第七章 工业发酵染菌的防治课件.pptVIP

1，从染菌的规模来分析染菌原因 大批发酵罐染菌 ：空气系统 部分发酵罐(或罐组)染菌：前期可能是种子带杂菌，或灭菌不彻底，中后期则可能是中间补料系统或油管路系统发生问题所造成的 个别发酵罐连续染菌：设备问题(如阀门的渗漏或罐体腐蚀磨损)，设备的腐蚀磨损所引起的染菌会出现每批发酵的染菌时间向前推移的现象 个别发酵罐偶然染菌：原因比较复杂，因为各种染菌途径都可能引起。 2，从染菌的时间来分析 发酵早期染菌：种子带菌、培养基和设备灭菌不彻底、设备或管道有死角 中、后期染菌：中间补料、设备渗漏、操作不合理 3，从染菌的类型来分析 耐热性芽抱杆菌：死角或灭菌不彻底 球菌、酵母：可能是从蒸汽的冷凝水或空气中带来的 霉菌：灭菌不彻底或无菌操作不严格 固定化酵母连续发酵酒精染菌问题 第七章 染菌的防治 一、染菌的影响 所谓“杂菌”， 是指在发酵培养中侵入了有碍生产的其他微生物。发酵过程污染杂菌，会严重的影响生产，是发酵工业的致命伤。 造成大量原材料的浪费，在经济上造成巨大损失 影响产品外观及内在质量 扰乱生产秩序，破坏生产计划。 遇到连续染菌，特别在找不到染菌原因往往会影响人们的情绪和生产积极性。 1、染菌对不同产品发酵的影响 放线菌由于生长的最适pH为7左右，染细菌较多；霉菌生长pH为5左右，因此染酵母菌为多。 青霉素发酵染菌，绝大多数杂菌都能直接产生青霉素酶，另一些杂菌则可被青霉素诱导而产生青霉素酶。不论在发酵前期、中期或后期，染有能产生青霉素酶的杂菌，都能使青霉素迅速破坏。 链霉素、四环素、红霉素、卡那霉素等发酵染菌也会造成不同程度的危害。如杂菌大量消耗营养干扰生产菌的正常代谢；改变pH，降低产量。 疫苗生产危害很大。现在疫苗多采用深层培养，有些疫苗是不加提纯而直接使用的产品，在其深层培养过程中，一旦污染杂菌，不论死菌、活菌或内外毒素，都应全部废弃。因此，发酵罐容积越大，污染杂菌后的损失也越大。 （一）染菌对发酵的影响 2、污染不同种类和性质的微生物的影响 （1）污染噬菌体 噬菌体的感染力很强，传播蔓延迅速，也较难防治，故危害极大。污染噬菌体后，可使发酵产量大幅度下降，严重的造成断种，被迫停产。 （2）污染其它杂菌 有些杂菌会使生产菌自溶产生大量泡沫，即使添加消泡剂也无法控制逃液，影响发酵过程的通气搅拌。 有的杂菌会使发酵液发臭、发酸，致使pH下降，使不耐酸的产品破坏。特别是染芽孢杆菌，由于芽孢耐热，不易杀死，往往一次染菌后会反复染菌。 不同发酵对杂菌感染的敏感性不同 (1)青霉素和链霉素：细短杆菌的危害大； (2)四环素：对双球菌、芽孢杆菌和荚膜杆菌污染敏感； (3)柠檬酸：对青霉菌敏感； (4)核苷酸：对芽孢杆菌敏感 (5)氨基酸：对噬菌体敏感； 3、不同时间染菌对发酵的影响 污染时间是指用无菌检测方法确定的污染时间，不是杂菌窜入培养液的时间。 （1）种子培养期染菌。 由于接种量较小，生产菌生长一开始不占优势。此时防御杂菌能力低，容易污染杂菌，对发酵影响最大。如在此阶段染菌，应将种子液全部废弃。 （2）发酵前期染菌。发酵前期最易染菌，且危害极大。 原因 发酵前期菌量不很多，与杂菌没有竞争优势；且还未合成产物（抗生素）或产生很少，抵御杂菌能力弱。 措施 可以用降低培养温度，调整补料量，用酸碱调pH值，缩短培养周期等措施予以补救。如果前期染菌，且培养基养料消耗不多，可以重新灭菌，补加一些营养，重新接种再用。 （3）发酵中期染菌。 发酵中期染菌会严重干扰产生菌的代谢。杂菌大量产酸，培养液pH下降；糖、氮消耗快，发酵液发粘，菌丝自溶，产物分泌减少或停止，有时甚至会使已产生的产物分解。有时也会使发酵液发臭，产生大量泡沫。 措施 降温培养，减少补料，密切注意代谢变化情况。如果发酵单位到达一定水平可以提前放罐，或者抗生素生产中可以将高单位的发酵液输送一部分到染菌罐，抑制杂菌。 （4）发酵后期染菌。 发酵后期发酵液内已积累大量的产物（如果是抗生素），对杂菌有一定的抑制或杀灭能力。因此如果染菌不多，对生产影响不大。如果染菌严重，又破坏性较大，可以提前放罐。 1、发酵染菌对过滤的影响 染菌的发酵液一般发粘，菌体多数自溶，所以在发酵液过滤时不能或很难形成滤饼，导致过滤困难。 由于过滤困难，过滤时间拉长，影响发酵液储罐和过滤设备的周转使用，破坏了生产平衡。染菌发酵液还会因过滤困难而大幅度降低过滤收率，直接影响提炼总收率。 措施：加热、冷却、添加助滤剂等 2、发酵染菌对提炼的影响 染菌发酵液中含有比正常发酵液更多的水溶性蛋白和其它杂质。采用沉淀法，杂质污染产物。采用有机溶剂萃取的提炼工艺，则极易发生乳化，很难使水