2012年季期 生化理论授课课件6 酶化学.ppt

[教学目标] 1．掌握酶的结构和功能以及影响酶促反应速度的因素； 2．熟悉酶的化学本质和特性； 3．了解使酶具有高效催化效率的因素。 [教学重点] 首先认识酶的化学本质是蛋白质。从结构上 以一般蛋白质的共同点去理解酶的理化特性，以不同点去 理解酶的特异性、催化作用和催化机制。另外，结合酶的 化学本质和催化机制学习各种影响酶反应速度的因素。 [教学难点] 使酶具有高效催化效率的因素。 酶的催化作用可使反应速度提高106 ～1013倍。 例如：过氧化氢酶催化H2O2的分解 酶促反应一般在pH 5-8 水溶液中进行，反应温度范围为20-40?C。 高温或其它苛刻的物理或化学条件，将引起酶的失活。 根据酶分子的组成成分将酶分为两类 5.异构酶：催化 各种异构体之间的互变。 常见的有消旋和变旋、醛酮异构、顺反异构和变位酶类。 6.合成酶类：催化有ATP参加的合成反应。 光学专一性（对有旋光性物质） 一种酶只能作用于几何异构体或生成几何构 体中的一种，例：延胡索酸酶，只能生成反— 丁稀二酸 锁钥假说:象是具有刚性结构的，酶表面具有特定的形状。酶与底物的结合如同一把钥匙对一把锁一样。 诱导契合假说:该学说认为酶表面并没有一种与底物互补的固定形状，而只是由于底物的诱导才形成了互补形状。 酶活性中心特点： 只占很小一部分（大树上的鸟巢或刀上的刃）； 具有一定的空间构型，且有关基团靠得比较近，而它在一级结构中却离得比较远； 含有特定的催化集团； 具有柔性； 通常是一个裂隙。  酶分子为酶的催化提供各种功能基团和形成特定的活性中心，酶与底物结合成中间产物，使分子间的催化反应转变为分子内的催化反应。  邻近：是底物向酶的活性中心靠近，从而形成局部区域高浓度（底物浓度从10—3M→102M，相当于将底物浓度浓缩了10万倍） 定向：S有规律地排列在活性中心周围（打饭时排队而不是一窝蜂） 反应速度与底物浓度成正比，反应速度这时最少可扩大1000倍，最高可达100万倍。 邻近效应和定向效应是加速反应速度的主要原因。 （3）酸碱催化（广义酸碱） 酶分子可释放氢质子，也可接受氢质子，而且都存在于活性中心中的催化基团和结合基团邻近，可随时借用和反应。 His 残基的咪唑基是酶的酸碱催化作用中最活泼的一个催化功能团。 催化剂通过与底物形成反应活性很高的共价过渡产物，使反应活化能降低，从而提高反应速度的过程，称为共价催化。 酶中参与共价催化的基团主要包括 His 的咪唑基，Cys 的巯基，Asp 的羧基，Ser 的羟基等。 某些辅酶，如焦磷酸硫胺素和磷酸吡哆醛等也可以参与共价催化作用。 慨念：是研究酶促反应速度及其影响反应速度因素的一门科学。 通过测定酶促反应速度可以了解酶活力的大小。 影响的情况有三种（即分为三个阶段）： 1. [S]很低时，随着[S]升高，v加快，且成直线关系，属一级反应； 2. [S]一定量时，[S]升高，v加快，但比例下降，属混合级反应； 3. [S]较高时，即[S] ＞＞[E]，[S]升高，v不变（无所谓），属零级反应。 米氏方程式（反映底物浓度[S] 与反应速度v间的定量关系的公式） Km的求法 1. 双倒数作图法 2. Eadie—Hofstee方程 2. 可逆抑制作用 定义:抑制剂与酶的活性中心或活性中心以外的基团以非 共价键结合，反应是可逆的，即抑制剂可通过超过滤、 透析法除去后使酶的活性得到恢复。 2. 可逆抑制作用 （3）反竞争性抑制： 酶只有在与底物结合后，才能与抑制剂结合，引起酶活性下降。 反竞争性抑制可用下式表示： 影响的情况有两个方面： 不同生物，在其他条件不变时，有一定的最适温度，人体最适温度370 C，动物35-400 C，植物和微生物32-600 C 。有另外：液化淀粉酶的最适温度900 C 酶适合在低温下保存（低温时，活力低，但不失活） 。 酶表现活性有一定的PH值范围，也有最适PH值。 酶的最适PH值——酶表现最大活力时的PH值。 不同的酶有不同的最适PH值： 人体及动物体内大多数酶为中性：6.5—8.0，如血液中的酶为7.2—7.6，肠中的酶7.6-7.8，但有另外:胃酶为1.9，精氨酸酶为9.8。植物和微生物的最适PH值为4.5—6.5. pH对酶作用的影响机制：1.环境过酸、过碱影响酶分子内部构象，使酶变性失活；2.影响酶活性基团或底物基团的解离。 酶一般放在缓冲液中保存。 激活剂的定义：凡是使酶的活性增加，酶促反应速度加快的物质。 激活剂的种类： 金属离子: Mg2+、Zn2+、 Mn2+ 无机离子：Cl- 有机小分子：VC(抗坏血酸) 、Cys、GSH