体外分技术课件 2014.10.ppt

临床应用 内分泌系统： 甲状腺激素及有关激素：TT3、TT4、FT3、FT4、rT3、 TSH、 TRH 甲状腺自身抗体与抗原：TgAb、TmAb、TPOAb、TsAb、Tg 甲状旁腺激素、降钙素、骨钙素等 胰岛素、胰高血糖素、C肽 肾上腺及有关激素：皮质醇、醛固酮、ACTH等 性腺及生殖系统： 垂体激素：LH、FSH、PRL 性腺激素：E2、E3、睾酮、孕酮 生殖激素：胎盘催乳素、绒毛膜促性腺激素等 心血管系统： 心钠素、肌红蛋白、地高辛、肾素、血管紧张素、内皮素 神经系统： β内啡肽、生长激素、神经元特异烯醇酶(NSE) 血液系统： 红细胞生成素、铁蛋白、血栓素、前列腺素 消化系统： CEA、AFP、乙型肝炎抗原及抗体、肝胆酸、胃泌素、胃动素等 泌尿系统： β2-MG、尿白蛋白、TH糖蛋白、分泌型免疫球蛋白A(SIgA) 肿瘤疾病及其它： CEA、CA-50、CA-199、CA-125、CA-153、前列腺特异性抗原(PSA)、前列腺酸性磷酸酶(PAP)、铁蛋白、肿瘤坏死因子、SOD等。 国内常用的体外放射分析技术检测项目及其临床意义一览表 图像前期处理与后期制作：李芳巍 界面设计与多媒体制作：李芳巍 牡丹江医学院红旗医院 医学影像学院核医学教研室 一、竞争性蛋白质结合分析法(Competitive Protein Binding Assay；CPBA)　　本法不需要抗体，用血浆或其他生物组织中存在的特异结合蛋白质作为结合剂对某些物质进行微量分析。方法简便，但其灵敏度较RIA低。二、放射受体分析法(Radioreceptor Assay；RRA)　　用细胞受体蛋白作为结合剂，根据受体对与其配体(如激素、介质、药物)特异性结合的特点测定配体。本法所测定的值代表配体的生物活性，而不是免疫活性。三、放射酶学分析法(Radioenzymatic Assay；REA)　　以特异酶作为结合剂。如用蛋白激酶测定环核苷酸。四、放射微生物分析法　　以特异微生物作为结合剂。如用某种微生物测定叶酸 牡丹江医学院医学影像学院核医学教研室 《影像核医学》供影像诊断学专业用 实验核医学 Experimental nuclear medicine 体外分析技术 In Vitro Radioassay 制作人/主讲人：李芳巍 体外分析技术 In Vitro Radioassay 一、体外放射分析技术 1、放射免疫分析RIA 2、免疫放射分析IRMA 附：RIA和IRMA的区别 附：核射线探测相关知识 二、非放射免疫分析技术 1、化学发光免疫分析 2、时间分辨免疫分析 3、酶免分析技术 三、临床应用 体外放射分析(In Vitro Radioassay) 概念： 在体外条件下（In vitro）以放射性核素标记的配体为示踪剂 （Tracer），以结合反应为基础（Base），以放射性测量为定量手段（Means），对微量生物活性物质进行定量分析（Quantitative analysis） 一类分析方法的总称（General name） 。 分类： 按照抗原－抗体结合反应为基础分为：1、放射免疫分析Radioimmunoassay ; RIA2、免疫放射分析Immunoradiometric Assay ；IRMA 按照是否竞争结合分为：1、Competive binding analysis 放射免疫分析、放射受体分析、蛋白质竞争结合分析、放射酶促分析等。2、Non-competive binding analysis 免疫放射分析、受体放射分析、酶的放射化学测定、酶的激活剂或抑制剂测定法等。 近几年配体结合分析所用的示踪技术，从放射性技术发展到了非放射性技术，形成了非放射性配体结合分析法如：酶免疫分析、荧光免疫分析和化学发光免疫分析CLIA、电化学发光免疫分析ECLIA等。 放射免疫分析Radioimmunoassay（RIA) 基本原理： 放射免疫分析是竞争性体外放射分析原理的代表。在体外，以放射性核素标记抗原和非标记抗原，同时与适量的特异性抗体发生的竞争性免疫结合抑制反应。 RIA操作步骤： RIA操作步骤： 1、加样 2、温浴反应 3、分离B/F 4、放射性测量 5、绘制标准曲线，查找待测物浓度 Binding rate（％） Concentration of antigen(mol/L) Competive inhibition curve 必备条件： 三大试剂两大方法： 1、标准品抗原 standard antigen 2、标记抗原 l