艾滋病哨点监测采样及检测方案.pptVIP

艾滋病哨点监测样品采集及实验室检测 江苏省疾病预防控制中心 徐晓琴 2012.3.20 艾滋病检测实验室 检测实验室：有资质的HIV检测实验室 应符合二级生物安全实验室（BSL-2）要求 血清学实验室或检测区域应分为清洁区、半污染区和污染区 掌握原则、灵活运用；发挥资源、联合检测； 建筑条件是基础、安全意识是关键 样品的采集和处理 为样品制定唯一性编码，保证其唯一性、可溯源性。 应使用专门的样品记录本或登记表记录样品及信息。 采集抗凝血时，建议用EDTA-K2（K3）、枸橼酸钠的抗凝管，不用肝素抗凝管。 血浆 1500-3000r/min离心15min，吸上层血浆。 血清 室温自然放置1-2h，待血液凝固、血块收缩后1500-3000r/min离心15min，吸上层血清。 淋巴细胞富集液 1500-3000r/min离心15min，吸取血浆层下的淋巴细胞富集液。 样品的保存 用于抗体检测的血清或血浆样品，短期（1周）内进行检测的可存放于2～8℃，一周以上应存放于-20℃以下。 用于核酸检测的血浆和血细胞样品4天内进行检测的可存放于4℃，3个月以内应存放于-20℃以下，3个月以上应置于-70℃以下。 艾滋病检测筛查实验室检测的筛查阳性样品应及时送确证实验室，筛查阴性样品，可根据具体需要决定保存时间。 样品的运送和接收 实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送全血。 血清和血浆样品应在2?8℃条件下由专人运送。 含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的、穿戴防护衣的工作人员打开，用后的包裹应进行消毒。 核对样品与送检单，检查样品管有无破损和溢漏，如发现溢漏，对样品管和盛器消毒并做好相应处理。 运送感染性材料必须有记录。 接收样品时应填写样品接收单。 筛查试验呈阳性反应样品的转送 需要核对身份，补充个人信息（如真实姓名和身份证号码） 采集第二份血样。 样品 + 送检单，送当地艾滋病筛查中心实验室（或确证实验室）待检。 哨点监测中样品的采集和处理 哨点样品的采集--抗凝血样品 编码：将调查对象编号标签贴在真空采血管上 （抗凝管建议使用EDTA抗凝剂）。 样品量：抽取每名调查对象抗凝静脉血5-8ml。 采样方法：用真空采血器（或一次性注射器）抽取静脉血至真空采血管中，反复轻摇混匀（来回轻轻颠倒7-8次）。 哨点样品的分装 样品分装：将血液静置20－30分钟或3000转15分钟离心后用一次性移液管（或加样枪）小心将血浆均分至3支样品冻存管，1管用于哨点各指标检测，另2管冻存待用；最好留1管淋巴细胞富集液 （注意：在24小时内对标本进行处理以防标本溶血）。 样品编码：所有样品按照性艾中心的统一要求进行唯一性编码----12位哨点编码。 哨点样品的保存 分装的3管血浆管和1管淋巴细胞富集液或剩余的血细胞全部冻存于-20度备用。 所有样品至少保存至调查结束后12个月。 保存和运送由专人负责，做好登记，保证生物安全。 采样中的生物安全 所有的血液、血清、血浆，均应视为有潜在传染性，都应以安全的方式进行操作。 采血时一定要注意安全，采血用一次性注射器，谨慎操作，防止发生刺伤皮肤和造成外界污染。 重点关注： 右侧划为污染区，左侧为洁净区 将针头弃入专用容器内，并将一次性纸垫等放入垃圾桶，绝对禁止用手卸下针头 哨点监测中的检测 哨点检测 采用匿名无关联（不出具个体检测报告）或实名有关联（出具个体检测报告）策略检测HIV抗体、梅毒抗体、 HCV抗体。 哨点检测 HIV抗体、梅毒、HCV抗体检测及感染状态判定 执行哨点监测工作的实验室必须是依据《江苏省艾滋病检测工作管理办法》验收合格的艾滋病检测实验室。 HIV抗体检测程序 1、初筛：所有样品使用酶免试剂（ELISA-1）进行筛查，结果阴性者判为阴性，不再进行复检，结果阳性者进入复检程序。 2、复检：所有初筛阳性的样品使用另一种不同原理或厂家的酶免试剂(ELISA-2)进行复检，两次检测结果均呈阳性时，即可判定HIV抗体阳性，用于监测结果的报告。复检结果如为阴性，则判为阴性结果。 HIV抗体检测 以监测为目的的检测，所有监测对象均报告HIV抗体两次ELISA检测结果。 如需将检测结果通知本人，HIV抗体阳性结果的判断应符合《全国艾滋病检测技术规范（2009年版）》相关要求。 如对复检阳性者进行了确诊试验，则同时报告两次ELISA检测结果和确证实验结果。 HIV抗体检测的要点 根据目的选择检测方法及检测策略。 严格遵守实验室标准操作程序（SOP）。 注意防止样品间交叉污染。 注意安全防护。 严防张冠李戴。 梅毒检测 1、初筛：采用酶联免疫吸附试验（ELIS