生物工程下游技术五章萃取技术.ppt

5.1 溶剂萃取概述 萃取：当含有生化物质的溶液与互不相溶的第二相接触时，生化物质倾向于在两相之间进行分配，当条件选择得恰当时，所需提取的生化物质就会有选择性地发生转移，集中到一相中，而原来溶液中所混有的其它杂质（如中间代谢产物、杂蛋白等）分配在另一相中，这样就能达到某种程度的提纯和浓缩。 萃取在化工上是分离液体混合物常用的单元操作，在发酵和其它生物工程生产上的应用也相当广泛， 萃取操作不仅可以提取和增浓产物，使产物获得初步的纯化，所以广泛应用在抗生素、有机酸、维生素、激素等发酵产物 的提取上。 萃取过程 萃取的基本概念 ①萃取 : 溶质从料液转移到萃取剂的过程。 ②反萃取：溶质从萃取剂转移到反萃剂的过程。 在完成萃取操作后，为进一步纯化目标产物或便于下一步分离操作的实施，将目标产物从有机相转入水相的操作就称为反萃取（Back extraction) ③物理萃取和化学萃取：物理萃取的理论基础是分配定律，而化学萃取服从相律及一般化学反应的平衡定律。 萃取的基本概念 萃取法是利用液体混合物各组分在某有机溶剂中的溶解度的差异而实现分离的。 料液：在溶剂萃取中，被提取的溶液， 溶质：其中欲提取的物质， 萃取剂：用以进行萃取的溶剂， 萃取液：经接触分离后，大部分溶质转移到萃取剂中，得到的溶液， 余液：被萃取出溶质的料液称为。 实验室液液萃取过程 生物萃取与传统萃取相比的特殊性 生物工程不同于化工生产，主要表现在生物分离往往需要从浓度很稀的水溶液中除去大部分的水，而且反应液中存在多种副产物和杂质，使生物萃取具有特殊性。 ① 成分复杂 ② 传质速率不同 ③ 相分离性能不同 ④ 产物的不稳定性 萃取过程有选择性 能与其它步聚相配合 通过相转移减少产品水解 适用于不同规模 传质快 周期短，便于连续操作 毒性与安全环境问题 pH值：pH低，有利于酸性物质分配在有机相，有利于碱性物质分配在水相。 温度：一般采用较低的温度。 无机盐：无机盐有利于溶质转移到有机相。 有机溶剂的选择 根据相似相溶的原理，选择与目标产物极性相近的有机溶剂为萃取剂，可以得到较大的分配系数（根据介电常数判断极性）； 有机溶剂与水不互溶，与水有较大的密度差，黏度小，表面张力适中，相分散和相分离容易； 应当价廉易得，容易回收，毒性低，腐蚀性小，不与目标产物反应。 常用于生化萃取的有机溶剂有丁醇、丁酯、乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸戊酯等。 带溶剂 对于水溶性强的溶质，可利用脂溶性萃取剂与溶质间的化学反应生成脂溶性复合分子，使溶质向有机相转移。 ①抗生素萃取剂：月桂酸、脂肪碱或胺类等。 ②氨基酸萃取剂：氯化三辛基甲铵。 溶质与带溶剂之间的作用：离子对萃取、离子交换萃取、反应萃取。 乳 化 乳化：水或有机溶剂以微小液滴分散在有机相或水相中的现象。 这样形成的分散体系称乳浊液。 乳化带来的问题：有机相和水相分相困难，出现夹带，收率低，纯度低。 乳化 5.2 双水相萃取 双水相萃取技术又称水溶液两相分配技术，是近年来出现的引人注目的、极具前途的新型分离技术。已被广泛的应用于生物化学、细胞生物学和生物化工领域。 用此种方法已提取的酶已达数十种，其分离也达到了相当的规模，如甲酸脱氢酶的分离已达到了几十公斤的湿细胞规模，半乳糖苷酶的提取已进行了中试规模实验，该法具有广阔的应用前景。 1896年Beijerinck观察到当把明胶与琼脂或把明胶和可溶性淀粉的水溶液混合时，先得到一混浊不透明的溶液，随后分成两相，上相含有大部分明胶，下相含有大部分琼脂(或可溶性淀粉)。 2.2％的葡聚糖水溶液与等体积的0.72％甲基纤维素钠的水溶液相混合并静置后，可得到两个粘稠的液层。 一、双水相的形成 当两种高聚物水溶液相互混合时，它们之间的相互作用可以分为三种情况： ① 互不相溶，形成两个水相，两种高聚物分别富集于上下两相 ② 复合凝集，也形成两个水相，但两种高聚物都分配于一相，另一相几乎全部为溶剂水。 ③ 完全互溶，形成均相的高聚物水溶液。 3、双水相萃取概念 利用物质在不相溶的两水相间分配系数的差异进行萃取的方法。 由于双水相系统的形成，物质在两个互不相溶的两个水相间的分配系数不同，在适当的条件下不同的物质，分别分布在上相和下相中，从而达到物质的分离。 二、影响双水相系统萃取的因素 双水相萃取受许多因素的影响，被分配的物质与各种相组分之间存在着复杂的相互作用。 作用力包括氢键力，电荷力，范德华力，疏水作用，构象效应等等。 因此形成相系统的高聚物相对分子质量和化学性质，被分配物质的大小和化学性质对双水相萃取都有直接的影响。 粒子的表面暴露在外，与相组分相互接触，因而它的分配行为主要依赖其表面性质。盐离子在两相间具有不同的