美国大口胭脂鱼孵化.DOC

一、人工催产与人工授精 （一）人工催产 亲鱼在催产之前2小时，用小拉网起捕，然后放人约3.6平方米的网箱中，网箱架设在4平方米以上的水泥池中，并辅以缓流水刺激。当水温稳定在16℃以上时，即可进行人工催产。 1.催产剂的种类、注射剂量及注射方法 （1）催产剂的种类 可选用鲤鱼脑垂体（PG）、绒毛膜促性腺激素（HCG）、促黄体生成素释放激素类似物（LRH－A）、地欧酮（DOM）等。 （2）注射剂量 分别为：PG3～5毫克／千克、HCG1500国际单位／千克、LRH－A15微克／千克、Dom3～5毫克／千克十LRH－A250～100微克／千克。上述4种催产剂对大口胭脂鱼催产均有效果，但从人工授精的效果来看，以脑垂体的效果最佳，催产率可达100％。 （3）注射方法 雌鱼采用二次注射法。第一次注射总剂量的1／10，第二次注射剩余剂量。一般第一针在18时注射，第二针在22时注射。雄鱼均采用一次注射法，在雄鱼第二次注射时一起注射。雄鱼注射剂量为雌鱼剂量的一半，注射催产剂后的亲鱼放入水泥池中，同时保持流水刺激。 2.产卵 自然产卵的亲鱼在注射第二针催产剂后按雌：雄一1：1的比例放入4平方米的水泥池中。鱼池中悬挂用棕榈片做成的鱼巢，棕榈片在使用前用手将其撕开成网状，并用15毫克／升的孔雀石绿溶液消毒30分钟。水泥池保持冲水刺激，以达到自然产卵的目的。 当水温17.2～20.3℃时，17小时后雌鱼开始发情产卵；当水温19～22℃时，13～15小时雌鱼就出现发情产卵。 3.卵子、精子及其低温保存 第一次性成熟，雌鱼的产卵量为30～180毫升，1毫升鱼卵为1406～2044粒，平均为1635粒，有效受精卵数为11.2万一18.5万粒，最高为30万粒。来吸水的成熟卵径一般为1～13毫米，吸水膨胀后卵黄囊直径为0.85～1.05毫米，不脱黏的卵径为1.4～1.7毫米，用食盐水脱黏的卵径为1.5一1.95毫米。 雄鱼排精量变化很大、5月上旬繁殖季节开始时，1尾雄鱼排精量为2.5～15毫升，一般为8毫升。过10天后大约在5月下旬，排精量可增至5～16毫升，平均为1叉毫升。每毫升精液中含有精子1.2亿一2亿个。水温25℃时，精子在水中激活后，作涡旋运动持续25～30秒、摆动运动可达90～120秒。个别糟子活力可达180秒。在温度相同的条件下，大口胭脂鱼和鲤鱼精子活动时间基本相似。 鱼卵置于8—10℃的冰箱中，经过10小时后还有受精能力。但是从保存后2小时开始，其受精卵的正常胚胀数显著下降。这可能是鱼卵在推迟受精的情况下；本身发生内在的变化。鱼卵保存在常温26℃下，1小时后，大大失去了早期的受精能力。 大口胭脂鱼精液保存在8-10℃冰箱中，经过48小时后还有受精能力，与2尾雌鱼卵受精，其受精率分别为86％和73％。用现采集的精液与这2尾雌鱼卵受精作为对照，其受精率分别为87％和78％。 （二）人工受精 人工授精一般在第二次注射催产剂后的第二天上午8～10时进行。人工授精采用干法授精。授精过程需在无直射阳光照射的地方进行。将雌、雄鱼亲鱼捞出水面，用毛巾擦干水珠，1人抱鱼，1人挤压雌鱼腹部，将卵子挤人洁净干燥的搪瓷盆中；同时，将雄鱼精液挤入，充分搅拌1—3分钟.尔后将卵子均匀地附在鱼巢上，附卵密度为15一25枚／平方厘米。为了防止卵子堆积，鱼卵撒在棕榈片上时，要注意保持棕搁片的自然收缩状态，防止棕丝挤、撕破鱼卵；然后迅速用水将其冲开，这时卵子出现黏性，附着在棕榈片上，然后将棕榈片移入孵化池中孵化。 二、胚胎发育 1.胚前发育（图1） 图1 大口胭脂鱼的胚前发育 （1）受精卵 成熟的卵呈橘黄色，似圆形，比重大于水，为沉性卵，含大量的卵黄。未吸水的成熟卵，卵径一般为1～1.3毫米；吸水膨胀后不脱黏的卵，卵径为1.4～1.75毫米，从未吸水卵到出膜之前，黏性下降变化不很明显（图1，1）。 卵受精后63分钟出现胚盘，系由卵细胞的原生质向动物极端移动并集中形成，胚盘的高度达卵黄的1／3左右（图1，2）。 （2）卵裂阶段 ①受精后110分钟 胚盘上出现了2个大小相似的分裂球，此时为第1次卵裂（图1，3）。 ②受精后175分钟 进行第2次卵裂，形成4个大小相似的分裂球（图1，4）。 ③受精后210分钟 进入第3次卵裂，即形成大小相似的8个分裂球（图1，5）。 ④受精后241分钟 进行第4次卵裂，即进入16细胞期（图1，6）。 ⑤受精后274分钟 进行第5次卵裂，进入32细胞期。 ⑥受精后5小时37分钟 由于细胞分裂形成明显的隆起的实心细胞团，因而进入桑椹期（图1，7）。 以后细胞分裂仍继续进行，细胞变小，分裂沟模糊不清。 （3）囊胚期 ①受精后7小时22分钟 进入囊胚期。分裂球变得更小，中央的细胞界线不清晰，在原胚盘处形成举起的囊胚，其高度近似原胚盘的高度（图1，8）。 ②受精后