恒温环境中地西泮对肥须亚麻蝇虫的作用和法医学意义.docVIP

　　恒温环境中地西泮对肥须亚麻蝇虫的作用和法医学意义 --前 言 通过研究我们发现蝇类幼虫的头咽骨能够反映幼虫在生长发育过程中的变化规律，且与体长体重等其它指标相比，头咽骨具有更好的稳定性。王玲[1]曾对肥须亚麻蝇幼虫的气门及头咽骨进行了研究，她指出肥须亚麻蝇幼虫咽骨的骨化面积和咽骨平均光密度均随着幼虫日龄的增加呈现出规律性的变化。既往的相关研究都可以刑事案件中死后间隔时间（PMI）的推断提供理论依据。本次试验选用的肥须亚麻蝇是石家庄地区的优势蝇种。它分布广泛，较易捕获切繁殖力强，是法医昆虫学侦破案件中应用较多的蝇种。试验以肥须亚麻蝇幼虫的头咽骨为研究对象，通过测定头咽骨的面积、骨化面积、平均光密度来建立在地西泮影响下，各项指标和幼虫发育时间的关系，为利用法医昆虫学推断死后间隔时间（PMI）提供有力的理论指导。 ......... 1材料与方法 1.1实验材料 在河北医科大学校园内以瘦猪肉诱捕肥须亚麻蝇，带回实验室饲养。蝇种鉴定按照《中国蝇类检索表》系统进行分类。将肥须亚麻蝇置于养蝇笼内，饲以纯净水、奶粉、白砂糖（奶粉：糖＝1:1）。养蝇笼置于生化培养箱内，温度设定为 28℃，湿度为 75％，光照为 12:12 小时。每天换水一次，及时添加饲料，连续饲养至第三代成蝇作为母蝇开始试验。地西泮的最大注射剂量为50mg／60kg，根据“人和动物按体表面积折算的等效最大用量”计算出家兔的致死剂量为 20mg／kg，根据此剂量分别设定家兔的注射剂量为1/2 倍致死剂量、1 倍致死剂量、2 倍致死剂量。 1.2肥须亚麻蝇的饲养 在 28℃恒温条件下用瘦猪肉诱成蝇产卵，将切成2cm×2cm×2cm 的小块，中间切开，置于 50ml 的烧杯中，放进养蝇笼。每间隔30min 收集一次产有虫卵的卵块，将卵块从养蝇笼内取出并放入装有不同浓度的家兔肌肉的烧杯中，标明产卵时间。将这4 只烧杯置于盛有沙子的大烧杯中，保证幼虫生长过程中食物充足。将幼虫标本从70%的酒精保存液中取出，放在表面皿上。用大头针在幼虫腹部两侧扎数个小孔，然后放入 10%的KOH 溶液中消化。待幼虫在KOH 消化液中充分消化 24 小时后，将幼虫取出，再次放在表面皿上，使用镊子轻压幼虫体部，将体内已消化的组织排出。将幼虫在纯净水中洗净，依次放入 30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、100%的酒精中逐级脱水，每级 20min，然后将经过 9 级脱水的幼虫在 100%的酒精与二甲苯的混合液（比例为 1:1）浸泡 20min，放入二甲苯中透明。将透明好的幼虫放置在载玻片上，滴加加拿大树胶，在解剖镜下将标本整姿，盖上盖玻片，置于阴凉处风干。 前言…………………………………9 1材料与方法………………………………9 1.1实验材料……………………………………9 1.2肥须亚麻蝇的饲养…………………10 2结果.……………………11 附图.………………………15 3讨论.……………………24 3.1地西泮对肥须亚麻蝇体长体重的影响………………………………23 3.2地西泮对肥须亚麻蝇头咽骨的影响………………………………25 4结论.…………………………26 3讨 论 3.1地西泮对肥须亚麻蝇体长体重的影响 在 28℃的恒温条件下，肥须亚麻蝇幼虫的体重随幼虫生长时间的延长逐渐增加，当体重达最大值后随幼虫生长时间延长基本维持不变。M0、M1、M2、M3各组幼虫在36h 时，各组幼虫平均体重出现显著差异（PM2M1M0。在 28℃的恒温条件下，肥须亚麻蝇幼虫的体长随幼虫生长时间的延长逐渐增加，当体长达最大值后随幼虫生长时间延长出现一定幅度减小，之后基本维持不变。M0、M1、M2、M3各组幼虫于孵出 12h 时开始采集标本，在 48h 时，各组幼虫平均体长出 现 显 著 差 异 （ PM2M1M0。由以上数据可知，地西泮增快了肥须亚麻蝇幼虫的生长速度，同时增大了体长体重的最大值，且随着地西泮浓度越大，幼虫体长体重达最大值的时间越短，极值越大。 3.2地西泮对肥须亚麻蝇头咽骨的影响 12h 时，四个实验组幼虫的口钩面积最小，各组的最小值之间差异明显，具有统计学意义（P