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猪伪狂犬病野毒抗体不同检测单位比对试验 　　摘要：在种猪群伪狂犬病野毒（gE）抗体监测的第一阶段，进行了不同检测单位的比对试验。对来自71个个体间隔1周的两次血清样本进行检测，2个检测机构之间的gE抗体阳性符合率分别为35.71%、45.45%，总体检测符合率分别为87.32%、91.55%；2个检测机构各自的gE抗体阳性符合率分别为40.00%、75.00%，总体检测符合率分别为87.32%、97.18%。表明在猪群进行伪狂犬病野毒感染鉴定的初期，有必要对检测单位进行筛选。 　　关键词：伪狂犬病毒（Pseudorabies virus，PRV）；野毒抗体；对比试验 　　中图分类号：S828 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）24-6124-02 　　伪狂犬病是由伪狂犬病毒（Pseudorabies virus， PRV）引起的多种动物共患传染病，以发热、奇痒（猪除外）及脑脊髓炎为主要症状[1]。猪感染伪狂犬病毒后主要表现为母猪流产、死胎等繁殖障碍[2]，哺乳仔猪尖叫、腹泻和转圈、大量发病死亡，保育猪神经症状，育肥猪呼吸道症状、生长发育缓慢。猪伪狂犬病对养猪生产的影响很大，给中国的养猪业特别是集约化养猪造成了巨大经济损失[3]。 　　国家生猪产业技术体系疫病控制研究室“十二五”重点任务“伪狂犬病、猪瘟净化与蓝耳病综合防控”中要求，在伪狂犬病净化任务结束时，参与试验的种猪场（或生产线）应全部为野毒gpI（gE）抗体阴性。根除和净化措施分为普查、强化免疫控制、检测淘汰、全群清群与引种、监测认证与维持等5个阶段，在实施过程中，检测结果将影响净化的具体方案和实施细节。本研究在种猪群伪狂犬病野毒感染状况监测的第一阶段，进行了猪伪狂犬病野毒抗体不同检测单位检测结果的比对试验，现将试验情况及建议报告如下，以供养猪生产中猪群伪狂犬病等疾病检测、净化时参考。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验动物与试剂 　　试验猪为湖北省农业科学院实验原种猪育种场基础母猪520头，种公猪19头，自繁自养。gE基因缺失弱毒疫苗（K-61株自然缺失基因苗），德国柏林格茵格翰公司。后备猪在70日龄和配种前各免疫1次，种母猪每年普免3次，普免时避免在分娩前7 d内接种，以减少接种应激对分娩的影响，并在母猪分娩后补免；??猪采用集中普免的方式，每年免疫3次。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 血样采集 用保定器套住种猪上颚，用20 mL一次性注射器前腔静脉采血。母猪按群体数量10%的比例进行采样，种公猪进行全群采样。 　　1.2.2 样品制备 取编好号的血样离心管放入离心机，4 000 r/min离心2～5 min，将上层血清用吸管慢慢吸出，每个样品分别放入2支离心管，加盖编号登记，全部样品随机分为2个平行组。 　　1.2.3 样品送检 将2组平行样品分别送至具备检测与分析条件的2家专业检测机构（以下分别简称甲单位、乙单位），独立检测样品中伪狂犬病野毒感染情况。 　　1.2.4 检测方法 采用伪狂犬病野毒抗体检测试剂盒（gE-ELISA试剂盒，IDEXX公司）进行检测。 　　1.2.5 伪狂犬病gE抗体判定标准 S/N≤0.60，判定为阳性；0.600.70，判定为阴性。 　　2 结果与分析 　　由表1可知，甲单位gE抗体阳性猪为12头，阳性率为16.90%（12/71），乙单位gE抗体阳性猪为7头，阳性率为9.86%（7/71），两单位的共同阳性猪为5头，阳性符合率为35.71%（5/14）。两单位的共同非阳性猪为57头，共同阳性猪为5头，总体符合率为87.32%（62/71）。 　　由表2可知，甲单位gE抗体阳性猪为9头，阳性率为12.68%（9/71），乙单位gE抗体阳性猪为7头，阳性率为9.86%（7/71），两单位的共同阳性猪为5头，阳性符合率为45.45%（5/11）。两单位的共同非阳性猪为60头，共同阳性猪为5头，总体符合率为91.55%（65/71）。 　　由表3和表4可知，甲单位两次gE抗体检测中共同阳性猪为6头，共同非阳性猪为56头，两次检测阳性符合率为40.00%（6/15），总体符合率为87.32%（62/71）。乙单位两次gE抗体检测中共同阳性猪为6头，共同非阳性猪为63头，两次检测阳性符合率为75.00%（6/8），总体符合率为97.18%（69/71）。 　　3 小结与讨论 　　1）用具有糖蛋白gE基因缺失背景的疫苗进行猪伪狂犬病免疫，用gE-ELISA试剂盒能区分疫苗接种猪和野毒感染猪，且敏感性很高[4]。2个检测机构之间，两次检出gE抗体阳性样本的共同符合率分别为35.71%、45.45%，显示PRV gE抗体S/N值存在着偏差，但两单位两次检测的总体符合率分别为87