基因克隆的基本理论及实验技术PPT课件.pptVIP

基因克隆的基本原理及实验技术;课时及内容安 排;第一课基因克隆的基本概念及理论知识;基因克隆的定义：;什么是基因？;染色体、DNA 与基因之间的关系;转录起始调控区（启动子区）的扩增;基因的编码区及启动子区序列必须通过连接到质粒上构建成重组表达载体，然后进行目的片段扩增及功能研究。;什么是质粒（Plasmid）？;质粒的重要特征;;限制性核酸内切酶;限制性核酸内切酶的命名法则; DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的，最初是在大肠杆菌细胞中发现的。它是一种封闭DNA链上缺口酶，借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5’-PO4与另一DNA链的3’-OH生成磷酸二酯键将两条紧邻DNA链连接起来。 ; 内切酶和连接酶是基因克隆实验中两种重要的工具酶，它们如同分子生物学家剪刀和针线，可以任意地将感兴趣的基因片段进行切割和连接，实现DNA序列的重组。;质粒(plasmid)和载体(vector)有什么区别？;载体的种类;TA克隆载体;T;酶切位点定向克隆的克隆载体;EcoR I+Hind III切;表达载体;原核表达载体;真核表达载体;目的蛋白表达载体中的表达盒;基因克隆是将DNA或基因组的DNA片段嵌入 克隆载体，再将载体植入培养的宿主细胞， 进行载体扩增或表达蛋白。;大肠杆菌;;大肠杆菌在生物技术中的应用 ;生物安全性;基因克隆的