第14篇蛋白质的生物合成.pptVIP

第14章 蛋白质的生物合成 一 参与蛋白质合成的RNA和核糖体 1 中心法则 2 核糖体 核糖体是细胞内合成蛋白质的场所，在蛋白质生物合成过程中，将tRNA、mRNA及多种酶和蛋白质因子的作用协调起来。核糖体由rRNA和蛋白质组成，有大小两个亚基。 3 tRNA和氨酰-tRNA合成酶 二 蛋白质合成的步骤 1 氨酰-tRNA的合成 氨基酸在掺入蛋白质前，先要在氨酰-tRNA合成酶的催化下进行活化，由ATP供能。在氨酰-tRNA合成酶分子上有氨基酸和tRNA的专一结合位点，将特定的氨基酸和特定的tRNA通过高能磷酸键结合起来。在氨酰-tRNA合成酶的催化下先生成氨酰-AMP，再将活化的氨基酸转移到专一性的tRNA分子上，生成氨酰-tRNA。总反应式为： fMet–tRNAf通过其反密码子与起始密码子识别并结合，形成30S-mRNA-fMet-tRNAf起始复合物。 30S复合物与50S大亚基结合形成有翻译功能的70S起始复合物。在70S起始复合物上有两个tRNA结合位点：A位为AA-tRNA结合位；P位为肽酰-tRNA结合位。fMet-tRNAf处于P位，空A位接受第2个AA-tRNA。 3 肽链的延伸 ①第一个新进入的氨酰-tRNA结合到A位 由GTP供能，在延伸因子Tu和Ts参与下，新进入的氨酰-tRNA的反密码子与A位上mRNA的密码子互补。 ② 转肽 处于A位上的氨酰-tRNA上的α-氨基与P位甲酰蛋氨酰-tRNAf上的α-羧基间生成肽键。这时A位上的为二肽酰-tRNA，P位上的tRNA为空载。空载的tRNA从核糖体上脱离。 ③ 移位 在延伸因子G的参与下，由GTP供能，核糖体沿mRNA5→3方向移动一个密码子的距离。原来在A位上的二肽酰-tRNA移到P位，A位空出准备接受下一个氨酰-tRNA。 重复以上三个步骤，直到mRNA上终止密码子出现在A位。 4 肽链合成的终止 当核糖体沿mRNA5→3方向移动到终止密码子时，没有相应的终止氨酰-tRNA进入A位，肽链合成终止。有三种终止因子RF1, RF2, RF3参与终止步骤。RF1识别终止密码UAG, UAA；RF2识别UAA, UGA；RF3促进RF1, RF2的识别。RF1, RF2结合到核糖体后，使转肽酶构象转变为水解酶活性，催化肽酰与tRNA间的酯键水解，合成的肽链从核糖体上释放出来。空载tRNA从核糖体上脱离，核糖体解离成50S和30S两个亚基，离开mRNA，多肽合成结束。 5 多核糖体结构 在一条mRNA上可以结合多个核糖体，呈念珠状，称为多核糖体结构。在蛋白质合成中核糖体总是先结合于mRNA5-端，从起始密码AUG开始，沿5→3方向翻译密码子，合成多肽链，当移动一段距离后，第二个核糖体又可与空出的mRNA5-端结合，沿5→3方向进行翻译。 在一条mRNA链上可结合多个核糖体，各自独立进行多肽的合成，能提高mRNA的翻译效率。 6 多肽链的加工 1)N-端甲酰基及多余氨基酸的切除 3)切除非必需肽段 有些酶、激素等要经过此加工过程。如胃蛋白酶、胰蛋白酶等，初合成的是没有活性的酶原，在一定条件下除去一段肽才能转变为有活性的酶。如胰岛素，初产物为前胰岛素原，经切除N-端信号肽变为胰岛素原，再切除C肽成为有活性的胰岛素。 三 蛋白质生物合成的抑制物 1 抗菌素 2 干扰素 干扰素是病毒感染宿主细胞后，宿主细胞产生的一种具有多功能的蛋白质。人体被病毒感染后可产生3类干扰素：α-干扰素(白细胞产生)，β-干扰素(成纤细胞产生)，γ-干扰素(T淋巴细胞产生)。每一类中又有若干亚类。 干扰素能干扰病毒蛋白质的合成，还对病毒的复制、转录、病毒颗粒的装配等起抑制作用。 3 抗代谢物 抗代谢物是指在结构上与参加反应的天然代谢物相似的物质，能竞争性地抑制某种酶。 在结构上类似于遗传信息传递中的某些底物的物质可用于治疗肿瘤，如6-巯基嘌呤、5-氟尿嘧啶等碱基类似物可抑制DNA的复制。 嘌呤霉素的结构与Ttr-tRNATyr(酪氨酸)相似，可代替其进入核糖体A位，连接到延伸肽链的C端，造成肽链合成终止。 提 要 核糖体的功能：①识别mRNA上的起始点，②使mRNA上的密码子与tRNA上的反密码子配对，③合成肽键。 蛋白质生物合成的步骤： ①氨酰-tRNA的合成 ②多肽链合成的起始 ③多肽链合成的延伸