第十六章 抗生素类药物分析PPT课件.ppt

巴龙霉素 D-葡萄糖胺+脱氧链霉胺+D-核糖+巴龙霉糖 巴龙胺 苷元 巴龙二糖胺 糖 庆大霉素 糖 苷元 绛红糖胺 + 脱氧链霉胺 + 加洛糖胺 糖 绛红糖胺 紫素胺 2-脱氧链霉胺 加洛糖胺 N-甲基-3- 去氧-4-甲 基戊糖胺 庆大霉素C复合物 庆大霉素C1 R=H R1、R2=CH3 庆大霉素C2 R=R2=H R1=CH3 庆大霉素C1a R、R1、R2=H 庆大霉素C2a R=CH3 R1= R2=H 　庆大霉素C2b R=R1=H R2=CH3 一、 结构与性质 多与硫酸成盐 链霉素 3个 庆大霉素 5个 碱性中心 碱性 （一） 水溶性 溶解性 （二） 链霉素 pH5～7.5 庆大霉素 pH2～12 稳定 稳定性 （四） UV （三） 坂口反应 N-甲基葡萄 糖胺反应 麦芽酚反应 二、 鉴别 茚三酮反应 （一） △ 羟基胺结构 （2）Molisch反应 具有五碳糖或六碳糖的氨基糖苷类抗生素经酸水解后，在盐酸作用下脱水生成糠醛或羟甲基糠醛，加入α –萘酚（红紫色）或蒽酮（蓝紫色） 红紫色 （3）Elson-Morgan反应 水解产生的N-甲基-L-葡萄糖胺在碱性溶液中与乙酰丙酮合成吡咯衍生物，再与对二甲氨基苯甲醛的酸性醇溶液反应，生成樱桃红色缩合物。 蓝紫色 （4）麦芽酚反应－链霉素的特征反应 链霉素水解得到的链霉糖经分子重排使环扩大形成六元环，然后消除N-甲基葡萄糖胺，再消除链霉胍，生成α-甲基-β-羟基-γ-吡喃酮（麦芽酚），该化合物与Fe3+在弱酸性溶液中形成红紫色配位化合物。 紫红 麦芽酚 （5）坂口反应－链霉胍的特有反应 向链霉素的水解产物链霉胍与NaBrO2反应得产物1；8-羟基喹啉也和NaBrO2反应得产物2。产物1和产物2再相互作用生成橙红色化合物。 （八）色谱法 （1）TLC法：硫酸庆大霉素的鉴别 点样：供试液：展开、凉干、碘蒸气中显色 对照液 判断：供试液与对照液所显斑点的颜色与位 置应一致。 点样：供试液 对照液①：硫酸链霉素标准品 对照液②：硫酸链霉素标准品 + 硫酸 新霉素标准品+ 硫酸卡那霉素标准品 判定法：供试液中主斑点的位置、颜色、大小 应与对照液① 相同， 对照液②应显示分离清晰的3个斑点 否则试验无效。（2）HPLC法：硫酸庆大霉素的鉴别 比较供试液与对照液各组分的保留时间。 （四）β–内酰胺环的不稳定性 水溶液 不稳定 干燥纯净 稳定 不稳定性因素 四元环张力大 酰胺键易水解 含水量 纯度 青霉素类 某些氧化剂 酸、碱、青霉素酶 （某些金属离子） （温度） 降解失效 （四）β–内酰胺环 与含水量和纯度密切相关 青霉素的降解途径 青霉素的降解产物 青霉噻唑酸－青霉素酶 青霉酸－强酸性环境 青霉烯酸－弱酸性环境 青霉醛－强酸性-加热 青霉胺－强酸性-加热/青霉素酶-重金属 降解产物 二、鉴别反应 （一）显色反应 1、异羟肟酸铁反应 2. 茚三酮反应 α-氨基 ?-氨基 茚三酮 ? 蓝紫色 3. 双缩脲反应 似肽键 （开环分解） ?- 内酰胺类 碱性酒石酸铜 紫 4. 与重氮苯磺酸反应 橙黄色 重氮苯磺酸 - - 5 6 OH H C （偶合） 酚羟基 头孢哌酮 1. K+、Na+的火焰反应 （二）各种盐的反应 焰色→鲜黄色 + 醋酸氧铀锌→↓黄 Na+ 焰色→紫色 + 0.1%四苯硼钠 →↓白 K+ 2. 沉淀反应（青霉素盐） 遇酸→↓ 在过量HCl或 有机溶剂中溶解 白 青霉素 青霉素钠　 青霉素钾　 + H+ 3. 重氮化 - 偶合反应 重氮化-偶合反应 芳伯氨基 光谱法 （三） 1、 UV法 样品、分解产物 Cu2+ 头孢氨苄 λmax = 262nm 青霉素V钠 A280nm/A264nm = 1.30～1.50 2、 IR法 3180cm-1 ?N-H β–内酰胺