23.4%瑞凡悬浮剂对大豆疫霉菌不同发育阶段抑制作用.docVIP

23.4%瑞凡悬浮剂对大豆疫霉菌不同发育阶段抑制作用 　　摘要 为了寻找防治大豆疫病的新型杀菌剂，离体条件下测定了23.4%瑞凡悬浮剂对大豆疫霉菌不同生长发育阶段的抑制作用。结果表明，23.4%瑞凡悬浮剂对大豆疫霉菌菌丝生长、孢子囊形成和游动孢子萌发的抑制中浓度（EC50值）分别为0.010 5 μg/mL、0.018 8 μg/mL和0.003 3 μg/mL，但对游动孢子释放无抑制作用。说明23.4%瑞凡悬浮剂在离体条件下对大豆疫霉菌具有明显的抑制作用，具有防治大豆疫病的潜力。 　　关键词 23.4%瑞凡悬浮剂；大豆疫霉菌；不同发育阶段；抑制作用 　　中图分类号 S435.651 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2013）07-0126-03 　　大豆疫霉菌（Phytophthora sojae）是生产上严重危害大豆的重要植物病原卵菌之一，由其侵染引起的大豆疫病是大豆生产上一种分布广泛、危害严重的毁灭性病害，每年给全球大豆生产带来大约20亿美元的经济损失[1-3]。该病于1948年在美国印弟安纳州首次发现，此后，加拿大、澳大利亚、新西兰、日本和中国等国家也相继报道了该病的发生[2-4]。大豆疫病流行时间长，蔓延速度快，在大豆整个生育期均可发生，植株被侵染后在数日内矮化、枯萎和死亡，该病造成的产量损失一般为25%～50%，严重的可达80%以上，部分地块甚至绝收[5-6]。 　　目前，化学防治仍是大豆疫病的主要防治措施之一，以甲霜灵为代表的苯酰胺类杀菌剂是生产上防治大豆疫病的常用杀菌剂。甲霜灵在防治大豆疫病上取得较好的防治效果，但由于甲霜灵对病菌的作用位点单一，随着使用次数的增多和年限的延长，病原菌容易对其产生抗性突变，使其防治效果下降[7]。为了避免因长期使用单一化学杀菌剂而诱发病原菌抗药性的产生，寻找新的高效、低毒、低残留的替代药剂显得十分重要。23.4%瑞凡悬浮剂是一种新型卵菌纲病害杀菌剂，对抑制病原菌孢子的萌发具有较高活性，同时也抑制菌丝体的成长与孢子的形成，具有稳定高效、持效期长的优势[8]。研究表明，23.4%瑞凡悬浮剂对辣椒疫病、番茄晚疫病和荔枝霜疫霉病等病害具有较好的防治效果[8-11]，但23.4%瑞凡悬浮剂对大豆疫霉菌的抑制和防治作用尚未见报道。本文利用生物测定方法测定了23.4%瑞??悬浮剂对大豆疫霉菌菌丝生长、孢子囊形成、游动孢子释放和萌发的抑制作用，为在生产实践中利用23.4%瑞凡悬浮剂防治大豆疫病提供理论依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 供试材料 　　1.1.1 供试菌株。大豆疫霉菌Pm-7-2，由福建省农业科学院植物保护研究所植物病理室分离培养并保存。 　　1.1.2 培养基。黑麦琼脂培养基，具体制备方法如下：将黑麦50 g加适量去离子水浸泡36 h，匀浆机捣碎，55～60 ℃水浴2 h，经4层纱布过滤，上清液加入琼脂17 g，并补水至1 000 mL，于121 ℃ 高压灭菌15 min。 　　1.1.3 供试药剂。试验药剂为23.4%瑞凡悬浮剂（有效成分为双炔酰菌胺，瑞士先正达公司）。对照药剂为72%克露可湿性粉剂（有效成分为代森锰锌·霜脲氰，上海杜邦公司）、500 g/L福帅得悬浮剂（有效成分为氟啶胺，日本石原产业株式会社）。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 对大豆疫霉菌菌丝生长的抑制作用测定。采用FAO推荐的菌丝生长速率法[12]。分别制备含23.4%瑞凡悬浮剂、72%克露可湿性粉剂、500 g/L福帅得悬浮剂的黑麦培养基平板，供试药剂浓度按有效成分含量设置，分别为0、0.005、0.010、0.050、0.100、0.500、1.000、5.000、10.000、50.000 μg/mL，以不含杀菌剂的培养基平板为对照。测定时，将培养好的菌??用打孔器沿菌落边缘打取直径为5 mm的菌块，分别移到含不同浓度杀菌剂的培养基平板中央，每种浓度接种5皿，置于25 ℃ 黑暗培养，当对照的菌落直径生长至7 cm时，用垂直“十”字交叉法测量菌落直径，计算抑制率，所得数据经Finney几率分析法用DPS统计软件求出毒力回归方程、EC50值和相关系数值。 　　1.2.2 对大豆疫霉菌孢子囊形成的抑制作用。参照兰成忠等[13]的方法，挑大小约为1.0 cm×1.0 cm的菌丝块10块，分散于直径为9.0 cm的培养皿（已灭菌）中，每皿加20 mL无菌水，使无菌水充分淹过菌丝块表面，浸泡1.0 h后，将培养皿中的无菌水充分吸干净，然后分别加入20 mL不同浓度的药剂，药剂浓度按有效成分含量设置为0.005、0.010、0.050、0.100、0.500、2.000、10.000、50.000、100.000、300.000 μg/mL，以无菌水为对照，使液面