版护理9 吸光光度法PPT课件.ppt

第九章 吸光光度法 ; 吸光光度法：利用分光光度计测定溶 液在某一波长下的吸光度，以确定溶液中 被测物质含量的分析方法;一、吸光光度法概述;（二）物质对光的选择性吸收;光的互补色;朗伯-比尔定律; 摩尔质量为397g·mol-1的物质在最大 吸收波长处摩尔吸收系数κ=1.82×105 dm2·mol-1 。称取0.102g含该物质的试样 配成1000mL溶液，在最大吸收波长处用 1cm吸收池测得A=0.456。 计算试样中该物质的质量分数。; 用邻菲罗啉法测定铁。Fe2+离子质量浓 度为1.0×10-3g·L-1。用2.0cm吸收池，在 波长508nm处测得吸光度A为0.38，计算 铁(Ⅱ)-邻菲罗啉配离子的摩尔吸收系数。;三、可见吸光光度法; 2. 光电比色法 使用光电比色计测定溶液的吸光度进行定量分析的方法 优点：用光电比色计替代人眼，消除主观误差，提高准确度 缺点：用滤光片获得的单色光纯度较差，测定结果的准确度也不高; 用分光光度计进行测定的分析方法 （目前普遍使用的分析方法） 优点：单色光的纯度较高；灵敏度、选择性、准确度比光电比色法好 操作：选择波长为λmax的单色光为入射光→测出试液的A→根据朗伯-比尔定律算出试液的浓度 注意：采用空白溶液(参比溶液)做对照试验 将空白溶液置于光路中→调节仪器使A=0(T=100%)→试液置光路中，读出试液A;1. 标准比较法; 1.00mL 2.25×10-3 mol·L-1 Fe3+离子标准溶液，在酸性溶液中用KCNS显色后稀释至 50.0mL，在波长480nm 处测得吸光度为0.30。另取1.00mL含Fe3+离子的试样，在相同条件下测得吸光度为0.41。计算试样中 Fe3+ 离子的浓度。; 配制系列浓度不同的标准溶液→最大吸收 波长处测定各溶液的A→以标准溶液的浓度为横 坐标，相应的A为纵坐标作图→标准曲线（工 作曲线）→相同条件下测定待测溶液的A →从 标准曲线查出待测溶液的浓度