分子生物学综合大实验.docVIP

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2018-06-24 发布于河南
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分子生物学综合大实验

分子生物学综合大实验 ----自由基对质粒氧化损伤的观察指导教师：李发荣老师学生：刘宽、霍明秀、陈露、徐保丽、刘静专业：生物技术班级： 09生物技术实验目的复习并掌握质粒的提取方法；设置不同梯度氧化剂，对比其对质粒的损伤程度；观察自由基对质粒的氧化损伤，分析自由基对氧化质粒损伤的分子机制。实验原理 1. 质粒：细菌细胞内一种自我复制的环状双链DNA分子，能稳定地独立存在于染色体外，并传递到子代，一般不整合到宿主染色体上。利用质粒DNA与染色体DNA分子大小不同和性质的差异性进行的。染色体DNA比质粒DNA大得多，且是线状分子，经加热或碱处理后容易变性并产生沉淀，即使冷却或碱性条件被中和后也不可能复性，与变性蛋白质及细胞碎片一起沉淀析出。质粒DNA是共价结合的环状分子，不会因加热或碱处理等被折开，加热冷却或恢复中性PH后又呈天然构型，溶解在溶液中。这样通过加热或碱处理后又PH中和，再用沉淀离心的方法就可把质粒DNA提取出来。