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冲和凝胶有效成分体外透皮行为研究 　　[摘要] 冲和凝胶源自古方，可用于糖尿病足的治疗。该实验以芍药苷、蛇床子素为指标，考察冲和凝胶体外透皮特性，探索冲和凝胶透皮机制。实验采用Franz扩散池法，以大鼠腹皮为模型，用HPLC测定。实验筛选了接收液的种类，并比较冲和凝胶、冲和油膏内指标成分的透皮特性，考察药物累积透皮率、皮肤内滞留率以及皮肤外残率。结果显示，乙醇-生理盐水（2∶8）更适于作为接收液；冲和凝胶给药0.5 g，芍药苷、蛇床子素透皮速率分别为78.07，7.08 μg·cm-2·h-1，其24 h累积透过率分别为（31.51±1.33）%，（12.38±1.28）%，皮肤滞留率分别为（0.92±0.45）%，（4.81±1.03）%。蛇床子素能在皮肤中形成贮库。冲和凝胶释药性优于油膏。芍药苷、蛇床子素透皮行为分别符合Weibull方程与Higuchi方程。 　　[关键词] 冲和凝胶；芍药苷；蛇床子素；透皮吸收 　　[收稿日期] 2013-03-14 　　[基金项目] 国家自然科学基金面上项目；国家科技重大新药创制专项（2012Z046）；北京中医药大学校级课题项目（2011JYB22XS-052）；天津市高校双五科技计划项目（S 　　[通信作者] *杜守颖，教授，博士生导师，主要从事中药新剂型与制剂关键技术研究，Tel：（010E-mail：dushouying@263.net 　　[作者简介] 王艳明，博士研究生，主要从事中药新制剂研究，E-mail：wymingming@163.com 冲和膏源于明代陈实功《外科正宗》，具有行气疏风、活血定痛、散瘀消肿、祛冷软坚、祛寒逐湿之功效。其作为治疗脱疽初期的有效经典方剂，由紫荆皮、赤芍、独活、白芷、石菖蒲组成，临床多以冲和油膏使用。近年来，冲和膏在治疗以缺血性疼痛、麻木、皮肤发凉等为主要表现的糖尿病足早期病变方面日益引起重视，具有很好的开发应用前景。本课题组将冲和膏改进，制成冲和凝胶，患者可直接涂在患处。其具有不油腻、涂布性好、易清洗、不污染衣物等特性，在一定程度上方便患者的用药。本研究以芍药苷、蛇床子素为指标，考察冲和凝胶体外透皮特性，探索冲和凝胶透皮机制，为新制剂的开发提供数据支持。 　　1 材料 　　Agilent 1200高效液相色谱仪；ALC-1104电子天平（上海精密科学仪器有限公司）；KQ-300B型超声波清洗器（功率250 W，频率40 kHz，昆山市超声仪器有限公司）；TK-20A型透皮扩散试验仪（上海锴凯科技贸易有限公司）；TD24-WS低速台式离心机。 　　芍药苷、蛇床子素对照品（质量分数均≥98.8%，天津中新药业研究中心）；冲和凝胶（自制，批芍药苷质量分数8.96 mg·g-1，蛇床子素2.68 mg·g-1）；冲和膏（天津中医药大学第一附属医院，批；无水乙醇（分析纯）、乙腈（色谱纯）购于天津市康科德科技有限公司；去离子水由MILLIPORE超纯水系统（M3LL3Q/30L）制备。 　　Wistar大鼠，雄性，200 g左右，天津市放射医学研究所提供，实验动物许可号SCXK（津）2005-0001。 　　2 方法与结果 　　2.1 含量测定方法的建立 　　2.1.1 色谱条件 参照本课题组已建立的方法[1]，芍药苷选用230 nm、蛇床子素选用330 nm波长进行检测。该色谱条件下芍药苷、蛇床子素的HPLC图见图1。皮肤组织浸出液中各组分均不干扰测定。 　　A. 空白透皮液；B. 对照品；C. 样品；1. 芍药苷；2. 蛇床子素。 　　图1 不同样品的高效液相色谱图 　　Fig.1 HPLC chromatograms of different samples 　　2.1.2 线性关系考察 用流动相配制系列质量浓度的芍药苷和蛇床子素的混合对照品溶液，进样量20 μL。以峰面积 A 对浓度 C 进行线性回归，芍药苷、蛇床子素的回归方程分别为 A =26.465 C-0.875， r =0.999 8； A =34.365 C-6.591， r =0.999 9。线性范围分别为0.947 6～947.63，0.191 6～191.6 mg·L-1。 　　2.1.3 精密度试验 在线性范围制备芍药苷/蛇床子素低、中、高3个浓度的芍药苷和蛇床子素混合对照品溶液各3份，每个浓度用HPLC连续重复进样6次，考察分析方法的日内精密度，计算RSD。芍药苷日内和日间RSD分别为1.9%，1.3%，蛇床子素日内和日间 RSD 分别为0.23%，0.54%。精密度良好。 　　2.1.4 稳定性试验 取冲和凝胶24