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液相色谱的柱和系统故障检修ppt课件
* * 结论 高效液相色谱柱问题明显的为: High pressure 高压 Undesirable peak shape 不希望得到的峰形 Changes in retention/selectivity 保留时间/选择性的改变 Often these problems are not associated with the column and may be caused by instrument and experimental condition issues. 经常遇到的这些问题不一定与柱有关,而与仪器和实验条件方面的问题有关 * * 1 1 * * 六、色谱柱和色谱系统的故障检修 每个HPLC使用者应该知道什么 * * HPLC 的组成 泵 进样器/自动进样器 色谱柱 检测器 数据系统/积分仪表 所有这些部件可能出现故障而需要检修。 * * HPLC 的组成 * * 色谱柱问题的类型 A. 压力 B. 峰形 C. 保留时间 * * A压力问题 色谱柱观测 潜在的问题 压力高 堵塞滤头 色谱柱污染 堵塞填料 * * 查出原因 纠正压力 有/无柱子时检查压力 ①去柱后 ②去柱前 ③去预柱…………. 许多压力问题是由于系统或保护柱的阻塞 如果柱压高: ①冲洗柱子:排除柱污染和填料堵塞 包括:高分子量/被吸附化合物 样品或缓冲液中的沉淀物 ②反冲柱子-清洁阻塞的滤头 ③更换滤头 * * Column Cleaning 柱子清洗 用比你的流动相更强的溶剂冲洗 为了增加强度选择反相溶剂 对于分析柱每种溶剂至少用25 ml 冲洗 没有缓冲盐的流动相 100% Methanol 甲醇 100% Acetonitrile 乙腈 75% Acetonitrile :25% Isopropanol 75 %乙腈 :25%异丙醇 100% Isopropanol 异丙醇 100% Methylene Chloride★ 二氯甲烷 100% Hexane ★ 已烷 当用已烷蔌二氯甲烷柱子时,必须先用异丙醇冲洗,然后再用你的反相流动相 * * 柱子清洗 为了增加强度选用正相溶剂 或: 每种溶剂至少用50 ml 50% 甲醇 : 50% 氯仿 乙酸乙酯 * * 怎样更换滤头 柱进口滤头 戴手套 不要让底座干燥 不要使柱身受热,否则填料会喷出 不要旋得太紧 旋好尾端螺母 旋好尾端螺头 * * 压力问题的预防 柱保护 保护柱/预柱 在线过滤器 样品预处理 适当的柱冲洗 过滤缓冲流动相 * * 压力问题的预防:在线装置 Mobile Phase Pre-Column Injector Filter Guard From Pump 预柱 进样器 滤头 Column 从泵来的流动相 保护柱 Analytical Column Filter and Guard Column Act on Sample 分析柱 滤头和保护柱作用于样品 Pre-Column Acts on Mobile Phase
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