联合用药对大鼠急性呼吸窘迫综合症的急救.ppt

1.1 目的： ARDS是各种肺内外致病因素引起急性呼吸衰竭的一种特殊类型，临床上以急性进行性呼吸困难、顽固性低氧血症为主要表现。虽然近几年通过大量的基础和临床研究，对ARDS的认识已逐步深化，但其发病机制尚未完全阐明，仍缺乏有效的诊治手段，病死率仍较高达35％～40%[Ⅰ]。已知其病理生理基础是多种炎症细胞及炎症介质参与的炎症反应，在细胞水平表现为炎症细胞浸润、固有细胞损伤[Ⅱ].且目前研究发现多种药物对ARDS有一定的治疗作用，如地塞米松[Ⅲ]、三磷酸腺苷一氯化镁[Ⅳ]、高氧液、1，6-二磷酸果糖、大黄、乌司他丁、硫辛酸等。但是以上药物的研究均局限在以单一药物为处理因素，而这是远远不能适应对复杂症状疾病ARDS的治疗，同时联合用药治疗ARDS越来越被临床医师所倚重。 1.2 意义：本研究侧重探讨联合用药对ARDS的急救治疗，通过从众多对ARDS治疗有效的药物中寻找出对ARDS的早期干预和治疗作用较强的药物，并以联合用药为指导方针，双双配伍研究治疗效果，以期得出更为合适临床急救ARDS的联合药物方法。 实验动物选用体重在1800～2200 g，家兔(由南方医科大学实验动物所提供)5只，雌雄不拘，随机分为：空白对照组，模型对照组: 试剂：20%乌拉坦；纯度为99％ 的油酸；三磷酸腺苷；氯化镁；地塞米松； 高氧液制备：采用输液用无菌气体瓶(氧)对等量基液进行溶氧活化处理，制备高氧液。操作过程按治疗仪使用说明进行，溶氧时间30 min，基液选用林格液，500 ml瓶装基液溶氧完毕后，随机抽查PaO2：达80—100 kPa。 器材: 家兔手术器材，家兔手术台，动静脉插管，全自动血气分析仪，恒温箱 5.1 模型制备： 用20％乌拉坦(5ml／kg)耳沿静脉注射麻醉，颈部正中切口，分离右颈总静脉并插管备用(管内含肝素生理盐水)。分离左颈总脉并插管备用(管内含肝素生理盐水)。动物准备完成后，模型组，A，B和C各组均经右颈总静脉缓慢(2 min内)注入油酸0．1 ml／kg，建立ARDS模型。空白组动物注入等量生理盐水。颈总动脉抽血测血气分析，动脉血氧分压(PaO2)60～65 mm Hg(1 mm Hg=0．133 kPa)时视为制模成功，否则不作为研究对象。 5.2药物救治： 5.3 指标监测准备 （1）分别于建模前（0min），30min，60min，120min收取动脉血进行血气分析，观察PH、PaO2、PaCO2等指标， (2)最后一次血样采集完成后，放血处死动物。立即开胸取肺，立即进行大体观察并详细记录情况，其后：右肺下叶同一部位1 cm x 1 cm x1 cm大小肺组织以10％中性甲醛固定送病理检查，HE染色；其余右肺冰浴下制成10％肺组织匀浆，离心取上清液，免疫组化法测定肺组织炎症反应指标丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD))；左肺称湿重后将其置于95°C烤箱(恒温箱)烤48 h，再称量肺干重，分别计算肺体质量比值、肺组织含水量(肺毛细血管通透性指标)和肺湿/干（W/D）比重，三者计算公式为：肺体质量比值=全肺湿重／体重x 100％，肺组织含水量=(左肺湿重一左肺干重)／左肺湿重×100％，肺湿/干（W/D）比重=肺湿重/肺干重。 (3) 肺组织病理切片观察：采用Smith评分法对肺水肿、肺泡及间质炎症、肺泡及间质出血、肺不张和透明膜形成分别进行0～4分半定量分析。无损伤为0分；病变范围25％ 为1分；病变范围25％ ～50％为2分；病变范围50％ ～75％ 为3分；病变满视野为4分；总肺损伤评分为上述各项之和。每只动物观察10个高倍视野(×400)，取其平均值。 5.4 收集数据进行统计学分析： 数据以均数±标准差表示，使用ＳＰＳＳ １１.０ 统计软件进行统计学分析，多组均数的比较采用单因素方差分析。 P ＜０.０５ 为差异有统计学意义。 Ⅰ 1Ｒｕｂｅｎｆｅｌｄ ＧＤ， Ｈｅｒｒｉｄｇｅ ＭＳ.Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｏｕｔｃｏｍｅｓ ｏｆ ａｃｕｔｅｌｕｎｇ ｉｎｊｕｒｙ［Ｊ］.Ｃｈｅｓｔ，２００７，１３１（２）：５５４ －５６２. Ⅱ韩伟，周新，朱光发.ＮＦ －κＢ 与细胞凋亡在ＡＲＤＳ 中的作用及其相互关系［Ｊ］.临床肺科杂志，２００２，７（３）：４５ －４７. Ⅲ 高婧，梁显泉. 地塞米松对黄磷吸人致急性肺损伤大鼠的治疗作用［Ｊ］.中国危重病急救医学，2007，21（11）：688-689. Ⅳ 安昌善， 朴红梅，金明根，夏书香. 中国急救医学［Ｊ］.1999,19(9):528-529.? Ⅴ 王松，许诚，舒丹，段钢，何清，彭建明，洪丰. 高氧液对油酸型急性呼吸窘迫综合征治疗作用机制的实验研究［Ｊ］. 中华实验和临床感染病杂志（电子