P21活化激酶在肿瘤中的作用..ppt

* * 段培鲁 D201002026 目录 （一）P21 活化激酶的介绍 （二）P21 活化激酶的活化机制 1、Ⅰ类PAK活化机制 2、Ⅱ类PAK活化机制 （三）PAK在肿瘤中的作用 （四）总结 一、P21 活化激酶的介绍 P21活化激酶(p21-activated kinase，PAK)为一类进化上保守的丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶，能与鸟苷三磷酸酶 、Cdc42 和 Rac相互作用，作为小G蛋白Rho家族Cdc42和Rac1下游靶蛋白。 PAK家族共有6个家庭成员PAK1~PAK6，根据PAK结构和调控分为两个主要的类型：I类 (PAK1、PAK2 和 PAK3) 和 II类 (PAK4、PAK5 和 PAK6) 。 PAK家族的激酶都包含有一个高度保守的激酶结构域，同时N末端有个调控序列，这些调控序列的特征主要包含：3个保守的富含脯氨酸的基序、一个95%同源性的P21结合区域和在激酶结构域前的一段高度酸性氨基酸序列。 P21结合结构域（PBD）又称CRIB基序，位于第二个和第三个聚脯氨酸基序之间，是由90个相似的氨基酸组成，为GTPase提供结合的位点。 PAK上存在着7个磷酸化位点：S21、S57、S144、S149、S199、S204和T423。 Figure1(a): PAK domain structure 二、P21活化激酶的活化机制 1、Ⅰ类PAK活化机制 2、Ⅱ类PAK活化机制 1、Ⅰ类PAK活化机制 （1）、 GTPase依赖的活化机制 I类PAK可选择性结合Rho家族GTPase； Rac和Cdc42可作为膜结合蛋白，可结合PAKl-PAK3后定位到细胞膜，在质膜内被鞘磷脂及PDKl所活化； PAK被激活后并不需要GTPase的继续结合来维持其活性。 （2）非GTPase依赖的活化机制 PAK可被限制性蛋白酶消化，产生有激酶活性的C末端； 另外，PAKl是通过PXXP区域与Nck、Grb2等含有SH3结构域的接头蛋白相互作用，将PAK引导到细胞膜上，被受体酪氨酸激酶所活化。 2、II类PAK的活化机制 II类PAK同样可结合Cdc42／Rac 1，却不能被活化； Ⅱ类PAK也可通过不同于I类PAK的分子内的方式调节活性。 PAK4／PAK5 /PAK6的活化与MKK6(MAP kinase kinase 6)／p38 MAPK信号通路密切相关。 MKK6可直接磷酸化PAK6的TPY序列中Tyr566位点；p38 MAPK磷酸化PAK6激酶域外的Serl65位点；另外PAK6在Ser560位点自磷酸化等均可导致PAK6的活化 。 三、PAK在肿瘤中的作用 1、PAK1在乳腺癌/大肠癌中的表达与意义 2、PAK4在胃癌中的作用 3、PAK6在前列腺癌中的作用 1、PAK1在乳腺癌/大肠癌中的表达与意义 非受体酪氨酸激酶Etk通过与PAKl的相互作用控制着细胞的增生、乳腺肿瘤细胞的非锚定依赖性和恶性增生。PAKl可以通过磷酸化下游因子保护癌细胞免于凋亡，促进癌症表型；而且PAKl介导的磷酸化merlin使肿瘤抑制基因NF2失活，导致肿瘤的扩散和侵袭。在肿瘤细胞中，PAKl信号调节的异常会影响DNA多倍体的生成，染色体异常等。另外PAKl通过ERα上调cyclin D1的表达，与乳腺癌的进程相关。 2、PAK4在胃癌中的作用 研究方法：免疫组化和Westernbloting法 机制：PAK4蛋白可抑制caspase-8的活性，从而抑制体内凋亡过程启动。同时，PAK4蛋白可活化其下游核因子-KB、细胞外信号调节激酶等分子，促进细胞生存。PAK4蛋白还可通过与肿瘤相关分子，如丝氨酸激酶、Cdc42、整合蛋白avl35、肝细胞生长因子等相互作用，参与肿瘤细胞的发生发展及侵袭转移。正是PAK4蛋白的异常高表达可能引起肿瘤的侵袭转移，通过阻断PAK4信号通路，有可能抑制肿瘤的进展。 3、PAK6在前列腺癌中的作用 PAK6能够与雌激素受体(estrogen-receptor，ER)及雄性激素受体AR相互作用并抑制ER和AR的转录激活作用。 PAK6能结合到AR，激活的PAK6能抑制已受刺激的AR的核转位。PAK6可与AR的LBD结合并与之共定位于细胞核内，抑制AR介导的基因转录过程，对前列腺癌细胞的增殖起抑制作用。由于AR和配体的出现，代表着PAK6从胞浆聚集到细胞核。 PAK6抑制AR介导的转录，这种抑制是PAK6结合到AR上阻止AR结合转录激活剂结合的结果。 PAK6与核受体的相互作用表明核激素受体与小GTP酶介导的信号传递途径有交互作用，提示PAK6可能参与前列腺癌和乳