肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体47.ppt

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 何坚 人们一直都在寻找攻克恶性肿瘤的方法,但到目前为止仍然没有十分有效的治疗手段。三大传统疗法都具有不可忽视的局限性。所以,寻找具有生物活性的细胞毒性分子诱导肿瘤细胞凋亡逐渐成为肿瘤生物治疗领域关注的焦点。 1　TRAIL及其受体 1. 1　　肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand, TRAIL)或称凋亡素2配体(Apo2 ligand,Apo-2L), 是近几年发现的一个可诱导肿瘤细胞凋亡的TNF家族成员。 TRAIL最大的优点是它可以选择性诱导肿瘤细胞凋亡,但对正常细胞没有毒副作用。因此,TRAIL已经成为许多研究的热点,并有可能成为新一代的抗肿瘤药物。 1. 2　TRAIL的结构特点 1.3　TRAIL受体　 TRAIL是通过与其细胞膜受体结合发挥诱导凋亡作用的,目前已经发现了5种TRAIL受体,它们都可以与TRAIL发生特异性结合,并且不与其它细胞毒配体结合。 1.3.1　死亡受体 TRAIL-R1和TRAIL-R2均属于TNFR(TNFreceptor)基因超家族成员。它们分别具有一段死亡结构域(death domain,简称DD),与TRAIL结合后可诱导肿瘤细胞凋亡,故又被称作死亡受体。TRAIL-R1也称死亡受体4(death receptor-4,DR4), DR4属Ⅰ型跨膜蛋白，它的胞外区有两个半胱氨酸富集区(cysteine-rich domain, CRD),胞内有一段由70个氨基酸组成的死亡结构域。 TRAIL-R2也称死亡受体5(DR5), DR5也属Ⅰ型跨膜蛋白, 它的胞外和胞内区也分别含有两个半胱氨酸富集区及一段死亡结构域。DR5过表达可引起多种细胞发生凋亡,例如: Jurkat为TRAIL敏感细胞株,细胞表面DR5高水平表达,当用DR5的单克隆抗体(DR5mAb)与Jurkat细胞表面的DR5作用后,TRAIL对Jurkat细胞的杀伤功能几乎完全被阻断。 1.3.2诱骗受体 　TRAIL-R3和TRAIL-R4因为没有死亡结构域,或死亡结构域不完整,虽然可以与TRAIL结合,但不能传递死亡信号,无法诱导细胞凋亡,故被称为诱骗受体。这类受体可能在正常细胞抵制TRAIL的诱导凋亡作用中扮演重要角色。 TRAIL-R3也称诱骗受体-1 ( decoy receptor-1,DcR1)它是一个糖基磷脂酰肌醇(glycophos-phatidyl inosito,l GPI)锚定的细胞表面蛋白。DcR1与TRAIL亲和力较高,它有5个糖基化位点,去糖基化可以增强DcR1与TRAIL的亲和力。它在胞外区含有一段与死亡受体同源性很高的半胱氨酸富集区,不同点在于它没有胞内死亡结构域,因此可以与TRAIL结合但不能传递死亡信号。 TRAIL-R4也称DcR2,它是一个由386氨基酸编码的Ⅰ型跨膜蛋白, 与死亡受体相比,DcR2的C端缺少52个氨基酸,即胞内有一段不完整的死亡结构域,故也不能传递死亡信号。 1.3.3　OPG　 OPG(Osteoprotegerin)是近来发现的一种调节骨密度、细胞产生和分化的受体。OPG与TRAIL亲和力低,是TRAIL的一种特殊受体。OPG与TRAIL结合后可能会抑制TRAIL对细胞的凋亡作用。这种抑制作用可能是通过OPG竞争性抑制TRAIL与死亡受体的结合来实现的。最近的研究表明,TRAIL和OPG在血清中的表达水平可能与动脉粥样硬化和冠状动脉疾病有一定联系。 2　TRAIL的作用机制 2. 1　TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡的机制　TRAIL诱导细胞凋亡主要有两个途径: (1)半胱天冬酶(caspase)和死亡受体相关的细胞凋亡途径; (2)线粒体相关的细胞凋亡信号途径。TRAIL与其他TNF家族成员一样,可以诱导多种肿瘤细胞凋 亡,而且对抑癌基因p53突变造成的对放疗、化疗不敏感的肿瘤细胞也有较好的诱导凋亡的作用。 2.1.1　半胱天冬酶(caspase)和死亡受体相关的细胞凋亡途径 　TRAIL三聚体能诱发死亡受体DR4和DR5三聚体化。死亡受体一端通过胞外区的半胱氨酸富集区与TRAIL结合并被活化,另一端通过胞内区的死亡结构域与接头蛋白(adaptor pro-tein)C端的死亡结构域结合,接头蛋白再以其N端死亡效应域(DED)与半胱天冬蛋白酶原(pro-caspase)在末端的局部募集并串连结合,形成TRAIL-死亡受体-接头蛋白-pro-caspase死亡诱导信号复合物(DISC)， 促使pro-caspase自身水解成为有活 性的caspase-8。Caspase-8可以激活caspase级联