钼中毒对卡拉库尔羊血清中SOD、CP、XOD和POD活性影响.docVIP

钼中毒对卡拉库尔羊血清中SOD、CP、XOD和POD活性影响 　　摘要：将10只体重为（21±3）kg的健康卡拉库尔羊随机分成2组，每组5只，试验组按每天30 mg/kg体重灌服钼酸铵，对照组灌服相同体积的去离子水，每隔15 d检测血清中超氧化物歧化酶（SOD）、铜蓝蛋白（CP）、黄嘌呤氧化酶（XOD）和过氧化物酶（POD）的活性。结果显示，试验组的血清中SOD、CP、XOD、POD活性显著低于对照组（P﹤0.05）。因此，血清中SOD、XOD、CP、POD活性可作为绵羊钼中毒诊断的敏感指标。 　　关键词：卡拉库尔羊；钼中毒；铜酶；钼酶 　　中图分类号：S826.8+9 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）18-4458-03 　　钼（Molybdenum，Mo）是人和动物的必需微量元素，是动物体内多种酶的组成成分，对维持机体生命活动具有极其重要的作用，但人和动物对钼的需求量均小于1 mg/kg[1]，且反刍动物对钼特别敏感，过量食入则会导致钼中毒。据研究表明，高钼引起的动物中毒主要表现为明显的铜缺乏症状[2]，故测定血液中相关酶活的变化，对动物钼中毒早期诊断具有重要意义。李三强等[3]通过高钼饮水复制了耕牛钼中毒的病理模型，并测定了超氧化物歧化酶（SOD）和黄嘌呤氧化酶（XOD）等的活性，为耕牛钼中毒的诊断提供了依据。为此，本试验通过构建卡拉库尔羊钼中毒的动物模型，观察卡拉库尔羊钼中毒后血清中SOD、铜蓝蛋白（CP）、XOD和过氧化物酶（POD）活性变化规律，以期为动物钼中毒的诊断、治疗和环境污染的控制提供试验依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验动物分组及饲养管理 　　试验动物为10只（21±3） kg的卡拉库尔羊，健康状况良好。试验羊集体驱虫，饲喂相同基础日粮，预饲期20 d。预饲期后根据体重相近的原则将试验动物随机分成2组，即试验组和对照组，每组5只，分栏饲养。试验期为60 d，其饲喂方式相同，均以青贮玉米为主，分早、晚两次添加，中午补饲青干草，除此之外每晚添加精料200 g/只。试验组每天以30 mg/kg剂量灌服钼酸铵（NH4）2MoO4，对照组灌服相同体积的去离子水。 　　1.2 主要试剂 　　超氧化物歧化酶（SOD）、铜蓝蛋白（CP）、黄嘌呤氧化酶（XOD）、过氧化物酶（POD）试剂盒，均购自南京建成生物工程研???所；钼酸铵（分析纯），购自淄博市三营化工有限公司。 　　1.3 主要仪器 　　721型可见光分光光度计（上海第三分析仪器厂），TDL-5-A型台式离心机（上海安亭科学仪器厂），HH-W420型三用恒温水箱（江苏省金坛市医疗仪器厂），VORTEX-5型旋窝振荡器（海门市其林贝尔仪器制造有限公司）。 　　1.4 样本采集与处理 　　分别在试验期的0、15、30、45、60 d早上9：30～10：30空腹采血，血液采集后先于37 ℃恒温水浴30 min，之后以3 000 r/min离心30 min，分离血清后置于4 ℃冰箱内，待测。 　　1.5 样品的测定方法 　　SOD采用羟胺法测定，CP、XOD和POD活性均采用比色法测定，操作步骤及方法严格按说明书进行。 　　1.6 统计方法 　　试验数据用SPSS 17.0软件进行t检验，结果以x±s表示。 　　2 结果与分析 　　2.1 临床症状 　　在试验开始15 d后，试验组个别羊出现采食量减少、精神沉郁等症状，此后随着试验天数的增加，试验组全部羊逐渐出现上述症状。与此同时，眼圈周围的毛色开始逐渐变白，发生严重的持续性腹泻、粪便稀薄并带有气泡，有泥炭味，个别羊发生共济失调；食欲不振，贫血，消瘦；被毛粗糙，色泽变浅，可视黏膜苍白。 　　2.2 钼中毒对卡拉库尔羊血清中SOD活性的影响 　　由表1可知，试验组和对照组血清SOD活性在0 d差异不显著（P0.05），但在15、30、45、60 d时差异显著（P0.05），但在45、60 d时差异显著（P0.05），但在30、45、60 d时差异显著（P 　　3.2 钼对卡拉库尔羊血清中XOD、POD活性的影响 　　到目前为止，已知钼的生理功能在于通过各种酶的活性来实现，其存在于所有生物体。XOD作为机体的重要酶之一，对体内嘌呤化合物的氧化代谢及最后形成尿酸起主要的催化作用，对机体代谢和有害物质的清除有重要作用[10]。本试验结果表明，血清中XOD活性随着钼在机体内的蓄积呈显著降低，过量的钼抑制了XOD的活性，从而影响细胞的正常代谢，这与程才才等[11]研究结果一致。本试验中POD活性随钼中毒的加重而显著下降。POD是机体重要的酶，也是机体内主要抗氧化酶系之一，它协同SOD一起分解体内自由基代谢产物H2O2，使其变成H2O[12]。适量的钼可