程序性细胞死亡与细胞衰老（二）.pptVIP

第十三章 程序性细胞死亡与细胞衰老（二） 复习 1 概念 程序性细胞死亡（programmd cell death．PCD）：体内外因素诱导下，由基因严格调控而发生的一种生理性细胞自杀过程。 细胞凋亡：由体内外因素触发细胞内预存的死亡程序而导致的细胞死亡过程； 自噬小体：细胞中出现大的双层膜包裹的自噬泡，称为自噬小体（autophagosome)； 动物细胞凋亡过程中的形态学变化 （1）凋亡的起始 细胞膜变化： 细胞凋亡的特征是细胞首先变圆,随即与邻周细胞脱离,失去微绒毛,细胞膜完整；微绒毛、细胞突起和细胞表面皱褶消失；胞膜迅速发生空泡化（blebbing），内质网不断扩张并与胞膜融合，形成膜表面的芽状突起，称为出芽（budding）。 细胞质变化： 细胞质浓缩；线粒体完整，但是变大； 核糖体从内质网上脱落； 内质网囊腔扩张呈泡状并与细胞膜融合。 细胞核变化： 核染色质密度增高呈半月形,并凝聚在核膜周边,核仁裂解。 整个过程持续数分钟。 （2）凋亡小体的形成 细胞膜内陷将细胞自行分割为多个外有膜包裹、内涵物不外泄的细胞凋亡小体。 （3）凋亡小体被清除 被吞噬细胞或邻周细胞所识别、吞噬,或自然脱落而离开生物。不引起炎症反应和次级损伤。 细胞凋亡的生理病理意义： ①确保正常发育、生长：清除多余的、失去功能价值的细胞（指趾间组织细胞） ②维持内环境稳定：清除受损突变细胞，自身反应细胞，衰老细胞 ③发挥积极的防御功能：感染病毒细胞凋亡，阻止病毒复制 细胞凋亡异常与疾病 细胞凋亡的检测 随着研究技术的提高和对凋亡的认识不断深入，检测凋亡的方法已从细胞、染色质到分子水平日趋完善和成熟。 形态学检测 DNA凝胶电泳法 TUNEL法检测 凋亡酶学分析 凋亡相关蛋白分析 流式细胞分析 Caspase 依赖性细胞凋亡 途径主要有两条： 通过胞外死亡受体信号激活细胞内的凋亡酶caspase （外源途径）； 通过线粒体释放凋亡酶激活因子激活caspase（内源途径）。 内源途径：线粒体介导的细胞凋亡 内质网介导的细胞凋亡 细胞中其他细胞器：核、高尔基体、溶酶体和内质网等均可能启动细胞凋亡 caspase非依赖性途径 caspase的抑制不能阻断细胞凋亡的发生，表明细胞凋亡还以不依赖于caspase 的方式发生。不依赖caspase的细胞凋亡涉及到Bax诱导的细胞死亡，也涉及到其他蛋白酶，如钙蛋白酶、蛋白酶体及丝氨酸蛋白酶诱导的细胞死亡。 复杂的信号途径精细地调控着细胞凋亡过程 细胞凋亡与坏死的比较： 坏死 凋亡 性质 诱导因素 生化特点 形态变化 DNA电泳 炎症反应 凋亡小体基因调控 病理性、非特异性 强烈刺激，随机发生 被动过程，无新蛋白合成 细胞肿胀、细胞结构全面溶解、破坏 弥散性降解，电泳呈均一DNA片状 溶酶体破裂，局部炎症反应 无 无 生理性或病理性，特异性 较弱刺激，非随机发生 主动过程，有新蛋白合成 胞膜及细胞器相对完整细胞 皱缩，核固缩 DNA片段化（180-200bp）电泳呈梯状条带 溶酶体相对完整，局部无炎反应 有 有 第二节 细胞衰老(cell aging, cell senescence) 1. 细胞衰老的概念 一般指的是复制衰老，体外培养的正常细胞经过有限次数分裂以后，停止分裂，细胞形态和生理代谢活动发生显著改变的过程。这个改变过程即老化过程。 19世纪 魏斯曼 学说：有机体终究会死亡，因为组织不可能永远能够自我更新，细胞凭借分裂来增加数量的能力是有限的。 20世纪40-50年代Carrel和Ebeling 学说：细胞不死 通过培养鸡心脏细胞无限增殖，使细胞不死的观点卷土重来。后来，L系小鼠细胞和HeLa细胞系的建立，更巩固了这种观点。 Hayflick界限（Hayflick limitation)细胞增殖能力和寿命是有限的 。 细胞，至少是培养的细胞，不是不死的，而是有一定的寿命；它们的增殖能力不是无限的，而是有一定的界限，这就是著名Hayflick界限。 重点 二、细胞衰老的特征 （一）形态变化 1 细胞核变化： 在衰老变化中细胞核结构的最明显变化是核膜内折。电镜检测可见衰老细胞核形状不规则、内陷和断裂。在体内细胞中也观察到核膜的不同程度的内折，神经细胞尤为明显，这种内折随年龄增长而增加，最后可能导致核膜崩解。染色体固缩化是衰老细胞核中另一个重要变化。在衰老细胞中，细胞核固缩，还常常出现核内容物，核质染色加深，核的细致结构逐渐消失，核仁也发生明显的变化。 2 内质网的变化 在衰老细胞中，内质网排列变得无序，膜腔膨胀扩大甚至崩解，膜面上核糖体数量减少。 3 衰老过程中线粒体的变化