农药学原理课件作用机制研究的思路和方法.ppt

作用机制研究的思路和方法 1. 杀虫剂作用机制研究的思路和方法 杀虫剂症状学(Symptomatology)是研究杀虫剂对靶标昆虫引起的中毒症状的科学。 从中毒症状可以推测其毒理作用,因此,症状学观察是研究杀虫剂作用机制最初的,然而也是最重要的一步。 必须指出的是同一杀虫剂对不同种类的昆虫乃至同种昆虫的不同虫态引起的症状可能不同。 杀虫剂的作用机制乃是决定其症状的主要因素。在某种程度上,我们可以通过观察其中毒症状粗略地了解作用机制。 神经毒剂 Example: DDT 按Tobias的描述,美洲蜚蠊中毒后典型症状表现为: ①足过度地伸张,身体重心抬高,站立不稳; ②足及头部震颤; ③步态失调,对外界刺激过度敏感; ④腹部朝天仰卧,又努力翻身,多次重复进行; ⑤足痉挛,包括两类动作,一是高频颤抖,二是大动作的屈、伸; ⑥停止颤抖,只表现为跗节、触须、触角的孤立抽搐; ⑦除心跳外,完全静止不动直至真正死亡。 有些昆虫自断式掉下的足(即自行离体的足)仍可继续进行特有颤抖。 Example: BHC 六六六和DDT症状大致相同,但作用更加迅速。按Pasguier(1947)的描述,沙漠蝗中毒后的症状为: ①先兆期—往往有腹部抬高的运动; ②兴奋前期—腹部收缩运动,并用后足摩擦; ③过度兴奋及运动失调期—对外界的刺激过度敏感,企图飞翔,但结果是不能飞而运动失调; ④痉挛期—仰卧或侧卧,肢体及口器抽搐,腹部伸长; ⑤麻痹期; ⑥昏迷期; ⑦死亡。 Example:有机磷杀虫剂TEPP Chadnick等以TEPP处理美洲蜚蠊: 先引起兴奋,试虫运动不停; 接着全身开始抽搐,足、翅及腹部颤抖; 然后进入麻痹状态,逐渐死亡 Example:天然除虫菊酯 Klinger描述的鳞翅目幼虫的中毒症状: ①背部隆起,迅速不停地爬动,头部左右摆动,口器咀嚼而不断地有食物吐出; ②全身扭曲,翻滚,头尾收缩又伸直; ③虫体侧卧静止,偶有微弱的抽搐,对外界刺激反应减少; ④完全麻痹,但仍有心跳; ⑤完全死亡。 拟除虫菊酯杀虫剂,其对昆虫的中毒症状也是如此,只不过作用更加迅速。 溴氰菊酯的中毒症状可划分为两个阶段,即兴奋期和抑制期。在兴奋期内,试虫乱爬乱动;到抑制期,活动逐渐减少直至麻痹。10多分钟后,试虫可能死亡亦可能复苏。 呼吸毒剂 以鱼藤酮为代表,中毒症状主要是一个逐渐麻痹的过程,但对某些昆虫,可能先有一个兴奋过程,然后进入麻痹状态。 Tischler对鱼藤酮中毒的家蚕幼虫的症状作了如下的描述: ①不活动,无明显反应(约35min); ②短暂的兴奋期,频繁爬动(约10min); ③运动失调、跌倒、侧卧(约5min);逐渐麻痹。 肌肉毒剂 以尼亚那的杀虫有效成分ryanoid为代表, 中毒症状： 不出现兴奋和抽搐,而是全身麻痹,肌肉松弛,对外界刺激无反应； 但在临近死亡时,肌肉又表现为强直性收缩状态。 症状学观察应注意的问题 ①不同的昆虫可能对同一种药剂有不同的症状表现，应选择几种有代表性的不同的试虫进行症状学观察。 ②同一药剂因剂量不同而对同一昆虫反应出来的症状也不相同。如溴氰菊酯,在很低的剂量水平下,并无毒杀、击倒作用,而只表现拒食作用。因此,在观察症状时,应设置高、中、低几个剂量水平。 ③天然产物杀虫剂的作用往往比化学合成杀虫剂的作用更复杂,而且作用缓慢。因此,在观察症状时不但要观察试虫的急性中毒、死亡等症状,而且要较长时间地观察其对行为的影响,观察其对生长发育的影响。 研究实例：苦皮藤素Ⅳ ①菜青虫或粘虫幼虫取食少量染有苦皮藤素Ⅳ的叶片后,一般不再取食,有些试虫不断爬动,但大多数试虫静止不动。经过一段时间后,所有试虫都静止,但若用镊子触及幼虫腹部末端,试虫还会爬行。 ②进入麻醉状态。触及腹部末端,试虫不再爬行,虫体瘫软,但反应并未完全消失,菜青虫个别试虫的头部还可微微扭动,但粘虫幼虫进入麻醉状态则对外界的刺激反应消失。 ③有些试虫如果摄入毒物剂量小,则麻醉一段时间后试虫会苏醒,并可继续取食。 研究实例：苦皮藤素V ①试虫连续或间断取食一定量的染毒叶片后,一般不再继续取食。经过一段时间,试虫表现明显的兴奋症状,在培养皿内不断爬动,甚至翻滚;试虫虫体侧卧,前后弓缩,扭曲,抽搐。这段时间可持续20～60min。 ②一般在食毒后2h左右试虫失水,但不是体壁失水,而是表现为上吐下泻,乃至将试虫直肠挤出体外。这一阶段历时40～160min。 ③若试虫摄毒较多,失水多,则全部虫体呈水渍状,虫体极度缩短,体色不变,慢慢死亡;若摄毒较少,试虫失水不多,则可恢复。 2 组织学观察 昆虫组织学是研究昆虫