慷慨 * 1．皮下注射40%~50% CCl4植物油溶液，首次5 ml/kg体重，以后2 ml/kg体重，每周2次，共10周。动物自由饮水进食。 2．制备肝脏组织石蜡切片，HE和胶原纤维染色，进行病理学检查。 操作方法 CCl4肝纤维化肝硬化模型 * 王慷慨 * 该模型较为可靠，复制时间较短，肝纤维化进展稳定，适合于肝纤维化发生、发展过程的动态观察和研究，是目前国内外常采用的动物模型。 模型评价 CCl4肝纤维化肝硬化模型 * 王慷慨 * 第2周：肝小叶中央区出现片状肝细胞变性坏死，未见明显纤维组织增生。 第4周：除肝细胞变性坏死外，肝内开始形成较薄的纤维间隔。 第6周：肝脏纤维间隔进一步增厚，有假小叶形成。 第8周：肝组织正常结构破坏，形成厚的纤维间隔，并分割形成假小叶。 实验中大鼠成活率在60%左右。 结 果 CCl4肝纤维化肝硬化模型 * 王慷慨 * 参与肝纤维化的细胞??? 肝星状细胞 库普弗细胞 内皮细胞 Pit细胞 肝细胞 * 王慷慨 * 形态学观察：可使用各种胶原纤维染 色，并可做图象分析； 血清胶原代谢指标检测 如PIIIP、HA、FN等。 检测指标 CCl4复合因素模型 肝组织中相关基因表达，如胶原等 * 王慷慨 * 坏死后性肝硬化 * 王慷慨 * A：正常肝小叶 (Mallory染色)； B，C：肝硬化 (Masson trichrome) * 王慷慨 * 第 五 节   胰腺炎动物模型 * 王慷慨 * 引起胰腺自身消化 其他酶反应 引起胰蛋白酶被激活的原因： （1）胆汁反流； （2）胰液分泌亢进； （3）病毒感染、外伤、药物等造成腺泡的损伤。 胆汁和肠液 中的肠激酶 激活 发病机制 胰蛋白酶原 胰蛋白酶 * 王慷慨 * 急性胰腺炎模型 急性胰腺炎的主要表现为胰腺呈炎症水肿、出血和坏死。 临床表现为突然发作的上腹部剧烈疼痛并可出现休克。 急性胰腺炎 * 王慷慨 * 急性胰腺炎模型 牛磺胆酸钠胆胰管逆行注射法 急性胰腺炎 * 王慷慨 * 早期牛磺胆酸钠可直接导致胰腺腺泡细胞或小导管壁的细胞溶解，进一步的损害可能是胆盐激活胰酶，如胰蛋白酶、磷脂酶等，产生腺泡自身消化。 采用胰管逆行注射法诱发动物急性胰腺炎，是根据胰管、胆管共同通路和胆汁反流理论，模拟人类胆源性胰腺炎的发病机制 造模机制 急性胰腺炎 * 王慷慨 * 正常情况下主胰管的压力高于总胆管，胆汁不会进入胰管。但当胆总管阻塞时，胆道内的胆汁可被压入主胰管，引起急性胰腺炎。 大鼠的胆管和胰管为共同开口的管道，解剖上称为胆胰管，从胆胰管上分出6~8支胰管的分支进入胰腺实质。 生理解剖特点 急性胰腺炎 * 王慷慨 * 大鼠实验前禁食不禁水12h，3%戊巴比妥钠（40mg/kg）腹腔注射麻醉。 上腹正中切口进入腹腔，提起胃和十二指肠，显露出胰腺，辨认胆胰管走向，于肝门处用微型无损伤动脉夹夹闭胆总管，以防药液逆流进入肝脏。 用4号钝针头朝胰腺方向穿刺十二指肠前壁，在其浆膜下潜行通过十二指肠乳头穿入胆胰管，用手指固定针头，缓慢（约2min）注入3.5%或5%牛磺胆酸钠溶液1ml/kg体重。 300~350gWistar或SD大鼠 操作方法 3.5%或5%牛磺胆酸钠 急性胰腺炎 * 王慷慨 * 4.另一种穿刺